Анатомия экзамен. Этапы приготовления гистологического препарата
Скачать 299 Kb.
|
Этапы приготовления гистологического препарата. На занятии студент рассматривает микропрепарат под микроскопом с увеличением объектива в 40 раз и окуляра в 15 раз. Во сколько раз видимое изображение структур больше истинного? Ответ: в 600 раз (40х15) При проведении хирургической операции возникла необходимость в гистологическом анализе оперируемого органа. Какие методы гистологического исследования следует при этом использовать? Ответ: На лабораторном занятии по гистологии студент изучил микропрепарат при малом увеличении микроскопа, а затем хотел рассмотреть интересующую его структуру при большом увеличении, но, несмотря на попытки сфокусировать изображение, четкости он не добился, а стекло препарата разбилось. Какие ошибки были допущены при изучении микропрепарата? Ответ: при смене объективов необходимо слегка поднять тубусодержатель, произвести замену объективов, установить объектив большего увеличения на расстоянии не более 1 мм от покровного стекла, затем, вращая винт макроподачи на себя, найти изображение и скорректировать его винтом микроподачи. При изучении микропрепарата в световом микроскопе интересуемая структура находится у края поля зрения, справа. В какую сторону следует переместить микропрепарат на предметном столике микроскопа, чтобы она оказалась в центре поля зрения? Ответ: влево У исследователя возникла необходимость изучить жировые включения в клетках. Какие фиксатор и краситель нужно использовать для этого исследования? Ответ: парафин и судан 3. Исследователю предстоит изучить структуры клетки размером меньше 0,2 мкм. какие методы исследования нужно ему рекомендовать? Ответ: ультрафиолетовую микроскопию (для рассмотрения доступны объекты размером 0,1 мкм), флюоресцентную (люминисцентную) микроскопию (для рассмотрения доступны объекты размером от 0,13 мкм(при использовании ближних УФ лучей) до 0,25 мкм( при использовании сине-фиолетовых лучей)). Клетка и неклеточные структуры. На свободной поверхности клеток расположены структуры, в которых под электронным микроскопом видны 9 пар периферических и 2 пары центральных микротрубочек. Как называются эти структуры и какова их роль? Ответ: это реснички, они способствуют передвижению окружающей жидкости в определенном направлении (аксонема придает ресничкам способность к волнообразным движениям). Под электронным микроскопом видны множественные мелкие впячивания плазмолеммы клетки и светлые пузырьки. О каком процессе свидетельствуют эти наблюдения? Ответ: это процесс эндоцитоза – перенос веществ в клетку (способ мультимолекулярного переноса). При исследовании различных клеток под электронным микроскопом было обнаружено, что одни клетки на поверхности имеют единичные микроворсинки, другие — щеточную каемку. Какое можно сделать заключение о функции этих клеток? Ответ: вторые клетки настроены на всасывание веществ из окружающей среды. Клетки, выстилающие кишечник, имеют щеточную каемку. При некоторых болезнях (спру) она разрушается. Какая функция клеток при этом страдает? Почему? Ответ: страдает всасывательная функция, так как значительно уменьшается всасывающая поверхность кишечника, в норме достаточно обширная за счет ворсинок и микроворсинок. При заживлении рана заполняется клетками, а затем и волокнами. Каким образом увеличивается количество клеток и волокон? Ответ: количество клеток увеличивается за счет деления способных к этому процессу окружающих клеток (либо камбиальных), а межклеточное вещество синтезируется либо также октужающими,либо новообразованными клетками. Цитоплазма. В области заживления раны исследователь обнаружил волокна из белка коллагена и большое количество клеток с лизосомами и фагосомами. Можно ли на основании этого наблюдения сделать вывод, что эти клетки участвуют в образовании коллагеновых волокон? Ответ: нет,нельзя. эти клетки участвуют в удалении пораженных частиц ткани. В результате действия токсичных веществ в клетках почечных канальцев отмечено снижение активности окислительно-восстановительных ферментов и процессов активного транспорта ионов. С нарушением каких внутриклеточных структур это связано? Ответ: с нарушением ОВ ферментов митохондрий ??? В результате действия ионизирующей радиации в некоторых клетках происходит разрушение отдельных органелл. Каким образом будут утилизироваться клеткой их остатки? Ответ: при помощи лизосом (преобразующихся в процессе в аутофагосомы), обладающих набором гидролитических ферментов и кислой средой (из-за наличия Na,H – насосов). В лимфатическом узле, где образуются антитела, выявлены клетки с большим числом свободных рибосом, клетки с многочисленными лизосомами, клетки с сильно развитой гранулярной эндоплазматической сетью. Число каких клеток резко увеличится в узле в случае повышения в крови иммунных белков — антител? Ответ: увеличится число клеток с сильно развитой гранулярной ЭПС, так как на рибосомах грЭПС происходит синтез,а в полости самой грЭПС фолдинг, белков «на экспорт». Перед исследователем поставлена задача изучить митохондрии и лизосомы клеток. Какими методами можно это сделать? По каким признакам можно различить эти органеллы? Ответ: 1)с помощью электронной микроскопии, 2)митохондрии можно выявить при окраске по методу Альтмана (ярко-красные бусинки на желтом препарате),так же реакция на сукцинатдегидрогеназу (СДГ) по методу Нахласа (продукты реакции на СДГ окрашены в темно-синий цвет), лизосомы можно выявить при введении в кровь краски(туши) и накопление этой краски в макрофагах печени (клетки Купфера,звездчатые макрофаги) при окраске гематоксилином и эозином – в цитоплазме мелкие гранулы туши в лизосомах. В клетке хорошо выражен пластинчатый комплекс. Гранулярная эндоплазматическая сеть обильна, имеются митохондрии, клеточный центр. Другая клетка содержит много митохондрий, большое количество лизосом и немного мембран гранулярной и агранулярной эндоплазматической сети. Каковы функции этих клеток? Происходит ли в них синтез белка? Ответ: Синтез белка происходит в первой клетке, клетка находится в активном состоянии, хорошо развитая сеть грЭПС о синтезе белков «на экспорт», наличие клеточного центра и митохондрий предполагает возможность деления этой клетки; во второй клетке активно расходуется энергия что обозначает большое количество митохондрий, происходят процессы лизиса засчет лизосом, малое количество мембран грЭПС и гЭПС свидетельствует о том,что синтеза белка не происходит. Ядро клетки. Деление клетки. Перед исследователем поставлена задача — выявить структуры, содержащие ДНК и РНК. Какие методы он должен использовать? На основании каких признаков можно судить о содержании в структурах ДНК и РНК? Ответ: ДНК клетки обычно содержится в ядре, при окраске по методу Фёльгена ДНК окрашивается в малиновый цвет; РНК содержится как в кариоплазме (в ядрышках содержатся пре-М(Р,Т) РНК(фибриллярный компонент), субъединицы рибосом(гранулярный компонент) , ядрышковые организаторы (совокупность копий генов рибосомных РНК)(аморфный компонент), так и в цитоплазме. Выявить РНК можно при окраске метиловым зеленым и пиронином, тогда ядрышки и цитоплазма, содержащие РНК, окрашиваются пиронином в розовый цвет, ядро – в зеленый. По ходу гистологического исследования возникла необходимость идентифицировать в ядрах клеток хроматин и ядрышки. Какие методы могут быть использованы? Ответ: При электронной микроскопии конденсированный хроматин соответствует более плотным участкам, чаще локализован у ядерной оболочки, а гранулярный компонент ядрышка (Субъединицы рибосом) представлен мелкими электронно-плотными зернами. + ДНК(хроматин) клетки обычно содержится в ядре, при окраске по методу Фёльгена ДНК окрашивается в малиновый цвет; РНК содержится как в кариоплазме (в ядрышках содержатся пре-М(Р,Т) РНК(фибриллярный компонент), субъединицы рибосом(гранулярный компонент) , ядрышковые организаторы (совокупность копий генов рибосомных РНК)(аморфный компонент), так и в цитоплазме. Выявить РНК можно при окраске метиловым зеленым и пиронином, тогда ядрышки и цитоплазма, содержащие РНК, окрашиваются пиронином в розовый цвет, ядро – в зеленый. В препарате видны нервные клетки с крупными светлыми ядрами и ядрышками. Оценить активность синтеза белка в этих клетках. Ответ: Клетки активно синтезируют белок,так как хроматин в ядре представлен в основном эухроматином, наличие ядрышек свиделельствует об активном синтезе пре-М(Р,Т)РНК, которые впоследствие преобразуются в М(Р,Т)РНК соответственно. Цитофотометрические исследования выявили в печени одно- и двухъядерные тетраплоидные клетки. На какой фазе течение митоза было незавершено в том и другом случае? Ответ: в первом случае течение митоза было не завершено на стадии профазы(метафазы),т.е. от момента редуплекации до момента расхождения хроматид к полюсам и цитотомии, в другом случае на стадии телофазы, т.е. после образования 2х дочерних ядерных оболочек и до момента цитотомии (цитокинеза). Судебная экспертиза мазка крови определила, что кровь принадлежала женщине. По каким признакам было сделано заключение? Ответ: в нейтрофильных лейкоцитах на одном из сегментов ядра выявляется так называемый половой хроматин (тельце Барра, конститутивный гетерохроматин, конденсированная 2ая Х хромосома), который встречается только у женщин, представленный в виде «барабанной палочки». Другой часто используемый в тех же целях объект – эпителиальные клетки слизистой оболочки полости рта. После обработки клеток в культуре ткани колхицином исследователи перестали находить делящиеся клетки. Чем это можно объяснить, если известно, что колхицин разрушает тубулиновые филаменты? Ответ: Колхицин разрушает тубулиновые филаменты (микротрубочки), которые образуют веретено деления, способствующее расхождению хроматид к полюсам, поэтому деления не происходит. Эпителиальные ткани. Железы. С помощью радиоактивной метки маркированы клетки эктодермы, энтодермы, а также вентральной мезодермы и нефротома. В эпителии каких органов будет в последующем обнаруживаться метка? Ответ: клетки эктодермы – в эпителии кожи и кожных производных, выстилке ротовой полости и его производных,эпителии анального отдела прямой кишки, во вторичной выстилке влагадища, эпителии роговицы глаза+из нервной трубки – внейроциты и нейроглию головного и спинного мозге,сетчатки глаза и органа обоняния. клетки энтодермы – в эпителии желудка,тонкой и почти всей толстой кищки,в паренхиме печени и поджелудочной железы клетки вентральной мезодермы – в поперечнополосатой мышечной ткани сердца,корковом веществе,мезотелии клетки нефротома - в эпителий гонад и семявыносящих путей,эпителий почек. Одной из функций кишечника, выстланного эпителием, является всасывание. Какой вид эпителия адекватен этой функции? Ответ: Однослойный призматический(цилиндрический) каемчатый эпителий. Кожа на ладонной поверхности кисти и волосистой части головы покрыта многослойным ороговевающим эпителием. Каких различий в строении этого эпителия следует ожидать и почему? Найти их в препаратах. Ответ: наличие блестящего слоя в эпидермисе кожи далоней и ступней,меньшее количество слоев в каждом аналогичном слое эпидермиса в тонкой и толстой коже. В культуре ткани высеяны клетки: в первом флаконе — базального, во втором флаконе — блестящего слоя многослойного ороговевающего эпителия. В каком флаконе будет наблюдаться пролиферация клеток? Ответ: пролиферация клеток будет наблюдаться только во флаконе с клетками базального слоя эпидермиса,так как в этом слое находятся стволовые клетки,которые дают начало всем последующим формам клеток этого дифферона,в блестящем же слое расположены уже дифференцировавшие клетки,имеющие толстую оболочку из белка кератолинина и без ядра. В переходном эпителии мочевого пузыря в зависимости от функционального состояния органа может меняться толщина слоев. Определить на препарате, растянут или сокращен орган. Ответ: в растянутом состоянии органа, клетки поверхностного слоя переходного эпителия, выстилающего орган, будут растянуты; в нерастянутом состоянии органа, поверхностные клетки имеют куполообразную форму. Для обеспечения этой функции в апикальной части клеток поверхностного слоя имеется резерв мемебран в виде многочисленных инвагинаций плазмолеммы и в виде стенки специальных мемебранных пузырьков. Препарат железы обработан Шифф-йодной кислотой; в результате в клетках выявлен секрет, окрашенный в малиновый цвет. Какие химические компоненты содержит секрет этой железы? Ответ: ШИК реакция направлена на обнаружение полисахаридов в бокаловидных клетках (содержащих гликопротеины в слизистом секрете)(бокаловидные железы часто располагаются в составе покровного эпителия -> эндоэпителиальные одноклеточные железы) В препарате железы видно, что ее секреторный отдел состоит из нескольких слоев клеток, в которых по мере удаления от базальной мембраны последовательно происходят накопление секрета, сморщивание ядер и разрушение клеток. Какой тип секреции характерен для этой железы? Ответ: для этой железы характерен голокриновый тип секреции, пример: сальные железы (простые разветвленные альвеолярные железы; клетки – себоциты; выводные протоки открываются в волосяную воронку – место выхода волоса на поверхность кожи; железы находятся в дерме всех участков кожи, кроме ладоней и подошв.) Кровь. При подсчете лейкоцитарной формулы в мазке крови взрослого человека обнаружены лейкоциты с резко базофильным округлым ядром, вокруг которого имеется узкий ободок светло-голубой цитоплазмы. Их относительное количество составило 40 %. Какие это форменные элементы? Соответствует ли норме их число? Ответ: Это лимфоцит (агранулярный лейкоцит): его нормальное относительное количество колеблется от 20 до 30 %. При подсчете лейкоцитарной формулы в мазке крови взрослого человека обнаружено 5 % лейкоцитов с бобовидным ядром и светлой цитоплазмой, содержащей едва различимые оксифильные гранулы. Похожие на них лейкоциты, но с палочковидным ядром составили 10 %, а с сегментированным ядром - 45 %. Какие это лейкоциты? Соответствует ли норме их число? Как в клинике называется подобнее соотношение типов данных клеток? Ответ: 5% лейкоцитов – юные нейтрофилы,10% палочкоядерные нейтрофилы,45 % сегментоядерные нейтрофилы. Нормальное соотношение этих форменных элементов крови в лейкоцитарной формуле здорового человека : 0-0,5%:3-5%:65-70%. Это патологическое состояние, при котором юные формы преобладают над зрелыми, в этом случае можно говорить о сильном воспалении, когда стимулируется выработка большего количества нейтрофилов. При подсчете лейкоцитарной формулы в мазке крови ребенка обнаружено около 60 % лимфоцитов и 30 % нейтрофильных гранулоцитов. Как Вы оцениваете подобный результат? Прокомментируйте ответ. Ответ: к одному, двум годам у ребенка число лимфоцитов достигает значения в 65%,а нейтрофилов около 25% (это после 1ого физиологического перекреста на 4е сутки и перед 2м физиологическим перекрестом в возрасте 4х лет, когда показатели этих видов лейкоцитов уравниваются, причем в первом случае лимфоциты растут, нейтрофилы падают(до уравнивания), а во втором наоборот. Устанавливается соотношение, характерное для взрослого организма, к моменту полового созревания.) Исследуется кровь у жителей высокогорья и равнинной местности. Каких различий в гемограмме следует ожидать? Объясните причины. Ответ: Следует ожидать более высокий процент эритроцитов в гемограмме жителей высокогорья. В горах воздух более разряженный и, вследствие адаптации организма к измененным условиям среды, организм синтезирует больше форменных элементов, предназначенных для осуществления функции дыхания. При анализе крови обнаружено 63 % нейтрофилов, 9 % эозинофилов, 22 % лимфоцитов и 6 % моноцитов. Соответствует ли норме лейкоцитарная формула? Если нет, то каковы возможные причины ее изменения? Ответ: Завышены эозинофилы (норма 2-4 %), причиной повышения эозинофилов в крови может быть воспаление, аллергическая реакция, паразитарные заболевания. Эозинофилы обладают хемотаксисом на гистамин, выделяемый базофилами при воспалении. У пациента в крови найдено 2,5 * 1012 л эритроцитов и 12 % ретикулоцитов. Какими терминами в клинике описывают подобную картину крови? Каковы возможные причины подобных изменений? |