Общая микробиология
 Скачать 0.8 Mb.
|
|
Лечение сибирской язвы. Основными медикаментозными средствами, используемыми для лечения сибирской язвы у людей, являются антибиотики и противосибиреязвенная сыворотка или противосибиреязвенный иммуноглобулин. Сибиреязвенный микроб обладает высокой чувствительностью к пенициллинам, цефалоспоринам, аминогликозидам, тетрациклинам, фторхинолонам. Меньшую чувствительность он проявляет к макролидам, линкозамидам, фениколам, а к полимиксинам возбудитель сибирской язвы устойчив. В связи с этим устойчивость сибиреязвенного микроба к полимиксинам используется в качестве критерия при выделении возбудителя из внешней среды. Для лечения сибирской язвы используют такие антибиотики как пенициллин, ампициллин, тетрациклин, гентамицин, тобрамицин, стрептомицин, фторхинолоны и многие другие препараты. Рекомендуется использовать также комбинации антибиотиков друг с другом (пенициллин со стрептомицином, пенициллин с тетрациклином, ампициллин с гентамицином и т.д.). Наряду с антибиотиками для лечения сибирской язвы применяют лечебную противосибиреязвенную сыворотку или противосибиреязвенный иммуноглобулин. Такая схема лечения рекомендуется при любой форме заболевания. При легком течении заболевания (незначительный отек, отсутствие тенденции к увеличению размеров некроза, слабо выраженная интоксикация) больному назначают лишь антибиотики (пенициллин по 500 тыс. – 1 млн. ЕД внутримышечно 6-8 раз в сутки в течение 5-7 дней; тетрациклин по 0,05-0,1 г внутримышечно 2-3 раза в сутки в течение 5-7 дней). При среднетяжелом и тяжелом течении сибирской язвы (выраженная склонность отека и некроза к увеличению с усилением явлений интоксикации) лечение антибиотиками сочетается с введением противосибиреязвенного глобулина (40-50 мл внутримышечно однократно). Индивидуальную чувствительность к глобулину проверяют внутрикожной пробой. С этой целью разведенный глобулин вводят внутрикожно в количестве 0,1 мл. Проба считается отрицательной, если через 20 минут после введения диаметр папулы не превышает 0,9 см. После этого пробу повторяют с неразведенным глобулином. И только при отсутствии через 30 минут реакции на месте введения неразведенного глобулина вводят лечебную дозу глобулина. В случае крайне тяжелого течения заболевания дозу антибиотиков и глобулина значительно увеличивают. Профилактика сибирской язвы. Неспецифическая профилактика. Основными направлениями профилактики сибирской язвы у людей является проведение ветеринарносанитарных мероприятий: вакцинация восприимчивых животных; изоляция больных и подозрительных животных, уничтожение трупов погибших животных и обеззараживание объектов (подстилка, навоз), обезвреживание мест содержания больных животных; учет и ликвидация почвенных очагов (мест сохранения возбудителя в почве); очистка водопоев, осушение заболоченных участков; организация скотомогильников (глубина ямы не менее 2 м, использование хлорной извести при захоронении трупов животных); проведение санитарноограничительных мероприятий; санитарный надзор за предприятиями, занятыми переработкой животного сырья; разъяснительная работа среди населения. Необходимо добиваться прекращения бесконтрольного убоя животных, соблюдения правил утилизации, уборки и уничтожения трупов, осуществлять надзор за заготовкой сырья животного происхождения, следить за санитарным состоянием ферм, пастбищ, водопоя, трасс прогона скота. Очень важно регистрировать и изолировать инфицированные территории с сибиреязвенными захоронениями. Скотомогильники огораживают и дезинфицируют. На угрожаемой территории обязательно контролируют выполнение ветеринарно-санитарных правил при проведении гидромелиоративных, строительных и других земляных работ. При вспышке сибирской язвы немедленно устанавливают карантин. Запрещают ввод, вывод, перегруппировку животных, убой на мясо, заготовку и вывоз продукции животноводства. Всех животных клинически обследуют. Больных и подозрительных по заболеванию изолируют и лечат, а через 14 дней после выздоровления вакцинируют. Клинически здоровых вакцинируют немедленно. Молоко от больных животных обеззараживают и уничтожают, а от подозреваемых в заражении – допускают к употреблению после кипячения. Трупы сжигают, захоронение их при сибирской язве запрещено. Места, где были трупы или больные животные тщательно дезинфицируют. Почву орошают раствором хлорной извести, содержащим 5% активного хлора (10 л на 1 кв. м), затем перекапывают на глубину 25 см и перемешивают с сухой хлорной известью, содержащей не менее 25% активного хлора (на 3 части почвы 1 часть хлорной извести). После этого сухую почву увлажняют. Инфицированный навоз сжигают. Все кожевенное сырье исследуют в лаборатории на сибирскую язву, контаминированное сырье сжигают. Карантин снимают через 15 суток после последнего случая гибели или выздоровления животного, окончания реакции на прививки и проведения заключительных ветеринарно-санитарных мероприятий. При выявлении случаев сибирской язвы на мясокомбинатах убой животных прекращают и проводят обеззараживание всех инфицированных объектов. Для специфической профилактики сибирской язвы среди животных в 1881 г. французский естествоиспытатель Луи Пастер предложил две живые вакцины (I и I вакцины Пастера), отличающиеся друг от друга по степени ослабления вирулентности. Разработанные вакцины Л. Пастер предложил использовать для иммунизации сельскохозяйственных животных. Первые прививки животных против сибирской язвы были проведены в мае 1881г. В настоящее время для профилактики сибирской язвы у людей применяют живую вакцину СТИ (приготовлена из бескапсульного штамма В. anthracis СТИ-1), химическую вакцину (на основе протективного антигена штамма СТИ-1), комбинированную вакцину (на основе спор бескапсульного штамма СТИ-1 и протективного антигена этого же штамма). Все вакцины применяются по эпидемиологическим показаниям. За рубежом в практике ветеринарии и медицины используют только химическую вакцину, представляющую собой очищенный протективный антиген, продуцируемый клетками штамма Sterne на специальных питательных средах. Иммунобиологические препараты для диагностики, профилактики и лечения сибирской язвы 1.Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка для постановки реакции термопреципитации по Асколи. Получают из крови кроликов, гипериммунизированных убитой культурой (или вакциной СТИ), или из крови лошадей, гипериммунизированных смесью штаммов живой слабовирулентной культуры сибиреязвенного микроба. 2.Антраксин – аллерген для постановки кожно-аллергических проб при диагностике сибирской язвы и при оценке напряженности противосибиреязвенного иммунитета. Получают путем гидролиза клеток акапсулированного штамма СТИ-1 или капсулообразующего штамма 71/12. Бактериальную массу получают путем глубинного культивирования клеток. Гидролизат бактериальных клеток фильтруют или центрифугируют и стабилизируют методом лиофильного высушивания. 3.Сибиреязвенная живая сухая вакцина СТИ – лиофилизированные живые споры вакцинного штамма СТИ-1. Выпускается в ампулах по 1 мл (10 человеко-доз для накожного применения и 100 человеко-доз для подкожного применения). Перед использованием растворяется в 30%-ном водном растворе глицерина. Вакцина предназначена для специфической профилактики сибирской язвы у людей. Применяется накожным и подкожным способами. Первичная иммунизация – двукратно с интервалом в 21 день, ревакцинация – через год однократно. Накожная прививочная доза должна содержать 4-5х108 живых спор. Подкожная прививочная доза должна содержать 4-5х107 живых спор. Местные прививочные реакции проявляются в виде гиперемии, инфильтрата, мелких узелков через 24-48 часов. Общая реакция проявляется в виде недомогания, головной боли, повышения температуры в первые сутки. Срок годности вакцины 3 года. 4.Сибиреязвенная химическая вакцина – лиофильно высушенный протективный антиген штамма СТИ-1, сорбированный на геле гидроокиси алюминия. Вакцина предназначена для специфической профилактики сибирской язвы по эпидемиологическим показаниям. 5.Вакцина сибиреязвенная комбинированная предназначена для специфической профилактики сибирской язвы по эпидемиологическим показаниям. Вакцина содержит споры бескапсульного штамма СТИ-1 и протективный антиген сибиреязвенного микроба, сорбированный на геле гидроокиси алюминия. В одной прививочной дозе содержится 40-60 млн. живых спор штамма СТИ-1, 30-40 ИД50 протективного антигена и не более 2,5 мг геля гидроокиси алюминия. Прививочная доза – 0,5 мл. Первичная иммунизация проводится один раз в год подкожно. 6.Противосибиреязвенный иммуноглобулин – глобулиновые фракции сыворотки крови лошадей, иммунизированных сорбированным протективным антигеном или спорами штаммов СТИ-1 и Ихтиман. Выпускается во флаконах по 20 мл и представляет собой жидкость бело-сероватого цвета. Применяется для экстренной профилактики и лечения сибирской язвы у людей. Препарат вводится внутримышечно в подогретом (37ОС) виде. Лечебная доза составляет 30-50 мл. Для экстренной профилактики взрослым вводится 20-25 мл, детям – 5-8 мл. Перед введением обязательно проводят внутрикожную пробу для выявления чувствительности к чужеродному белку. Возможны реакции на введение глобулина: повышение температуры, озноб, судороги, появление сыпи. Срок годности препарата - 2 года. 15 вопрос. Этиология столбняка. Свойства возбудителя. Патогенез болезни. Иммунитет. Специфическая профилактика и специфическая терапия. Классификация. Возбудитель столбняка по современной классификации относится к царству бактерии, типу Firmicutes, порядку Clostridiales, семейству Clostridiaceae, роду Clostridium, виду Clostridium tetani. По структуре Н-антигена выделяют 10 сероваров возбудителя, не отличающихся по другим свойствам друг от друга. Морфологические и тинкториальные свойства. Возбудитель столбняка может существовать в виде вегетативных клеток или спор. Вегетативная клетка С. tetani представляет собой крупную палочку с закругленными концами. При неблагоприятных условиях внешней среды возбудитель столбняка образует споры круглой формы, располагающиеся терминально. Диаметр споры превышает поперечник вегетативной клетки, поэтому клетка со спорой имеет вид барабанной палочки. Вегетативные клетки C. tetani обладают подвижностью за счет наличия жгутиков. Одна клетка имеет до 20 жгутиков и более. Столбнячная палочка капсул не образует. Культуральные, биохимические и антигенные свойства. Возбудитель столбняка является облигатным анаэробом, поэтому не продуцирует ферменты, необходимые для аэробного дыхания (цитохромоксидаза, пероксидаза, каталаза). Столбнячная палочка растет при температуре от 14 до 45°С. В качестве жидких питательных сред для выращивания возбудителя столбняка используют среду Китта-Тароцци, бульон Мартена, среду Вейнберга. Для создания анаэробных условий среды разливают высоким столбиком, помещают в них адсорбенты кислорода (кусочки печени или мяса), сверху наносят слой вазелинового масла. Перед посевом среды дополнительно кипятят на водяной бане с целью удаления растворенного кислорода. В жидких питательных средах столбнячная палочка вызывает равномерное помутнение. В плотные питательные среды для культивирования С. tetani добавляют кровь, сыворотку крови, молоко, яичный желток. Для обеспечения анаэробных условий культивирование на плотных питательных средах осуществляют в анаэростатах или в герметизируемых специальных контейнерах с использованием газогенерирующих пакетов типа Gas Pack. На поверхности агаровых сред в анаэробных условиях образуются прозрачные со стеклянным блеском сливающиеся паукообразные шероховатые колонии R-формы с отростками. На средах с кровью выявляется зона гемолиза. При посеве уколом в столбик агара образуются мелкие колонии, похожие на кусочки ваты. С. tetani не обладает сахаролитической и протеолитической активностью. Не образует индола. Некоторые штаммы ферментируют глюкозу, медленно пептонизируют молоко и разжижают желатин с образованием газа. Обладает фибринолитической активностью. Возбудитель столбняка обладает групповым специфическим термостабильным О-антигеном и типоспецифическим термолабильным Н-антигеном. Эпидемиология. Столбняк встречается повсеместно. Наибольшее распространение он имеет в странах с жарким и влажным климатом. Естественным резервуаром возбудителя и источником инфекции является почва. Возбудитель столбняка обнаруживается в 20-100% проб почвы. Кроме того, столбнячная палочка относится к постоянным обитателям кишечника травоядных животных и обнаруживается в кишечнике 5-40% здоровых людей. Попадая с фекалиями в почву, палочка превращается в споровую форму. Споры столбнячной палочки из почвы попадают на растения и овощи, с которыми вновь проникают в кишечник животных и человека. Из внешней среды возбудитель заболевания попадает в организм человека при ранениях, ожогах, обморожениях, при родах и абортах, протекающих в антисанитарных условиях. Развитию столбняка способствует не только загрязнение ран почвой, но и наличие нежизнеспособных тканей и инородных тел в ране, запоздалая первичная обработка раны, отсутствие у больного иммунитета. В глубокой ране, имеющей размозженные ткани и обеспечивающей анаэробные условия, благоприятные для развития возбудителя, споры трансформируются в вегетативные клетки, продуцирующие столбнячный токсин. Для столбняка характерен контактный механизм передачи возбудителя. Путь передачи - раневой: бытовые и производственные травмы, ранения, ожоги, обморожения, операционные и инъекционные раны. Основную группу риска составляют работники сельского хозяйства и дорожные рабочие. Больной человек для окружающих не опасен. В летние месяцы заболеваемость столбняком выше. Чаще болеют мужчины. В странах, где отсутствует плановая вакцинация, часто заболевают новорожденные и дети младшего возраста. При этом смертность у новорожденных достигает 95%. Факторы патогенности возбудителя. Возбудитель столбняка, проникнув в рану, размножается в месте входных ворот инфекции. Внутри вегетативных клеток в процессе размножения накапливается токсин, который высвобождается при лизисе микробных клеток. Столбнячный токсин является основным фактором патогенности возбудителя. Он состоит из двух фракций - тетаноспазмина (нейротоксина, TeNT) и тетанолизина (гемолизина). Летальная доза столбнячного токсина для человека составляет 2 нг/кг массы тела. Ведущая роль в развитии заболевания принадлежит тетаноспазмину. Тетаноспазмин относятся к группе частично секретируемых экзотоксинов (частично секретируется во внешнюю среду, а частично ассоциирован с бактериальной клеткой). Тетаноспазмин вызывает длительное напряжение мышц (мышечную ригидность) и их болезненное сокращение (тетанус). Между одиночными сокращениями полного расслабления мышцы не происходит, поэтому мышца находится в максимально сокращенном состоянии. Тетанолизин обладает гемолитическим и кардиотоксическим действием, вызывая развитие метаболического ацидоза. При добавлении к столбнячному токсину формалина и выдерживании смеси при повышенной температуре экзотоксин превращается в анатоксин или токсоид, который применяют для специфической профилактики столбняка у человека или для гипериммунизации животных с целью получения антитоксина. Тетаноспазмин представляет собой одноцепочечный пептид молекулярной массы 150 кД. Под воздействием собственных и тканевых протеаз столбнячный токсин превращается в димер, состоящий из тяжелой (молекулярная масса 100 кД) и легкой (молекулярная масса 50 кД) цепей, соединенных дисульфидной связью. Легкая (L) цепь содержит цинк-связывающий участок, необходимый для проявления протеазной активности токсина. Тяжелая (H) цепь состоит из домена связывания с ганглиозидными рецепторами нервной клетки (С-концевой домен, Стерминальная последовательность, НС) и домена трансмембранного перемещения (N-концевой домен, N-терминальная последовательность, HN). Патогенез заболевания. Тетаноспазмин из входных ворот инфекции по лимфатическим и кровеносным путям достигает нервно-мышечного синапса. Тяжелая цепь посредством НС-домена взаимодействует с дисиалоганглиозидами отростка нервной клетки и внедряется HN-участком в мембрану. После этого происходит транспортировка L-цепи в отросток нервной клетки путем эндоцитоза. Легкая (L) цепь содержит цинк-связывающий участок, необходимый для проявления протеазной активности токсина. Тяжелая (H) цепь состоит из домена связывания с ганглиозидными рецепторами нервной клетки (С-концевой домен, Стерминальная последовательность, НС) и домена трансмембранного перемещения (N-концевой домен, N-терминальная последовательность, HN). Тетаноспазмин из входных ворот инфекции по лимфатическим и кровеносным путям достигает нервно-мышечного синапса. Тяжелая цепь посредством НС-домена взаимодействует с дисиалоганглиозидами отростка нервной клетки и внедряется HN-участком в мембрану. После этого происходит транспортировка L-цепи в отросток нервной клетки путем эндоцитоза. Одновременно путем ретроградного транспорта по периневральному пространству с током внутриневральной жидкости и с участием белков динеинов токсин переносится в тела мотонейронов, расположенных в центральной нервной системе (спинном и продолговатом мозге). Легкая цепь токсина разрушает в нервной клетке синаптобревин (один из везикуло-ассоциированных белков, VAMP) и блокирует высвобождение тормозных нейромедиаторов (глицина и ГАМК) из нервных окончаний в синаптическую щель. В результате этого на мышечное волокно поступают только возбуждающие импульсы. Устранение тормозного воздействия на мышечное волокно приводит к резкому повышению мышечного тонуса (гипертонусу) и гиперрефлексии. При этом малейшие внешние раздражители вызывают тетанические судороги. При местном столбняке поражаются нервные окончания и развиваются судороги мышц непосредственно в области раны. При генерализованном процессе образовавшийся в ране тетаноспазмин с кровью разносится по организму, связывается с нервными окончаниями и по соответствующим аксонам переносится в спинной и продолговатый мозг. Поэтому при генерализованном столбняке в процесс последовательно вовлекаются мышцы головы, туловища и конечностей. |