Диагностика коклюша и паракоклюша. Основные положения МР 3.1.2.0072-13 – как средство унифицированного подхода к лабораторной диагностике коклюшной инфекции
Дана детальная характеристика биологических свойств B. pertussis, B. parapertussis и B. bronchiseptica, описание бактериологического метода исследования с использованием приемов, повышающих его информативность, современных методов лабораторной диагностики: ПЦР и ИФА. Представлены алгоритмы диагностики коклюша в зависимости от вакцинального статуса, возраста и сроков заболевания пациентов. Цель настоящих методических рекомендаций - унифицировать подходы к лабораторной диагностике коклюшной инфекции.
Характеристика рода Bordetella
- Род Bordetella относится к семейству Alcaligenaceae и включает 9 видов: B. ansorpii, B. avium, B. bronchiseptica, B. hinzii, B. holmesii, B. parapertussis, B. pertussis, B. petrii, B. trematum.
- Бактерии рода Bordetella - мелкие (0,2- 0,5 мкм x 0,5-2,0 мкм) грамотрицательные коккобациллы. В мазках - часто биполярно окрашенные, одиночные или в парах, реже в цепочках, имеют нежную капсулу.
Схема лабораторной диагностики коклюша/паракоклюша
Бактериологическое обследование
- следует проводить на ранних сроках заболевания (не позднее третьей недели), до начала терапии антибактериальными препаратами. В более поздние сроки и на фоне антибиотикотерапии высеваемость резко снижается.
ПЦР
- нередко оказывается эффективнее бактериологического метода в более поздние сроки заболевания и на фоне лечения антибиотиками, однако максимальная эффективность метода приходится на ранние сроки (1 - 3 недели от начала заболевания), прием антибиотиков может привести к ложноотрицательному результату анализа.
Серологическое обследование
- при первичной инфекции антитела классов IgM и IgA образуются не раньше второй недели от появления клинических симптомов, спустя еще 1 неделю начинают обнаруживаться и антитела класса IgG, достигая своего максимума к 6 - 8 неделе, после чего их уровень снижается.
Серологическое обследование
- После вакцинации образуются антитела класса IgG. IgG-антитела могут выявляться до достижения взрослого возраста в низкой концентрации. В связи с этим серологическую диагностику коклюша и паракоклюша целесообразно применять не ранее третьей недели болезни; оптимальные сроки для серологической диагностики - с 3 по 6 неделю заболевания.
Серологическое обследование
- В течение 1 года после вакцинации против коклюша проводить серологическое исследование в диагностических целях не рекомендуется.
- У детей в возрасте до 3 месяцев собственные антитела не вырабатываются, но могут присутствовать материнские антитела (в низких титрах).
- Внимание! Мазки со слизистой носо- и ротоглотки забирают 2-мя зондами. Оба зонда помещают в пробирку с транспортной средой. За 2 часа до взятия мазков из ротоглотки нельзя пить и принимать пищу, за 6 часов до процедуры нельзя принимать препараты для рассасывания во рту и орошать носоглотку или ротоглотку медикаментами.
- Взятие мазков со слизистой носа
- Перед забором материала полость носа очищают от слизи.
- Материал забирают сухим стерильным зондом.
- Зонд вводят, прижимая ко дну полости носа на 3 - 4 см, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа.
- Взятие мазков из ротоглотки
- Мазки из ротоглотки берут сухим стерильным зондом вращательным движением с миндалин, небных дужек, задней стенки ротоглотки.
- Затем зонды с забранным материалом из носо- и ротоглотки помещают в пробирку с транспортной средой. Концы зондов отламывают так, чтобы можно было плотно закрыть пробирку с крышкой.
- Герметично закрытую пробирку маркируют, хранят в холодильнике при +2 ÷ +8 ºС и доставляют в бактериологическую лабораторию в течение суток в термосумке с хладагентами
Забор крови на коклюш для исследования методом ИФА
- Взятие крови (для ИФА обязательно натощак) проводят из вены в объеме 3 - 4 мл или из подушечки третьей фаланги среднего пальца в объеме 0,5 - 1,0 мл (у детей младшего возраста) в одноразовую пластиковую пробирку без антикоагулянта.
 |
Скачать 122.5 Kb.