Чемери́ца Лобе́ля _ Сяткина В.В. _ ЦПФмз-01-20. Химический состав Алкалоиды стероидной природы, протовератрины а и В, вератроилзигаденин, йервин, сахара, флавоноиды и ряд микроэлементов
 Скачать 1.32 Mb.
|
|
Чемери́ца Лобе́ля или Чемерица Лобе́лиева (лат. Verátrum lobeliánum) Сырье - высушенные корневища с корнями Химический состав:Алкалоиды стероидной природы, протовератрины А и В, вератроилзигаденин,йервин, сахара, флавоноиды и ряд микроэлементов.Фармакологическое действие:Противопаразитарное средство.Применение:«Настойка чемерицы», «Чемеричная вода».Показания к применению:Педикулез волосистой части головы.Противопоказания:Повышенная чувствительность к препарату, беременность, период грудного вскармливания; детский возраст до 18 лет.Побочное действие:Аллергические реакции в виде кожного зуда, эритемы; ощущение жжения, покалывания или пощипывания в зоне нанесения препарата.Цельное сырье, измельченное сырье: суммы алкалоидов в пересчете на протовератрин - не менее 1,0 %. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. Около 6,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 90,0 мл хлороформа, 2,5 мл аммиака раствора и 2,5 мл воды очищенной. Колбу закрывают пробкой и встряхивают с помощью шейкера в течение 30 мин и оставляют до разделения слоев. Хлороформный слой процеживают через вату. 45,0 мл хлороформного извлечения (соответствует 3,0 г порошка сырья), переносят в делительную воронку и извлекают последовательно 15 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 % и 3 раза по 10 мл хлористоводородной кислоты раствором 1 %. Извлечения объединяют, фильтруют в другую делительную воронку, подщелачивают аммиака раствором и извлекают 20 мл хлороформа. Эту операцию повторяют несколько раз, используя каждый раз по 15 мл хлороформа до тех пор, пока небольшое количество хлорформного слоя после выпаривания и растворения остатка в хлористоводородной кислоте разведённой не перестанет давать с реактивом Майера положительную реакцию (осадок или муть). Все хлороформные извлечения фильтруют через бумажный фильтр, содержащий 3-4 г натрия сульфата безводного свежепрокаленного, смоченного хлороформом в круглодонную колбу. Хлороформ отгоняют с помощью роторного испарителя при пониженном давлении досуха. Сухой остаток сушат при температуре 100 - 105 °С в течение 30 мин. После охлаждения сухой остаток растворяют в 10,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты, избыток которой титруют 0,01 М раствором натрия гидроксида (индикатор – метиловый оранжевый). Содержание суммы алкалоидов в пересчете на протовератрин в абсолютно сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле: где, V – объем 0,01 М раствора натрия гидроксида, пошедшего на титрование, мл; 0,0625 - количество суммы алкалоидов в пересчете на протовератрин, соответствующее 1 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты; a – навеска сырья, г; 45 – объем хлороформного извлечения, взятого для определения, мл; W – влажность сырья, %. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСНОВНЫХ ГРУПП БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВТонкослойная хроматографияАналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм.Около 1,5 г измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 15 мл спирта 70 % и взбалтывают в течение 2 ч, затем фильтруют через бумажный фильтр. 12,5 мл полученного фильтрата помещают в делительную воронку вместимостью 100 мл, прибавляют 1 мл аммиака раствора концентрированного 25 % и экстрагируют эфиром два раза по 15 мл. Эфирные извлечения объединяют и фильтруют в круглодонную колбу объемом 100 мл через предварительно смоченный эфиром бумажный фильтр, содержащий 2 г натрия сульфата безводного. Фильтр промывают 10 мл эфира. Эфир отгоняют на роторном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 С досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл спирта 96 % (испытуемый раствор). На линию старта высокоэффективной хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят в виде полосы длиной 10 мм и шириной не более 2 мм 10 мкл испытуемого раствора. Пластинку с нанесенной пробой сушат, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 1 ч смесью растворителей бутанол - уксусная кислота - вода (4 : 2 : 2), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 - 90 % длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в потоке теплого воздуха, обрабатывают реактивом Драгендорфа модифицированным и просматривают в дневном свете. На хроматограмме испытуемого раствора в средней трети должны обнаруживаться три зоны адсорбции от оранжевого до красно-оранжевого цвета (стероидные алкалоиды); допускается обнаружение других зон адсорбции. |