Туберкульоз. Лабораторна робота Збудники туберкульозу
 Скачать 479.67 Kb.
|
|
Лабораторна робота Збудники туберкульозу Виконала Голик А.І. 2 курс 7 група ФВМ Туберкульоз - поширене й у багатьох випадках летальне інфекційне захворювання з хронічним перебігом і частою багатосистемністю уражень. Трапляється як серед людей, так і серед тварин. Його спричинюють різні види мікобактерій, частіше за все Mycobacterium tuberculosis. Найчастіше патологічний процес зосереджується в легенях (легеневий туберкульоз), також може уражати інші органи тіла (позалегеневий туберкульоз) — мозкові оболони, нирки, печінка, кістки, шкіра тощо. Передається повітряно-крапельним механізмом передачі інфекції, коли хворі на активний легеневий або гортанний туберкульоз кашляють, чхають або іншим чином виділяють слину у повітря. Морфологія Прямі або злегка зігнуті палички 1—6 х0,3—0,6 мкм. Дуже короткі або видовжені, гіллясті форми. Грампозитивні, нерухливі, не утворюють cпoр i капсул. Добре фарбуються за методом Ціль-Нільсена. Мікроскопія M. аvium (за Грамом) М. bovis (за Ціль-Нільсеном) M. tuberculosis (за Ціль-Нільсеном) Культуральні властивості Усі види збудника туберкульозу культивуються на елективних живильних середовищах : Левенштейна — Ієнсена, Гельберга, Петраньяні, Мордовського та інші, із синтетичних — Сотона, Моделя та ін. М. bovis — мікроаерофіл і в рідких та напіврідких середовищах росте в їх глибині. T opt. для М. tuberculosis 37-38 °С, М. bovis – 38-39 °С, М. avium – 39-41 °С з рН 6,8-7,4. ЛАБОРАТОРНА ДІАГНОСТИКА Бактеріоскопічний метод Матеріал для дослідження: мокрота, плевральна рідина, промивні води бронхів Поміщають в чашки Петрі і ставлять на чорну поверхню. Вибирають гнійну грудочку, переносять на предметне скло і готують два мазка. Фарбування за методом Циля-Нільсена Мікроскопують, переглядаючи до 100 полів зору (не менше 15 хв) Методи «збагачення» або накопичення Одиничні палички в препараті можна виявити, якщо в 1 мл матеріалу їх міститься не менше 100 000. Метод флотації - доданий до мокротиння бензол чи ксилол розбиває при збовтуванні її на дрібні крапельки, які, піднімаючись догори, адсорбують на своїй поверхні мікобактерії туберкульозу. Для прискореної діагностики застосовують люмінісцентну мікроскопію Бактеріологічний метод Дозволяє виявити в досліджуваному матеріалі 20 - 100 мікобактерій Досліджуваний матеріал звільняють від супутньої мікрофлори, обробляючи його кислотою або лугом. Проводять посів на середу Лівенштейна-Йенсена Ознаки росту на поживному середовищі з'являються на 3-4 тижні (60-90 днів). Засіяні пробірки витримують у термостаті протягом 3-х міс. Пробірки поверх ватної пробки заливають розплавленим парафіном для запобігання висихання середовищ Ріст на середовищі Лівенштейна Йенсена Колонії Mycobacterium tuberculosis на середовищі Лівенштейна- Йенсена Рісту вигляді сухого горбистого нальоту білого або жовтуватого кольору, що нагадує цвітну капусту Ідентифікація виділеної культури За біохімічними властивостями - ніацінова проба Конно Визначають здатність досліджуваної культури стимулювати нікотинову кислоту. Дозволяє відрізнити Mycobacterium tuberculosis, які добре синтезують нікотинову кислоту, від Mycobacterium bovis, що утворюють її в мінімальних кількостях. Біологічний метод Не знайшов широкого застосування, оскільки експеримент. тварини не чутливі до резистентних штамів. Зараження тварин та вивчення морфологічних реакцій в їх органах є основним критерієм вірулентності. • Морській свинці за 2 дні до постановки досліду проводять пробу Манту. • Тварини гинуть від генералізованого туберкульозу Внутрішньошкірна проба Манту з туберкуліном Застосовують для: Розпізнавання туберкульозу в дитячому віці Відбору контингенту, що підлягає ревакцинації проти туберкульозу Визначення інфікованості населення на туберкульоз як епідеміологічного показника Серологічний метод • Реакція зв'язування комплементу • Реакція непрямої гемаглютинації з еритроцитами барана, навантаженими полісахаридом або туберкуліном |