01 Организация микробиологической лаборатории. Морфология микроб. Практического занятия по дисциплине
 Скачать 30.08 Kb.
|
|
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Воронежский государственный медицинский университет имени Н.Н. Бурденко» Министерства здравоохранения Российской Федерации Кафедра микробиологии УТВЕРЖДАЮ Заведующий кафедрой микробиологии проф., д.м.н. _______________Земсков А.М. «____» _________________2017г. Методические указания обучающимся по теме практического занятия по дисциплине «Микробиология» ОРГАНИЗАЦИЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ. МОРФОЛОГИЯ МИКРОБОВ. ПРИГОТОВЛЕНИЕ И ОКРАСКА МАЗКОВ Факультет: лечебныйКурс: 2 Автор (ы):доц. Нараева Н.Ю. УМК составлен в соответствии с требованиями ФГОС ВО, утвержденного приказом Минобрнауки РФ от 17.08.2015 года № 853 по специальности 31.05.01 «Лечебное дело», обсужден на заседании кафедры «6» июня 2017 г., протокол № 11. 1.Тема занятия. ОРГАНИЗАЦИЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ. МОРФОЛОГИЯ МИКРОБОВ. ПРИГОТОВЛЕНИЕ И ОКРАСКА МАЗКОВ. 2.Цель занятия: Ознакомиться с целевым назначением, организацией и оборудованием микробиологических лабораторий, правилами работы в них; обучиться особенностям микроскопического исследования для изучения морфологии бактерий, освоить окраску по методу Грама. Для этого необходимо: 1. Получить информацию об обследованиях, проводимых в микробиологических лабораториях. 2. Ознакомиться со структурой баклаборатории, основными приборами ее оборудования, правилами охраны труда и техники безопасности работающего персонала. 3. Ознакомиться с устройством биологического микроскопа и методами микроскопии. 4. Обучиться методике приготовления и окраски микропрепаратов из бактериальной культуры. 5. Разобрать способы окраски мазков (простые и метод Грама). 6. Освоить методику микроскопии иммерсионным объективом окрашенных препаратов. 7. Обсудить основные морфологические формы бактерий. Реализуемые компетенции: ОК-1, ОПК-1, ПК-5. 3.Мотивация темы занятия: микробиологические исследования, проводимые в специальных лабораториях, имеют большое значение для ранней диагностики инфекционных болезней, с которыми будущий врач неизбежно встретится независимо от избранной им специальности. Знания и навыки, приобретенные при изучении данной темы, необходимы в курсе инфекционных болезней и в лабораторной диагностике патологических состояний организма. 4.Контрольные вопросы по теме занятия: 1) Каковы принципы организации микробиологических лабораторий? 2) Каково устройство микроскопа с иммерсионным объективом? 3) Каково оборудование баклаборатории? 5.План занятия: 1) Контроль исходного уровня знаний, необходимых для изучения данной темы, и полученных на предшествующих дисциплинах и предыдущих темах данной дисциплины. Тесты для контроля исходных знаний (примеры) 1. С помощью темнопольной микроскопии изучают: А) подвижность микробов Б) расположение жгутиков В) внутреннюю структуру микробных клеток Г) размеры микробов Д) все ответы верны 2. Для бактериальной клетки характерно: А) нуклеоид Б) наличие клеточной стенки В) наличие мезосом Г) отсутствие митохондрий, апп. Гольджи Д) все ответы верны 3. Простые методы окраски позволяют: А) выявить клеточную стенку Б) определить форму, размеры бактерий и их взаимное расположение В) изучить ультраструктуру бактериальной клетки Г) окрасить споры Д) окрасить капсулу 4. Протопласты: А) все ответы верны Б) Гр+ бактерии, полностью лишенные клеточной стенки В) живут в гипертоническом растворе (сахароза) Г) не возвращаются в исходное состояние Д) не способны к размножению 5.Бациллы имеют: А) палочковидную форму Б) шаровидную форму В) изогнутую форму Г) извитую форму Д) ланцетовидную форму 6. Характеристика стафилококков: А) палочковидная форма Б) спорообразование В) деление в одной плоскости Г) гроздьевидное расположение Д) расположение в виде цепочки 7. Для стрептококков характерно: А) расположение в виде цепочки Б)шаровиднаяформа В) грамположительные Г) могут вызывать рожистое воспаление Д) все ответы верны 8. Клеточная стенка: А) участвует в синтезе белка Б) защищает бактерии от вредных внешних условий В) участвует в движении Г) не выполняет рецептурную функцию Д) все ответы верны 9. Рибосомы у бактерий: А) мелкие (70S) Б) участвуют в биосинтезе белка В) располагаются непосредственно в цитолплазме из-за отсутствия ЭПС Г) являются мишенью для ряда антибиотиков Д) все ответы верны 10. Особенности структуры бактериальной клетки: А) нуклеоид Б) наличие клеточной стенки В) наличие рибосом Г) отсутствие мембранных органоидов, появление мезосом Д) все ответы верны 2) Разбор теоретического материала данного занятия, в том числе выделенного на сомостоятельную работу обучающихся, и коррекция усвоенного материала (устный опрос). Теория занятия. Функции баклабораторий: бактериоскопические (приготовление и окраска мазков из материала с их изучением под микроскопом), бактериологические (посевы на питательные среды с оценкой характера роста), спецлаборатории для особо опасных инфекций (например, для чумы). Структура помещений: лаборатория для исследования, бокс, предбокс, препараторская, автоклавная, моечная комната для забора от пациентов, отдельное изолированное помещение вивария. Оборудование баклаборатории: микроскопы, термостаты, аппаратура для стерилизации, дистиллятор, холодильник, центрифуги, весы, нагревательные приборы (спиртовые горелки, электропечи), набор инструментов (бактериологические петли, иглы, шпатели, пинцеты), лабораторная посуда и др. Правила работы в баклаборатории: Персонал должен быть в спецодежде, сменной обуви. В боксах работа в стерильной спецодежде и маске. В лаборатории запрещен прием пищи, лишние хождения, резкие движения, посторонние разговоры. Рабочее место должно быть в полном порядке. Обязательно обеззараживание инструментов, лабораторной посуды, дезинфекция помещения. Методы микроскопии: Обычная оптическая микроскопия в проходящем свете. Предельная разрещающая српособность иммерсионного микроскопа — 0,2 мкм с иммерсионным объективом. Специальные методы: темнопольный, фазово-контрастный, люминесцентный, электронный. Темнопольная микроскопия основана на явлении света при сильном боковом освещении взвешенных в жидкости мельчайших частиц. Используется параболоид-конденсор. Фазово-контрастная микроскопия дает возможность увидеть в микроскопе прозрачные объекты. Позитивная и негативная контрастность. Используется фазово-контрастное устройство. Люминесцентная микроскопия. Первичная и вторичная люминесценция. Преимущества: возможность исследовать живые бактерии и обнаруживать их в скудном материале. Электронный микроскоп применяют при изучении вирусов, тонкого строения бактерий и других субмикроскопических объектов. Световые лучи заменяют поток электронов. Разрешающая способность — 0,1 нм. Приготовление фиксированных препаратов — мазков. Термическая обработка предметного стекла. Нанесение капли физ. Раствора, распределение петли-культуры бактерий. Подсушивание, фиксация. Методы окраски. Простые: окраска каким-либо одним красителем (фуксин водный 1-2 мин, метиленовым синим 3-5 мин.) Сложные: последовательное применение определенных красителей: карболовоспиртовой р-р генцианвиолета, р-р люголя, 96% этиловый спирт, водный раствор фуксина. Отношение бактерий к окраске по Граму. Тинкториальные свойства зависят от химического состава и проницаемости клеточной стенки. У грамположительных бактерий пептидогликан многослоен, с ним связаны тейхоевые кислоты. У Гр (-) бактерий пептидогликан однослоен, наружную мембрану пронизывают белки-порины, обеспечивающие диффузию. Морфология бактерий. Основные формы: сферическая (кокки), палочковидная, извитая и нитевидная. Кокки — микрококки, диплококки, стрептококки, стафилококки, тетракокки, сарцины. Палочковидные: одиночные, дипло- и стрептобациллы; извитые формы: вибрионы, спириллы. 3) Практическая работа обучающихся с детальным алгоритмом ее выполнения и оформления ее результатов с обсуждением:
4) Заслушивание рефератов, подготовленных обучающимися по актуальным вопросам темы занятия, их обсуждение, дискуссия. 5) Контроль полученных на данном занятии знаний, включая знание материала, выделенного на самостоятельную работу обучающихся по данной теме. Тесты заключительного контроля знаний (примеры) 1. Укажите функции баклабораторий: а) микроскопическая б) бактериологическая в) спецлаборатории для особо опасных инфекций г) проведение стерилизации д) все ответы верны 2. Перечислить методы микроскопии: а) обычная оптическая микроскопия в проходящем свете б) фазово-контрастная в) люминесцентная г) электронная д) все ответы верны 3. Простой метод окраски это: а) последовательное применение определенных красителей б) окраска двумя красителями в) окраска каким-либо одним красителем г) окраска по Граму д) все ответы верны 4. Перечислить основные формы бактерий: а) сферическая б) палочковидная в) извитая г) нитевидная д) все ответы верны 5. Укажите извитую форму бактерий: а) вибрионы б) сарцины в) бациллы г) стафилококки д) диплококки 6. Укажите разрешающую способность электронного микроскопа: а) 0,1 нм б) 0,2 нм в) 1 нм г) 0,3 нм д) 1,5 нм 7. Укажите разрешающую способность иммерсионного микроскопа: а) 0,2 мкм б) 0,3 мкм в) 1,5 мкм г) 1 мкм д) 1,2 нм 8. К коккам относят: а) микрококки б) сарцины в) стрептококки г) диплококки д) все ответы верны 9. Фазово-контрастная микроскопия дает возможность увидеть в микроскоп: а) прозрачные объекты б) кокки в) живые бактерии г) вирусы д) все ответы верны 10. Для грамотрицательных бактерий характерно: а) однослойный пептидогликан б) многослойный пептидогликан в) связь. пептидогликана с тейхоевыми кислотами г) окрашиваются в фиолетовый цвет д) все ответы верны 6) Решение профессиональных задач . Пример задачи: 1. Изучая формы бактерий, Вы для микроскопии окрашенных мазков воспользовались иммерсионной системой светового микроскопа. 1) По каким признакам можно определить иммерсионный объектив микроскопа? 2) Почему при изучении морфологии бактерий необходимо пользоваться иммерсионной системой микроскопа? 2. В окрашенных мазках из выделенной культуры Вы обнаружили шаровидной формы микроорганизмы, располоагающиеся в виде гроздьевидных скоплений. 1) Как называются микроорганизмы, имеющие такую морфологию? 2) С чем связано такое расположение кокков? 3) Какие еще виды шаровидных бактерий Вам известны и на основании каких признаков они подразделяются? 7) Контроль остаточного уровня знаний по данной теме проводится в составе раздела «Морфология бактерий» с применением тестовых заданий остаточного уровня знаний (см. фонд оценочных средств). 8) Задание на следующее занятие: «Сложные способы окраски: по Цилю-Нильсену, Ожешко, Нейссеру. Изучение подвижности у бактерий». 6. Список основной и дополнительной литературы: а) основная литература: Медицинская микробиология, вирусология и иммунология для студ. мед. вузов / под ред. А.А. Воробьева. – Москва: МИА, 2012. – 704 с. Поздеев О.К. Медицинская микробиология: учеб. пособие / под ред. В.И. Покровского. – Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 768 с. Практикум лабораторных работ с иллюстрированными ситуационными заданиями по микробиологии, иммунологии и вирусологии: учеб. пособие /под ред. А.А. Воробьва, В.Н. Царева. – 2008. – 320 с. б) дополнительная литература: Наглядные инфекционные болезни и микробиология: учебное пособие / Г.С. Гиллеспи, Б.К.Бамфорд ; пер. с англ. под ред. С.Г. Пака, А.А. Еровиченкова. – Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2009 - 136 с. Руководство по клинической иммунологии для практических врачей / А.М. Земсков, В.М. Земсков, В.А. Черешнев, С.С. Решетников, Х.М. Галимзянов, В.А. Земскова – М.: Триада-Х, 2011. – 288 с. Энциклопедический справочник оперативной информации по иммунологии, аллергологии и вакцинологии / А.М. Земсков [и др.]. – Воронеж: Типография Королева, 2011. – 428 с. Энциклопедия иммунологии: в 5-ти т. Т. 1. Словарь терминов, определений, феноменов иммунологии / А.М. Земсков, В.М. Земсков, В.А. Черешнев. – Москва: Триада-Х, 2013. – 460 с. Энциклопедия иммунологии: в 5-ти т. Т. 2. Справочник иммунотропных лекарственных средств и воздействий / А.М. Земсков, В.М. Земсков, В.А. Черешнев. – Москва: Триада-Х, 2013. – 406 с. Энциклопедия иммунологии: в 5-ти т. Т. 3. Справочные материалы / А.М. Земсков, В.М. Земсков, В.А. Черешнев. – М.: Триада-Х, 2013. – 446 с. Энциклопедия иммунологии: в 5-ти т. Т. 4. Образовательный стандарт по иммунологии / А.М. Земсков, В.М. Земсков, В.А. Черешнев. – Москва : Триада-Х, 2013. – 422 с. Энциклопедия иммунологии: в 5-ти т. Т. 5. Персональная антология отечественной иммунологии / А.М. Земсков, В.М. Земсков, В.А. Черешнев. – Москва : Триада-Х, 2013. – 238 с. Иммунология: учеб.-метод. пособие / А.М. Земсков [и др.]. – Воронеж: Научная книга, 2013. – 593 с. - гриф УМО. Справочник по клинической иммунологии, аллергологии и инфектологии: справочник для практикующих врачей: в 3-х т. / под ред. А.М. Земскова, В.М. Земскова. - Воронеж, 2014. - 475 с. Иммунология и эпидемиология инфекций: учеб.-метод. пособие / А.М. Земсков [и др.]. – Москва: Триада Х, 2015. – 375 с. - гриф УМО. Теоретические, практические и прикладные аспекты клинической иммунологии на современном этапе: настольная книга клинического иммунолога / А.М. Земсков [и др.]. – Москва: Триада-Х, 2015. - 704 с. Иммунология [Электронный учебник] / А.М. Земсков [и др.]. – 2016. - Рекомендовано ФИРО. в) Интернет- ресурсы (для студ.): Поздеев О.К. Медицинская микробиология / О.К. Поздеев. - 4-е изд., испр. [Электронный ресурс] / под ред. В.И. Покровского. – Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 768 с. - Режим доступа: http://studmedlib.ru/KS_1_0_1.exe КоротяевА.И.Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: учебник для вузов / А.И. Коротяев. - 5-е изд. [Электронный ресурс]. – Москва, 2012. - Режим доступа: http://books-up.ru/product/45122 Электронно-библиотечная система "Консультант студента" Электронно-библиотечная системаиздательства "Лань" Экзаменационные вопросы по микробиологии для студентов педиатрического факультета на 2017-2018 учебный год Общая микробиология ОК-1, ОПК-1, ОПК-9 Морфология и ультраструктура бактериальной клетки. Химический состав микробной клетки. Основные отличия прокариот и эукариот. Протопласты, сферопласты, L-формы бактерий. ОК-1, ОПК-1, ОПК-9 Капсулы. Споры. Жгутики. Исследование подвижности микробов ОК-1, ОПК-1, ОПК-9 Систематика и номенклатура бактерий. Принципы классификации: вид, подвид, хемовар, серовар, культура, штамм, клон. ОК-1, ОПК-1, ОПК-9 |