Методичка 10. Зоонозы. 3 jersinia pestis возб чумы
 Скачать 140 Kb.
|
3.1. JERSINIA PESTIS – ВОЗБ ЧУМЫЧума – острое инфекционное заболевание, которое характеризуется сильнейшей интоксикацией, специфическим поражением лимфоузлов с развитием септицемии и тенденцией к эпидемическому и пандемическому распространению. Таксономия Семейство: Enterobacteriaceae род - Jersinia вид - Jersinia pestis История изучения заболевания.С древних времен чума известна как заболе, протекающее в виде эпидемий с большим числом смерт исх. Эпидемии чумы известны с Ш века до н.э. им о 3 пандемиях. Первая из них описана в 527 - 565 г.г. известная как «юстинианова» чума, она свирепствовала в Египте и Восточно-Римской империи и привела к огромным потерям среди населения. Вторая пандемия, названная «черной смертью», охватила Рим, Средиземноморье и Западную Европу в 1345 –1350 г.г., она унесла жизни около 25 миллионов человек. Не обошла она и Россию. По свидетельству Карамзина («История государства Российского»), в результате прошедшей эпидемии целиком вымерло население городов Глухово и Белозерск, а в Смоленске уцелело лишь 5 жителей. В Лондоне в ту эпидемию вымерло 20% населения. Третья пандемия началась в 1895 г в Гонконге; за 20 лет умерли свыше 10 миллионов человек.В самом начале 3-й эпидемии были сделаны важнейшие открытия: был выделен возбудитель чумы и была доказана роль крыс в распространении чумы. Заболевание изучил Г.Н..Минх (1878) Возбудителя обнаружили одновременно и независимо друг от друга французские ученые Иерсен и Китазато в 1894 году. Большой вклад в изучение эпидем чумы внесли русские ученые. Так, В.И.Исаев, И.И.Мечников изучили эпидемиологию чумы, а Д.С.Самойловичем была сделана попытка получения вакцины; под его руководством работали противочумные отряды в Архангельской области. В 40-х годах ХХ в. отмечена последняя эпидемическая вспышка чумы в Северной Америке. Тем не менее, с !957 по 1979 было зарегистрировано около 47000 случаев чумы. Морфология возбудителя. Чумная палочка им мелкие размеры (0,3-0,7х 1-2мкм), овоидную форму (коккобацилла), похожую на бочонок, окрашив биполярно (особенно хорошо выраж при окраске метиленовым синим или по Романов-Гимзе). Палочки чумы – грам(-), склонны к ви-полиморфизму, могут образовывать нитевидные, колбовидные, шаровидные формы. В мазках из патологического материала палочки располагаются цепочками. На кровяных средах при 370С образуют нежную капсулу, которая лучше выявляется при выращивании возбудителя на слегка кислых средах. Спор и жгутиков не имеют. Культуральные свойства. Микроорганизмы хорошо растут на простых питательных средах. Для культивирования обычно применяются среды с добавлением гемолизированной крови, генцианвиолета, сульфата натрия, (последний подавляет рост сопутствующей микрофлоры). На поверхности жидкой питательной среде через 48 часов культивирования образуется пленка со спускающимися вниз нитями и хлопьевидный осадок («сталактитовый рост»). На плотных питательных средах при 370С вырастают серовато-слизистые колонии, гладкие или шероховатые. Вирулентные штаммы образуют обычно R-колонии и синтезируют темный пигмент. При микроскопическом изучении молодых колоний (через 10-12 часов культивирования) обнаруживаются микроколонии с неровными краями, напоминающие битое стекло. Позднее (через 18-24 часа) они сливаются, и появляются нежные плоские образования с фестончатыми краями и темным зернистым центром («кружевные платочки»). Зрелые колонии (40-48 час) - крупные с бурым зернистым центром и неровными краями («ромашки»). На скошенном агаре через 48 часов выращивания при 370С образуется серовато-белый налет, врастающий в агар. Оптимум роста: рН=6,9 – 7,2, температура – от 28 до 300 С. Капсула лучше образуется на кровяном агаре при 370 С. Биохимическая активность. Возбудитель расщепляет многие сахара; глюкозу, галактозу, мальтозу и многие другие) с образованием кислоты, без газа. По отношению к глицерину различают 2 варианта возбудителей: глицерин-позитивный (континентальный) и глицерин-негативный (океанический). Чумная палочка не ферментирует рамнозу. Желатину не разжижает, не образует индол и сероводород, не восстанавливает нитраты в нитриты, не расщепляет мочевину, реакция Фогес-Проскауэра - отрицательная. Антигенная структура Чумные палочки содержат до 18 антигенов, но не все они хорошо изучены. ОСА (основной соматический антиген), токсичен для человека и животных (белых крыс и мышей). О-антиген - эндотоксин, похожий на эндотоксин многих других грам(-) бактерий. F1–антиген (фракция-1) - основной компонент поверхностной структуры клетки, защищает бактерии от фагоцитоза и обусловливает иммуногенные свойства возбудителя. VW – это фактически 2 антигена, они всегда встречаются вместе у вирулентных штаммов: V-антиген - белок, W-фракция- липопротеин, обладающий антифагоцитарным действием и способствующий внутриклеточному размножению микробов. Т-антиген (мышиный токсин) белковоподобное вещество, располагается внутри клетки, блокирует функции митохондрий клеток печени и селезенки. При введении лабораторным животным вызывает у них шок и быструю гибель. Возбудитель чумы выделяет бактериоцины (пестицины), обладающие иммуногенным действием. Факторы патогенности. Большинство из перечисленных выше антигенов являются одновременно и факторами патогенности. Имеются также токсические субстанции, выделяемые палочками чумы, которые обладают свойствами эндо- и экзотоксинов. Ферменты патогенности: лецитиназа, гиалуронидаза, фибринолизин, плазмокоагулаза. Структурные компоненты клетки: капсула, пили-1, обеспечивающие адгезию на клетках различных органов и тканей. Гены, детерминирующие синтез большинства факторов патогенности, локализованы в плазмидах. Такими образом, палочка чумы продуцирует множество факторов патогенности, является одним из самых патогенных и агрессивных возбудителей среди бактерий, в связи с чем ее относят к 1 группе микроорганизмов по степени биологической опасности для человека. Резистентность Палочка обладает значительной устойчивостью во внешней среде. Она хорошо сохраняется в экскрементах больных и на объектах внешней среды. В гнойном содержимом бубонов выживает 20-30 дней, в трупах животных (верблюдов, грызунов) – до 60 дней; в мокроте больных - до 10 суток; на одежде и белье – несколько недель; в трупах погибших больных - неопределенно длительное время, особенно при низких температурах. В организме блох живут до 346 дней; на овощах и фруктах – 6-11 суток. Высоко чувствительны чумные палочки к УФЛ, высушиванию, повышенной температуре. При нагревании до 600 С возбудители погибают за 1 час, при кипячении – за несколько минут. Чувствительны также к действию дезинфектантов: 3-5% растворы карболовой кислоты и лизола убивают их за 5-10 мин. Экология и распространенность. Возбудители чумы распространены на Земле повсеместно, они выявляются в разных странах. Различают очаги заболевания синантропные и природные. Заболеваемость более свойственна для степных и засушливых регионов Эпидемиология. Основной резервуар и источник инфекции – дикие грызуны (почти 300 видов), которые распространены повсеместно. Источниками инфекции в природе являются сурки, суслики, песчанки, полевки; в городах очаги чумы – синантропные серые крысы, живущие в канализационных трубах; черные крысы, обитающие на морских судах. Сохранение чумной инфекции происходит, главным образом, благодаря передаче возбудителя от больных животных здоровым. Механизм передачи инфекции чаще всего – трансмиссивный. Переносчиками являются, в основном, взрослые особи крысиных блох, пожизненно сохраняющих возбудителя. Человек заражается не столько при укусе блохи, сколько после втирания в кожу ее фекалий или срыгиваемых рвотных масс. (Бактерии, размножающиеся в кишечнике блохи, выделяют коагулазу, образующую пробку в глотке и препятствующую поступлению пищи в ее организм; попытка голодной блохи насасывания крови сопровождается срыгиванием зараженных масс в месте укуса). Алиментарный путь заражения реализуется при приеме пищи, инфицированной возбудителем (например, мяса больных животных, не подвергавшегося достаточной тепловой обработке). Контрактный путь заражения возможен, когда возбудитель проникает через поврежденные кожу или слизистые при разделке туш зараженных животных (зайцев, лис, сайгаков). Воздушно-капельнйм путь заражения реализуется при легочной форме чумы, когда возбудитель в больших количествах попадает в воздух с мокротой больного, выделямой при кашле. Чума – трансмиссивный антропозооноз, способный вызывать как спорадические случаи заболевания, так и вспышки, эпидемии. Патогенез и клинические особенности. Естественная восприимчивость людей к возбудителю чумы – очень высокая. Чумная палочка очень быстро размножается в организме человека; бактерии в большом количестве вырабатывают разнообразные факторы патогенности, что способствует быстрому лимфогенному и гематогенному обсеменению органов. Патогенез чумы включает 3 стадии. 1. Внедрение возбудителя в организм происходит в месте укуса блохи. Он быстро попадает в лимфоузлы, где кратковременно задерживается. В лимфоузлах образуются чумные бубоны с развитием воспалительных, геморрагических и некротических явлений. 2. Распространение в кровоток (бактериемия) происходит довольно быстро. При этом развивается сильнейшая интоксикация с проявлениями геморрагий. Бактерии активно поглощаются фагоцитами, но фагоцитоз – незавершенный, поэтому он способствует дальнейшему распространению возбудителя. 3. Микробы распространяются до забарьерных клеточных систем. После преодоления ретикуло-гистиоцитарного барьера происходит диссеминация возбудителя по различным органам и системам. Микроциркуляторные нарушения вызывают изменения в сердечной мышце, сосудах и в надпочечниках, что обусловливает острую сердечно-сосудистую недостаточность. Приаэрогенном пути заражения поражаются альвеолы. В них развивается воспалительный процесс. Последующая бактериемия сопровождается интенсивным токсикозом и развитием септико-геморрагических проявлений в различных органах и тканях. Клинические проявления во многом зависят от способа заражения и от входных ворот инфекции. Инкубационный период – 3-6 суток, при токсических формах – 1-2 дня Различ кожную, бубонную, легочную, кишечную, септическую формы. Общая симптоматика: характерно острое начало болезни с потрясающим ознобом, повышением температуры, интоксикацией. Отмечаются сильнейшие головные, суставные, мышечные боли, жажда, рвота (нередко кровавая). Появляются галлюцинации, бред. У больных – характерный вид: одутловатость лица, инъекция склер, выражение ужаса на лице («маска чумы»). Наблюдается аритмия, падение артериального давления. Кожная форма характериз образов карбункула на месте внедрения возб. На его месте затем появл черный струп, после его отторжения остается рубец. Бубонная форма отлич увелич и болезненностью региональных лимфу, подмышечных и паховых. проявляется сильнейшими болями в подложечной области, профузной диареей с обильным выделением крови с слизи. Протекает тяжело и обычно заканчивается летально. Первично-легочная форма имеет молниеносное течение и чрезвычайно контагиозна (с обильной мокротой больные выделяют огромные коли чества микробов). Смертность при данной форме достигает 100%. Первично-септическая форма протекает с сильнейшей интоксикацией, проявляется многочисленными кровоизлияниями в кожу и слизистые оболочки. Возможно развитие массовых кровотечений из почек, кишечника, желудка. Заболевание быстро заканчивается смертью больного. Иммунитет Формирующийся постинфекционный иммунитет, в основном, гумор, напряженный, длит (пожизненный). Профилактика. При неспецифической профилактике решающую роль играют мероприятия, исключающие завоз инфекции из других стран и предупреждающие возникновение заболевания на территории природных очагов. Существуют международные медико-санитарные правила по контролю за распространением инфекции. В очагах следят за составом и численностью грызунов, исследуют их экзопаразитов на инфицированность чумной палочкой. При выявлении эпизоотий проводится дератизация, дезинфекция. Для специфической профилактики используются живая аттенуированная вакцина из штамма EV, а также химическая вакцина. Вакцинация – по эпидпоказаниям, однократная, ревакцинация – через год. Длительность поствакцинального иммунитета –1 год Особенности микробиологической диагностики. Диагн чумы осуществл специализир лаборат. Мат для исслед явл: отделяемое бубонов, язв, мокрота, слизь из зева, кровь, испражнения, секционный материал. Применяются методы исследования: бактериоскопический (окраска мазков из исследуемого материала по Граму и метиленовым синим, РИФ); бактериологический (посев на МПА с генцианвиолетом и сульфитом натрия для выделения чистой культуры возб и его последующей идентиф); биолог метод (он имеет большое значение, когда исследуемого материала мало и он загрязнен посторонней микрофлорой; материалом заражают морских свинок накожно или подкожно, затем выявляют антигены возбудителя в тканях погибших живот). Для серодиаг исполь РНГ, РИФ. Экспресс -диагностика осуществляется с использованием РИФ и ИФА 3.3. БРУЦЕЛЛЫ – ВОЗБУДИТЕЛИ БРУЦЕЛЛЕЗА Бруцеллез – зоонозное инфекционно-аллергическое заболевание, склонное к хронизации и протекающее с преимущественным поражением опорно-двигательного аппарата, сердечно-сосудистой, нервной и половой систем. История открытия возбудителей. Бруцеллез как заболевание известен давно, со времен Гиппократа, но научное его изучение началось в 60-х годах Х1Х века. В то время оно получило название «средиземноморская, или мальтийская лихорадка» В 1886 г. Д.Брюс обнаружил возбудителя заболевания в мазках из селезенки погибшего от бруцеллеза больного ( впоследствии этот возбудитель был назван В.melitensis). В 1897 году датские ученые выделили сходные микроорганизмы при инфекционных абортах у коров. В 1914 г. Д Траум обнаружил аналогичных возбудителей у больных свиней и назвали их В.suis. В 1920 г эти бактерии были объединены в один род, названный в честь Д.Брюсса бруцеллами. Позднее были выделены другие виды бруцелл: в 1957 г - В.neotomae (от кустарниковых крыс); в 1970 – В. оvis (от барана); В.canis (от гончих собак). Серологические исследования при диагностике бруцеллеза были начаты в 1897 году А.Райтом и Д.Семплом. Большой вклад в изучение заболевания внесли русские ученые А.Ф.Билибин, Г.П.Руднев, А.А.Вершилова и другие. Таксономия Род - Вrucella, виды: В. abortus , В.melitensis, В.suis, В.саnis, В ovis, В.neatomae. Наиболее патогенны для человека – первые 3 вида. Морфология. Возбудители представляют собой мелкие кокковидные палочки размерами 0,6 -1,5 х О,5 – 0,7 мкм, грам (-), неподвижные, спор не образуют. Свежевыделенные штаммы могут образовывать нежную капсулу. Бруцеллы отличаются выраженным полимофизмом; в мазках бактерии располагаются беспорядочно. Культуральные свойства. Бруцеллы – строгие аэробы. Они требовательны к питательным средам, для их роста необходимы тиамин, ниацин, биотин. Они хорошо растут на печеночном, сывороточном или кровяном агаре (с добавлением 0,5% эритроцитов барана). Особенностью бруцелл бычьего типа является их потребность в повышенном содержании в атмосфере углекислого газа. На плотных питательных средах бруцеллы образуют выпуклые гладкие мутноватые колонии с перламутровым оттенком (S-формы). При длительном выращивании колонии приобретают желто-зеленый оттенок. Возможна диссоциация в R-формы. В жидких средах наблюдается рост в виде диффузного помутнения. Характерен медленный рост бруцелл, особенно - первых генераций: при посеве из органов появляются через 1-3 недели и более. При пересеве лабораторных культур рост наблюдается через 1-2 дня. Оптимальные условия культивирования: температура - 370С, рН среды – 6,6-7,4. Биохимическая активность Выражена слабо: бруцеллы ферментируют глюкозу и арабинозу до кислоты, разлагают белки с образованием сероводорода, восстанавливают нитриты, индол не образуют. Разделение на виды основано на биохимических различиях, в частности, на способности расти на средах с фуксином и тионином, на лизабельности специфическими фагами, а также на агглютинабельности монороцепторными сыворотками. Антигенная структура . У бруцелл выявлено до 15 антигенных фракций. Различают родовой и поверхностный антигены. М-антиген доминирует у В.melitensis ; A-антиген преобладает у В. abortus и В suis; R-антиген свойственен шероховатым формам. Третий, поверхностный антиген L, термолабильный, имеет сходство с Vi-антигеном сальмонелл. Имеются общие антигены с возбудителями туляремии и с холерными вибрионами. Факторы патогенности. Бруцеллы обладают эндотоксином, имеющим высокую инвазивную способность. Они продуцируют также ферменты патогенности: гиалуронидазу и нейраминидазу. Адгезивные свойства связаны с пилями-1 и белками наружной мембраны. Считают, что возбудитель, обладая высокой инвазивностью, может проникать в организм человека через неповрежденые кожные и слизистые покровы. Бруцеллы могут образовывать капсулу. Кроме того, бруцеллы обладают выраженными аллергогенными свойствами. Резистентность Возбудители довольно устойчивы во внешней среде: при температуре 10-130 С они могут сохраняться в воде и влажной почве до 5 месяцев, в молоке – 9 месяцев, в сыре – до 1 года. Они устойчивы к низким температурам, и в замороженном мясе выживают до 5 месяцев. Хуже они переносят высокую температуру: при 700С погибают в течение 10 минут, при кипячении – мгновенно. Чувствительны к 3 % раствору хлорной извести. 1% хлорамину, 0,5% лизолу, 2% формалину, которые губят их за 5 минут . Эпидемиология. Основной источник и резервуар инфекции - больные домашние животные: овцы, козы, свиньи, крупный рогатый скот. В редких случаях источником инфекции могут быть лошади, верблюды и некоторые другие животные, которые выделяют возбудителя с молоком, мочой, калом, околоплодной жидкостью. У человека наиболее часто заболевание вызывается В.melitensis, которые обусловливают наиболее тяжелые формы заболевания. Реже человек заражается В.abortus от крупного рогатого скота, однако клинически выраженные инфекции при этом регистрируются редко. Наиболее опасными в смысле заражения являются периоды отелов скота, так как в околоплодной жидкости содержится большое количество возбудителей. Больной человек не опасен для окружающих. Механизмы заражения - разнообразны; наиболее частый –фекальноно-оральный. Большую опасность представляют сырое молоко и молочные продукты, не подвергающиеся в процессе приготовления тепловой обработке (брынза, сыр). Мясо представляет меньшую опасность – только в случаях его недостаточной тепловой обработки. Контактно-бытовой путь заражения возможен при попадании возбудителя на поврежденные кожные или слизистые покровы при уходе за больными животными; при оказании им родовспомогательной помощи или при разделке туш больных животных. Воздушно-капельный путь заражения описан при вдыхании воздушно-пылевой смеси, содержащей инфицированные частицы шерсти, навоза, земли во время уборки помещения. Известны также случаи лабораторного заражения медицинских работников. Для бруцеллеза свойственен выраженный профессиональный характер заболевания . Патогене и клинические особенности. Бруцеллы проникают в организм человека через слизистые оболочки или кожные покровы, не оставляя никаких изменений в области входных ворот. Лимфогенным путем возбудители заносятся в региональные лимфоузы и накапливаются в них. Они подвергаются фагоцитозу, но способны выживать внутри фагоцитов за счет выделения низкомолекулярных факторов, угнетающих слияние фагосом с лизосомами. Внутри фагоцитов бруцеллы могут формировать L-формы и длительно персистировать в организме. Обратный переход в исходные формы обусловливает рецидив болезни. Из разрушенных макрофагов возбудители попадают в кровоток и диссиминируют в печень, селезенку, почки, костный мозг, эндокард. В пораженных органах образуются очаги некроза, окруженные инфильтратами. Возбудители могут попасть в молочные железы человека и появляться в грудном молоке. Из-за метастатических очагов размножения бруцелл в органах в клинической картине заболевания появляются признаки очаговых поражений со стороны опорно-двигательного аппарата, нервной и других систем. С выходом возбудителей в кровеносное русло связаны явления бактеремии и эндотоксинемии. При хроническом процессе формируются аутоиммунные механизмы Клинические особенности. Инкубационный период – 1-4 недели (он может длиться до 2-3 месяцев). Болезнь начинается с озноба, подъема температуры, нарастающей интоксикации, слабости, могут развиваться явления орхита, эпидидимита, артрита. Поражения нервной системы проявляются в виде плекситов и радикулитов. У женщин может развиться оофорит, эндометрит, нарушения менструального цикла. При острой форме заболевания на 4-6 день формируется состояние замедленной гиперчувствительности., что выявляется кожной пробой Бюрне. Иммунитет Постинфекционный иммунитет формируется нестойкий, гуморальный и клеточный, нестерильный. При этом образуются неполные антитела. Возможны повторные заболевания. Профилактика Неспецифическаяие мероприятия заключаются в соблюдении правил личной гигиены и режима обработки сельскохозяйственной продукции; в осуществлении профилактики заболеваемости среди животных. Специфическая профилактика. В эндемичных очагах инфекции проводят вакцинацию живой вакциной, получаемой из аттенуированного штамма В. аbortus. Вакцинация – накожная, однократная. При отрицательной кожной пробе и отсутствии выработки антител проводится ревакцинация. Лечение Терапия основана на применении антибиотиков широкого спектра действия. Препараты выбора: тетрациклины, аминогликозиды (стрептомицин); в тяжелых случаях – рифампицин Для лечения хронических форм заболевания применяется убитая бруцеллезная вакцина. Микробиологическая диагностика. При бактериологическом методе исследуемым материалом является: кровь, пунктат костнго мозга, моча. Посев производится в 2 флакона, в одном из них создается повышенная концентрация углекислого газа. При появлении видимого роста делают пересев на плотную питательную среду для выделения чистой культуры и последующей идентификации бактерий в РА с видовыми сыворотками. С целью идентификации выделенных возбудителей используется комплекс признаков, отличающих виды друг от друга: потребность в углекислом газе при культивировании; способность расти на питательных средах с красителями (основной фуксин, тионин); образование сероводорода; способность синтезировать уреазу; чувствительность кбактериофагам Серодиагностика осуществляется в РА Хеддельсона и Райта, Кумбса, РТГА. 3.4. FRANCISЕLLA TULARENSIS – ВОЗБУДИТЕЛЬ ТУЛЯРЕМИИ Туляремия- острое природно-очаговое заболевание, характеризующееся поражением лимфоузлов, легких, кожных покровов, кишечника. История открытия возбудителя. В 1910 году Д.Мак-Кой описал забол, обнаруженное у сусликов и напоминающее по своей клинической картине бубонную форму чумы. Вскоре он же и Ч.Чапин во время эпизоотии среди земляных белок выделили от больных животных возбудителя. Таксономия Род Francisella, вид Francisella tularensi. Морфология Мелкие палочки размерами 0,2 х 0,7 мкм., неподвижные, обладают полиморфизмом, грам(-), спор не образуют, некоторые имеют капсулу. В мазках из культур преобладают кокковые формы. Окрашиваются слабо, интенсивнее окрашиваются по полюсам. Культуральные свойства. Факультативные анаэробы, требовательны к питат средам. На обыч средах не растут. Культивир на средах с добавл яичного желтка (среда Мак-Коя). На них вырастают крупные нежные молочно-белые колонии. Фрэнсис предложил добавл в питат среду цистин, глюкозу, эритроциты. Хороший рост появл также на средах с мозговой или печеночной тк. В первых генерациях микробы роста не дают. Рост на питат ср -замедленный, макс размеров колонии достигают на 3-5 дни культивирования. В жидких питательных средах – рост поверхностный в виде пленки. Оптим усл культивирования – рН 6,8 – 7; t – 370С. Биохимические свойства Они слабо выражены. Бактерии фермен-т глюкозу, мальтозу и некот др сахара до к-ты. Некот штаммы ферментируют глицерин, и это используется для их дифференциации. Образуют аммиак, сероводород, индола не образуют. Биохим актив нестандартна. С учетом ферментат активн (по отношению к глицерину) и распрост-ти в природе выделяют 3 географические расы возб: а) голарктическая – не фермент глицерин, умеренно патогенна для домашних крыс и человека, распространенна в Европе и Азии; б) среднеазиатская – ферментирует глицерин, умеренно патогенна для человека, встречается на территории нашей страны; в) неарктическая – ферментирует глицерин, высоко патогенна для человека, распространена в Северной Америк. Антигенная структура. Бактерии имеют: О-антиген, связан с клет стенкой; Vi – антиген, кот обладают только бактерии в S-форме; с этим антигеном связана вирулент-ть и иммуногенность возб. Возб туляремии в S-форме (вирулен) им 2 антиг: О-, имеющий сходство с антиг бруцелл, и Vi- капс. Имеют также общ антигены с бруцеллами и иерсиниями. Факторы патогенности . О-антиген (эндотоксин), Vi-антиген, а также ферменты патогенности (гиалуронидаза, нейраминидаза), пили-1, белки наружной мембраны (адгезины), капсула. Резистентность. Возбудитель хорошо сохраняется во внешней среде без снижения вирулентных свойств, особенно при низких температурах. Так в воде при +40 С он сохраняет жизнеспособность до 1 месяца; на зерне – до 6 месяцев; при 20-300С – 20 дней; в шкурах животных, погибших от туляремии, - до 1 месяца. Отмечается хорошая чувствительность возбудителя к высоким температурам и к дезинфицирующим веществам. При 600С гибель микробов наступает через 20 минут; при кипячении – за 1-2 минуты. 5% раствор формалина убивает возбудителя за 2-5 минут, 70% этиловый спирт - за несколько минут. Эпидемиология. Туляремия - природно-очаговая зоонозная инфекция. Резервуар и источни инфекции – многочисленные виды диких грызунов, зайцевидные, птицы, собаки, парнокопытные и другие животные (всего- 82 вида). Основная роль в поддержании инфекции в природе принадлежит грызунам (полевкам, крысам, ондатрам и другие). Механизм заражения чаще всего – трансмиссивный: передается животным и птицам кровососущими насекомыми. Специфические переносчики – иксодовые клещи. Человек заражается от больных животных: при прямом контакте, например, при снятии шкур, сборе павших грызунов; алиментарным путем – через инфицированнуюводу или продукты; респираторным путем – при вдыхании содержащей возбудителей пыли от зерна. соломы, овощей. Патогенез и клинические особенности. Естеств восприимч людей – достаточно высока (практич 100%). Возб проникают в организм чел через кожу (поврежд и даже неповрежд), слиз обол глаз или ЖКТ. Они прикр-ся к эпител кл за счет белков наруж мемб и капсулы. В области входных ворот часто развивается первич аффект в виде последоват сменяющих др др пятна, папулы, везикулы, пустулы и язвочки. Фагоциты активно поглощают возбуд, но не переваривают, что создает условия для существ их в лимфоузлах, где они активно размнож. Часть бактерий погибает, что обусловливает интоксикацию. Из лимфоузлов возбуд попадает в кровь (бактериемия), затем наступает стадия очаговых пораж с образов гранулем и постепенно развивается сенсибилизация организма. Могут появляться очаги поражения в селезенке, печени, легких, костном мозге. Возможно возникн вторичные инфекции (пневмонии, менингита) Клинические особен: инкуб период – от 2 до 8 дней. Началозабол – острое: повышается т, появляются озноб, головные боли, боли в мышцах, гиперемия лица. Дальнейшее течение инфекции зависит от входных ворот, в соответ с чем различ формы забол: бубонную, легочную, желуд-кишеч. Возможно разв генерализованной формы. Иммунитет Формирующийся постинфекционный иммунитет - гумор и клет, стойкий, пожизнен. Развивается гиперчувствительность замедленного типа. Профилактика . Неспец прооф заключ в проведении меропр по обеззаражив источ инфек; нейтрализ путей ее перед; по устранению условий зараж людей, включая санпросветработу, защиту от кровосос насеком, дезинфек в очаге пораж. Специф проф – применение живой аттенуированной туляремийной вакцины по эпидпоказаниям. Вакцина примен накожно Лечение - комплексное с применением антибиотиков Микробиологическая диагностика. Мат для иссл: пунктат из бубонов, отделяемое конъюнктивы, мокрота, слизь из зева, кровь, испражнения, ткани погибших грызунов. Бактериол иссл пров только в лабораториях, оборудованных для работы с ООИ. выделить возбудителя из патологического материала невозможно, поэтому проводится биологическая проба на животных (морских свинках), кот заражают исследуемым матер. Затем делают посев крови и тк живот для выдел чистой культуры и ее идентиф. Для окончательной идентиф заражают чистой культурой белых мышей. Для экспресс-диагн возбудитель идентифиц в РИФ. Серодиагностика провод в РА с туляремийным диагностикумом. Положит считается результат при получ титров 1:100 и более. Для ранней диагностики применяется кожная проба с тулярином. (Проба остается положительной у лиц, переболевших туляремией). возбудители антропозоонозных инфекций 1. Передаваемые от домашних животных и др. синантропных животных: - бактериальные инфекции - сальмонеллез, бруцеллез, туберкулез, столбняк, сибирская язва, лептоспирозы - вирусные – ящур - грибковые – аспергиллез, трихофития, микроспория - протозойные – балантидиаз, токсоплазмоз 2. Передаваемые от диких животных – природно-очаговые: - бактериальные – листериоз, чума, туляремия, бруцеллёз, лептоспироз, спирохетозы, риккетсиозы - вирусные – геморрагические лихорадки, вирусные энцефалиты. - протозойные – лейшманиоз. Общие свойства Морфология. Гр «-» мелкие палочки. Обладают поверхностными структурами, определяющими патогенность и вирулентность. Чаще не подвижны, не имеют спор, но обладают микрокапсулой Культуральные свойства: растут на сложных питательных средах, чаще S-формы колоний, за исключением возбудителя чумы Отношение к температуре: хорошо переносят низкие температуры, погибают при высоких Являются внутриклеточными паразитами – размножаются внутри клеток лимфоидномакрофагальной системы, вызывают бактериемию и септицемию. Факторы патогенности а) эндотоксин б) поверхностные структуры, обес-печивающие инвазивность и агрес-сивность в) внутриклеточный паразитизм г) ГЗТ при бруцеллезе и туляремии Имеют разнообразные ворота инфекции и пути передачи: 1- алиментарный 2- воздушно-пылевой 3- контактный 4- трансмиссивный. Заражение через поврежденную кожу и неповрежденные слизистые оболочки. От человека к человеку А не передаются (искл. чума). Общий патогенез: 1 этап – размножение м/о в месте ворот ин-фекции и регионарных л/у 2 этап – лимфогенный занос м/о в органы и л/у 3 этап – размножение м/о в органах и отда-ленных лимфоузлах 4 этап – прорыв м/о в кровь – гематогенная диссеминация с образованием мета-статических очагов в различных органах 5 этап – сепсис с повторной генерализацией инфекции 6 этап – очищение организма от м/о или пов-торность инфицирования и гибель организма Профилактика: I. Неспецифическая: сан.-вет. надзор за домашними животны-ми, защита людей от заражения наблюдение за числом грызунов, их истребление – дератизация защита людей от нападения крово-сосущих насекомых и клещей (спец одежда, применение репеллентов). II. Специфическая: иммунизация живыми вакцинами по эпидпоказаниям декретированных групп населения. Методы лабораторной диагностики: бактериоскопический – РИФ бактериологический – «золотой стандарт» серологический биологический аллергический – внутрикожная проба с соответствующим бактериальным аллергеном молекулярно-генетический – ПЦР. Лечение – этиотропное: применение антибактериальных препаратов Палочки спорообразующие грамположительные сибиреязвенные бациллы - Семейство Bacillaceae род Bacillus Bacillus anthracis Морфология Сибиреязвенные бациллы— очень крупная (5н-10х1-н2 мкм) толстая палочка с закругленными, а при образовании цепочек – с обрезанными под прямым углом концами. Неподвижные, легко окрашиваются анилиновыми красителями или по Граму – Гр «+». В исследуемом материале располагаются парами или в виде коротких цепочек, окруженных общей капсулой. В мазке из чистой культуры располагаются в виде длинных цепочек (стрептобациллы), слегка утолщенных на концах и образующих сочленения («бамбуковая трость»). Обработка микробов пенициллином при-водит к разрушению клеточной стенки и образованию цепочек, состоящих из протопластов и сферопластов – называемых «жемчужным ожерельем». Важным признаком является образование капсулы для защиты от фагоцитов и антител. Капсулы образуются только у бактерий, выделенных из организма либо выращенных на питательной среде, содержащей нативную сыворотку. Капсулы более устойчивы к действию гнилостной микрофлоры, чем бактериальные клетки, и в материале из гнилых трупов нередко можно обнаружить лишь пустые капсулы («тени» микробов). Для обнаружения капсул используют: -метод Леффлера -метод Бурри-Гинса -метод Ребигера. Споры. Микробы способны к образованию спор, они располагаются центрально, при t0 от 120 С до 420 С при дефиците О2, аминокислот или азотистых оснований, т.е. во внешней среде. Споры обладают высокой термостойкостью, устойчивостью во внешней среде за счет повышенного содержания дипиколиновой кислоты: в воде сохраняются до 10 лет, в почве – до 30 лет. Прорастание спор происходит при t0 =370 С, молодые споры прорастают за 1-1,5 часа, старые – за 2-10 часов. Культуральные свойства Микробы являются аэробами или факуль-тативными анаэробами. Хорошо растут на простых питательных средах, при t0 =35-360 С. На жидких средах растет в виде «ватных хлопьев», взвешенных комков, не вызывают помутнения среды. При посеве уколом в столбик желатина дает характерный рост в виде «перевернутой елочки», а позднее за счет разжижения желатина – в виде «воронки» На твердых средах образует R-колонии – крупные шероховатые матовые серовато-белые колонии волокнистой структуры в виде «головы Медузы» или «львиной гривы» (за счет переплетающихся цепочек бактерий). Биохимические свойства Обладает сахаролитической активностью - разлагает до кислоты глюкозу, сахарозу, фрук-тозу, мальтозу и декстрин - гидролизует крахмал - образуют ацетилметилкарбинол. - образует лецитиназу Протеолитическая активность: - разжижает желатину на 2-5 сут. - свертывает молоко за 3-5 сут., затем пепто-низирует сгусток и разжижается, при расщеп-лении белков образуется Н2S и аммиак, накапливается бурый пигмент. Антигенная структура Капсульные АГ представлены полипептидами, соединенными с молекулами D-глутаминовой кислоты. По капсульным АГ выделяют единственный серовар, антитела к капсульным АГ не обладают протективным действием. Соматический АГ представлен полисахаридами клеточной стенки (состоит из Д-галактозы и N-ацетилглюкозамина), антитела к нему не обладают протективным действием, длительно сохраняется во внешней среде. Сибиреязвенный экзотоксин имеет сложную структуру и включает в себя протективный АГ, липопротеин термолабильный - относится к токсинам класса С). Факторы патогенности I. Факторы адгезивности. 1- капсульный полипептид, обуславливающий адгезию на чувствительных клетках – энтероцитах кишечника или эпителиоцитах дыхательного тракта и обладающий выраженной антифагоцитарной активностью. 2- протективный АГ- он обеспечивает взаимодействие с мембранами клеток организма человека и животных. II. Факторы инвазивности поверхностные структуры + лецитиназа + протеазы = проникновение вглубь кожи и слизистых. III. Факторы агрессивности. капсула – защищает микробные клетки от поглощения и разрушения фагоцитами – нейтрофилами и макрофагами. D-глутаминовые кислоты – внутриклеточный паразитизм. IV. Токсинообразование. Экзотоксин, имеет сложную структуру, его образование кодируется плазмидой, комплексом из 3 генов. Токсин состоит из 3 компонентов: протективного антигена – на который в организме вырабатываются защитные АТ. летального фактора – обладает цитотоксическим действием и вызывает отек легких, является ферментом металлопротеазой, нарушает синтез белка, как следствие гибель клетки. отечного фактора - проявляет эффект аденилатциклазы, повышает концентрацию цАМФ в клетках макроорганизма, в результате повышается проницаемость клеток и сосудов, развивается отек (особенно отек легких). Механизмы и пути заражения контактный – при уходе за больными животными, при разделки мяса, переработки шкур, шерсти – попадают в организм вегетативные формы или споры. аэрогенный - при вдыхании спор микробов - при уходе за животными, переработке шкур - при пересыпки порошков и т.д. алиментарный – при употреблении мяса больных животных (вегетативные формы) редко трансмиссивным путем – через кровосо-сущих насекомых – слепней, мух-жигалок. Клинические формы Выделяют: кожную форму легочную форму (развивается при ингаляции спор микроорганизмов) желудочно-кишечную септическую форму Диагностика Бактериоскопический метод. Первоначально из материала готовят мазки и окрашивают их по Граму и для обнаружения капсул (по Бурри-Гинсу или методу Риберга) и спор (по Ауэске или Ожешко). Из исследуемого материала готовят 4 мазка. Фиксированные мазки окрашивают: 1- по методу Грамма – грамположительные палочки. 2- по Романовскому – Гимзе или по Ожешко. 3- по методу Бурри-Гинса или по Ребигеру (раствор Ребигера – 15-20 г генцианвиалета растворяют в 100 мл 40% формалина, раствор одновременно фиксирует и окрашивает препарат в течение 15-20 сек.) – бациллы окрашиваются в фиолетовый цвет, а капсулы в красно-фиолетовый цвет. 4- сибиреязвенной люминисцирующей сывороткой (РИФ), при этом сибиреязвенные бациллы выглядят как палочки с ободком, светящиеся зеленоватым светом. Бактериологический метод. Для выделения чистой культуры исследуемый материал засевают на МПА и МПБ. Выделенную чистую культуру идентифицируют по общепринятой схеме с учетом морфологии, характера роста на МПА и МПБ, разжижения желатина в виде перевернутой елочки, отсутствия подвижности, положительного теста «жемчужного ожерелья» и лизиса сибириязвенным бактериофагом «ВА-9» и «Саратов». Дополнительно определяют лецитиназную, фофазную и гемолитическую активность. Серологический метод (РСК, РНГА, ИФА): 1 – выявление АТ в сыворотке больного 2 – р. Асколи – для обнаружения м/о в исследуемом материале по полисахаридному АГ (реакция термопреципетации) Биологическая проба. В биопробе патологический материал или испытуемую культуру вводят подкожно: морским свинкам в паховой области, мышам – в корень хвоста. Обычно мыши погибают через 1-2 суток, морские свинки – через 2-4 суток. Наблюдение за животными продолжают в течение 10 дней. У павших животных исследуют печень, селезенку, лимфатические узлы, почки, кровь из полостей сердца, места введения исследуемого материала. О наличии возбудителя сибирской язвы свидетельствуют типичная патолого-анатомическая картина у подкожных животных: отек в месте введения исследуемого материала, темная не свернувшаяся кровь, кровоизлияния в клетчатке, рыхлая селезенка и плотная красная печень. В мазках-отпечатках из органов и крови – наличие грамположительных капсулированных палочек. В/к аллергическая проба с антраксином. Для ретроспективной диагностики при эпидемиологических исследованиях ставят кожные аллергические пробы с антраксином. Антраксин (белково-полисахаридно-нуклеиновый комплекс) вводят внутрикожно объемом 0,1 мл, результаты учитывают через 24-48 ч. Пробу считают положительной при наличии гиперемии диаметром более 16 мм и инфильтрата. ПЦР-диагностика. Лечение 1. Антибактериальное лечение. - при кожной форме – пенициллин до 24 млн ед/сут - при септических формах – цефалоспорин до 4-6 г/сут, гентамицин – до 0,32 г/сут, левомицитин – до 4 г/сут. 2. Противосибириязвенный иммуноглобулин - при легкой форме – 20 мл, - при тяжелой – по 40-80 мл. Курсовая доза – до 400 мл. 3. Симптоматическое лечение. Профилактика. Проводится в направлении всех трех звеньев эпидемического процесса: - мероприятия 1 группы направлены на источник инфекции, - мероприятия 2 группы – на разрыв механизма и путей передачи, - мероприятия 3 группы – на восприимчивый коллектив. Для специфической профилактики применяется живая сибириязвенная вакцина СТИ (Санитарно-технический институт). Вакцина получена Н.Н. Гинсбургом с соавт. в 1942 г. Иммунизацию проводят по эпидемическим показаниям группам риска. Для экстренной профилактики назначают сибириязвенный иммуноглобулин. Неспецифическая профилактика такая же, как и при всех зоонозах, и сводится в основном к санитарно-ветеринарным мероприятиям: 1 – изоляция больных и подозрительных животных; 2 – сжигание трупов погибших животных и зараженных объектов (подстилка, навоз); 3 – обеззараживание мест содержания больных животных; 4 – очистка водопоев; 5 – осушение заболоченных участков (перепахивание, хлорирова-ние); 6 – организация скотомогильников – при невозможности сжигания трупов их хоронят на отдельных сухих и пустынных участках; глубина ямы должна быть не меньше 2 м, труп кладут на толстый слой хлорной извести и засыпают ею сверху слоем до 10 см. все мероприятия по захоронению следует проводить с соблюдением санитарных норм. 7 – санитарный надзор за предприятиями, занятыми переработкой животного сырья. Все поступающее сырье проверяют в реакции термопреципитации по Асколи, меховые изделия изготовляют только из сырья, давшего отрицательный результат в этой реакции. |