Нарушение углеводного обмена Цель занятия
 Скачать 24.5 Kb.
|
|
нарушение углеводного обмена Цель занятия: Изучить принципы, механизмы и некоторые проявления нарушений метаболизма при острой гипогликемии. Оборудование и реактивы: 5% раствор лимоннокислого Na, 3% раствор трихлоруксусной кислоты, 1% раствор орто-толуидинового реактива, стандартный раствор глюкозы (100 мг%), инсулин, ЭК-граф, ФЭК, термостат, крыса. Методы работы. Крысу, предварительно голодавшую не менее 1 суток (без ограничения воды), под эфирным наркозом фиксируют в положении брюшком вверх к операционному столу. Присоединяют электроды электрокардиографа и снимают ЭК-грамму. Подсчитывают число дыхательных движений. Из хвостовой вены берут 0,2 мл крови в пипетку, предварительно промытую 5% раствором лимоннокислого Na. Кровь переносят в пробирку, содержащую 2 мл 3% раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ). Крысе подкожно вводят инсулин из расчета 10 ЕД/кг. Наблюдают за состоянием животного. При появлении признаков судорог вновь снимают ЭК-грамму, подсчитывают число дыхательных движений, берут 0,2 мл крови из хвостовой вены (как было указано выше), и переносят во вторую пробирку с 2 мл 3% ТХУ. При появлении судорог крысе вводят внутрибрюшинно 30% (1,1 ммоль/л) раствора глюкозы из расчета 0,5 мл на 10 г массы тела. Продолжают наблюдение за животным. Концентрация сахара в крови определяется орто-толуидиновым методом. Для этого пробирки, содержащего 2 мл 3% раствора ТХУ и 0,2 мл крови центрифугировать в течение 5 мин. при 2000 об/мин. С помощью пипетки взять 1 мл надосадочной жидкости и добавить к ней 5 мл 1% раствора орто-толуидина. Приготовить холостую пробу: смесь 1 мл 3% ТХУ и 5 мл 1% орто-толуидина. Обе пробы нагревать при 95°С в течение 15 мин. и затем немедленно охладить под струей холодной воды. Определить оптическую плотность стандартного раствора глюкозы (100 мг%). Определить оптическую плотность на ФЭК-е в кювете 10 мм при фильтре №7 (540 нм) против холостой пробы. Расчет концентрации глюкозы (мг%) произвести по формуле: А/В х 100, где А – оптическая плотность опытной пробы, В – оптическая плотность стандартного раствора глюкозы. Сравнить уровень сахара до введения, и после введения инсулина. На ЭК-грамме подсчитывают число сокращений сердца за 1 минуту до введения, и после введения инсулина. Делают заключение и выводы. Вопросы: 1. Каковы механизмы развития гипогликемической комы в данных эксперимента? 2. Какой возможен исход острой гипогликемии, если не проводится экстренная терапия? 3. В чем заключается главный механизм выведения организма из состояния гипогликемической комы? |