|
|
Формы обмена генетическим материалом у бактерий. Формы обмена генетическим материалом у бактерий
Формы обмена генетическим материалом у бактерий Генетичекий обмен у бактерий процесс передачи генетического материала у бактерий. Основные пути осуществления: -трансформация -трансдукция -конъюгация Конечным этапом генетического обмена, который может быть как внутривидовым, так и межвидовым, является рекомбинация. Рекомбинация процесс взаимодействия между молекулами ДНК,приводящей к формированию новой рекомбинантной молекулы, несущей признаки от бактерии-донора и от бактерии-реципиента. Рекомбинация Законная Требует наличия протяженных комплементарных участков ДНК в рекомбинируемых молекулах Происходит только между близкородственными видами Незаконная Не требует наличия протяженных комплементарных участков ДНК Происходит при участии Is-элементов, обеспечивающих быстрое встраивание в хромосому Трансформация Передача генетического материала между бактериями при помощи фрагментов ДНК. Впервые была воспроизведена Ф.Гриффитсом в 1928 г. Он одновременно вводил в брюшную полость белых мышей авирулентные бескапсульные штаммы пневмококка и убитые капсульные варианты этих бактерий,в результате авирулентные штаммы приобрели вирулентность. ДНК донора должна быть выделена из бактериальной культуры того же вида, что и реципиент(или близкородственного) Участок трансформирующей ДНК должен сохранять двунитчатую суперспирализцию Концентрация ДНК не должна быть малой или избыточной, в обоих случаях количество рекомбинантов снижается Клетки-реципиенты должны быть компетентными, т.е. способными адсорбировать на своей поверхности ДНК донора и поглощать ее
Условия, необходимые для успешной трансформации
Постановка опыта по передаче локуса устойчивости к стрептомицину В опыт берут: ДНК стрептомицинустойчивого штамма Стрептомицинчувствительную культуру в компетентном состоянии Селективную среду, содержащую стрептомицин Последовательность действий: 1. Компетентные клетки реципиента соединяют с ДНК донора и инкубируют в течение 30 минут для контакта. 2.В пробирку вносят раствор фермента ДНК-азы для разрушения не проникшей в реципиентные клетки ДНК. 3.Полученную смесь высевают на чашки с селективной средой и инкубируют. 4.Делают контрольные высевы ДНК донора и культуры- реципиента на селективной среде. Результаты опыта: 1.В обоих контролях рост колоний отсутствует. 2.На опытных чашках вырастают колонии рекомбинантов, которые приобрели признак стрептомицинустойчивости. С помощью данного опыта можно определить частоту трансформации – отношение числа выросших рекомбинантов к числу реципиентных клеток. |
|
|
Скачать 222.68 Kb.