транскрипция. Лекция 3 Центральная догма днк рнк белок транскрипция
 Скачать 4.36 Mb.
|
ТранскрипцияМ.А. Волошина СУНЦ НГУ 2009 Молекулярная биология. Лекция 3 Центральная догмаДНК РНК белок транскрипция трансляция Комплементар-ность Принцип копирования Генетический код Транскрипция ДНК → РНКСинтез РНК по матрице ДНК ферментом РНК-полимеразой Первый этап реализации генетической информации в клетке Гены – транскрибируемые участки ДНКТранскрибируется не вся ДНК, а лишь отдельные ее участки – гены. ДНК одной хромосомы РНК Некодирующая ДНК между генами Строение генаКодирующая часть АТГ STOP ДНК РНК-транскрипт Промотор Терминатор Точка начала транскрипции Окончание транскрипции 5' 3' Регуляторная часть Знаки начала и окончания матричных синтезовДНК РНК белок транскрипция трансляция Знак начала Знак окончания Промотор Терминатор СТАРТ- кодон СТОП - кодон Промотор и терминатор – не кодоны, а более длинные последовательности (до 100 н.п.) ТранскрипцияДля транскрипции нужны1. Матрица – ДНК Для транскрипции нужныМатрица – ДНК 2. Фермент – РНК-полимераза 4 субъединицы 3. Мономеры Активированные нуклеотиды трифосфаты Для транскрипции нужны А ф ф ф Г ф ф ф Ц ф ф ф У ф ф ф Принципы транскрипцииКомплементарность Антипараллельность Униполярность Асимметричность АсимметричностьА Ц А Г Т Т Г А А Т Г Т Ц А А Ц Т Т У Г У Ц А А Ц У У ДНК ДНК 3' 5' 3' 5' Матричная цепь Смысловая цепь Этапы транскрипцииРНК-полимераза узнает промоторпромотор 1. Инициация (начало) Промоторы разных генов слегка отличаются. Есть сильные и слабые промоторы. РНК-полимераза движется по гену2. Элонгация (рост цепочки РНК) В области терминатора находится инвертированный повотор, который приводит к образованию петли на РНК 3. Терминация направление транскрипции Терминатор (знак конца транскрипции) Общие параметры транскрипцииСкорость – около 30 нуклеотидов / сек Частота ошибок – 1 на 104 нуклеотидов, т.е. на пять порядков выше, чем при репликации. Синтез РНК – гораздо менее точный процесс, чем синтез ДНК. Единица транскрипции. Сколько генов считывается на одну и-РНК?У эукариот – 1 ген У прокариот – оперон: от 1 до 10 генов Оперон – несколько генов, считываемых на одну и-РНК у прокариот
Только 6 % - более 3 генов Оперон прокариотДНК Промотор Терминатор Точка начала транскрипции Окончание транскрипции РНК Несколько генов под одним промотором Ген 1 Ген 2 Ген 3 Ген 1 Ген 2 Ген 3 3' 5' АТГ АТГ STOP STOP Концепцию оперона для прокариот предложили в 1961 году французские ученые Жакоб и Моно, за что получили Нобелевскую премию в 1965 году. В опероне собраны не случайные гены, а гены ферментов одного метаболического пути А → Б → С → Д ГЕН 1 ГЕН 2 ГЕН 3 Ф 1 Ф 2 Ф 3 Метаболический путь – цепочка последовательных химических реакций Транскрипция генов в хромосомеОдна хромосома – одна молекула ДНК – около тысячи генов Матричной может быть любая из цепей. Но в одном гене матричная цепь всегда одна и та же – та, на которой промотор. ДНК 3' 3' 5' 5' Р Р Р Ген 1 Ген 2 Ген 3 Транскрипция Особенностями строения гена эукариот являются: наличие достаточно большого количества регуляторных элементов (РЭ); мозаичность (чередование кодирующих участков с некодирующими); наличие экзонов (Э) – участков гена, несущих информацию о строении полипептида и интронов (И), не несущих такой информации. Число экзонов и интронов различных генов разное, экзоны чередуются с интронами, общая длина интронов может превышать длину экзонов в два и более раз. Гены эукариот могут кодировать полипептиды, тРНК, рРНК, есть регуляторные участки. Транскрипция Перед первым экзоном и после последнего экзона находятся нуклеотидные последовательности, называемые соответственно лидерной (ЛП) и трейлерной последовательностью (ТП). Лидерная и трейлерная последовательности, экзоны и интроны образуют единицу транскрипции. Транскрипция Транскрипция – синтез РНК на матрице ДНК. РНК-полимераза II может присоединиться только к промотору, который находится на 3'-конце матричной цепи ДНК, и двигаться только от 3'- к 5'-концу этой матричной цепи ДНК. Синтез иРНК происходит на одной из двух цепочек ДНК в соответствии с принципами комплементарности и антипараллельности от 5'- к 3'-концу . Строительным материалом и источником энергии для транскрипции являются рибонуклеозидтрифосфаты (АТФ, УТФ, ГТФ, ЦТФ). Транскрипция Сколько нуклеотидов кодируют полипептид из 51 аминокислоты? 153 Какой триплет в молекуле иРНК соответствует кодовому триплету АТГ в молекуле ДНК? УАЦ Какой триплет ДНК матричной цепи соответствует кодону АСА иРНК? ТГТ Транскрипция Транскрипция Каким кодоном кодируется аминокислота триптофан на иРНК? Какой триплет ДНК несет информацию об этой аминокислоте? Кодон иРНК: 5’ – УГГ – 3’ Кодон ДНК: 3’ – AЦЦ – 5’ Транскрипция Триплетность генетического кода. Поясните это свойство. Каждая аминокислота кодируется триплетом нуклеотидов – кодоном. Однозначность генетического кода. Поясните это свойство. Кодовый триплет, кодон, соответствует только одной аминокислоте. Вырожденность генетического кода. Поясните это свойство. Одну аминокислоту могут кодировать несколько (до шести) кодонов. Универсальность генетического кода. Поясните это свойство. Генетический код одинаков, одинаковые аминокислоты кодируются одними и теми же триплетами нуклеотидов у всех организмов Земли. Неперекрываемость генетического кода. Поясните это свойство. Последовательность нуклеотидов имеет рамку считывания по 3 нуклеотида, один и тот же нуклеотид не может быть в составе двух триплетов. На ДНК могут быть закодированы: Полипептиды, рРНК, тРНК. Подведем итоги: Сколько кодонов кодируют 20 видов аминокислот? Какие кодоны находятся в начале иРНК и в ее конце? Из 64 кодовых триплетов 61 кодон — кодирующие, кодируют аминокислоты, а 3 — бессмысленные, не кодируют аминокислоты, терминирующие синтез полипептида при работе рибосомы (УАА, УГА, УАГ). Кроме того, есть кодон — инициатор (метиониновый), с которого начинается синтез любого полипептида. Что такое промотор? Перед геном находится промотор – последовательность нуклеотидов, с которой соединяется РНК-полимераза. Что такое транскрипция? Транскрипция – синтез РНК на матрице ДНК. В каком направлении движется РНК-полимераза? В каком направлении происходит образование иРНК? РНК-полимераза может присоединиться только к промотору, который находится на 3'-конце матричной цепи ДНК, и двигаться только от 3'- к 5'-концу этой матричной цепи ДНК. Подведем итоги: В результате транскрипции образуется «незрелая» иРНК (пре-иРНК), которая проходит стадию созревания или процессинга. Транскрипция Процессинг включает в себя: КЭПирование 5'-конца; полиаденилирование 3'-конца (присоединение нескольких десятков адениловых нуклеотидов); сплайсинг (вырезание интронов и сшивание экзонов). В зрелой иРНК выделяют КЭП, транслируемую область (сшитые в одно целое экзоны), нетранслируемые области (НТО) и полиА «хвост». Возможен альтернативный сплайсинг, при котором вместе с интронами вырезаются и экзоны. При этом с одного гена могут образовываться разные белки. Таким образом, утверждение – «Один ген – один полипептид» – неверно. Транскрипция Транскрипция Транскрипция Транслируемая область начинается кодоном-инициатором, заканчивается кодоном-терминатором. НТО содержат информацию определяющую поведение РНК в клетке: срок «жизни», активность, локализацию. Транскрипция и процессинг происходят в клеточном ядре. Зрелая иРНК приобретает определенную пространственную конформацию, окружается белками и в таком виде через ядерные поры транспортируется к рибосомам; иРНК эукариот, как правило, моноцистронны (имеют только один кодон терминатор). Транскрипция Согласно гипотезе «билетиков», поли(А) разрушается 3/-РНКазой не постоянно, а после завершения каждой рибосомой трансляции от нее отщепляется 10-15 нуклеотидов. Когда же в этом фрагменте остается около 50 нуклеотидов, мРНК становится доступной для РНКаз и быстро разрушается. Транскрипция Основные понятия по теме «Транскрипция»Ген Промотор Терминатор Матричная цепь ДНК Смысловая цепь ДНК Единица транскрипции у эукариот (ген) и прокариот (оперон) |