10 вопрос. Приборы для считывания результатов диагностических тестполосок
 Скачать 0.67 Mb.
|
  Приборы для считывания результатов диагностических тест-полосок. . Приборы для считывания интенсивности цвета тест-полосок представляют собой отражательные фотометры или рефлектометры, которые являются фотометрическими устройствами для количественного измерения потоков света, отраженного поверхностью реакционной зоны. Лучи света, отраженные и рассеянные в разных направлениях, многократно отражаются от внутренней стенки сферы прибора, внутри которого создается равномерная освещенность, интенсивность которой определяется суммой всего отраженного исследуемой поверхностью света. В зависимости от конструкции прибора и цвета зоны измерение интенсивности окраски проводится на одной или нескольких длинах волн. При использовании отражательных фотометров необходимо строго следовать инструкции по применению прибора. Допускается применение в КДЛ только тех приборов, которые зарегистрированы в соответствии с установленным порядком. 2.4.4. Фотометр (фотоэлектроколориметр) (при необходимости подтверждения химическими методами результатов определения на тест-полосках). 2.4.5. Урометр (при необходимости дополнительного измерения относительной плотности) 2.4.6. Секундомер (при использовании визуального способа считывания результатов). 2.4.7. Штатив для пробирок. 2.4.8. Стеклянные (пластиковые) изделия. 2.4.8.1. Сосуд с крышкой для сбора мочи (количество мочи 50 – 100 мл). Сосуд для сбора мочи должен быть емкостью не менее 100 мл с широким горлом (не менее 4 см в диаметре) с устойчивым основанием, чтобы избежать случайного разливания. Посуда для сбора должна быть сухой, чистой, но не стерильной, желательно из прозрачного материала, инертного к составным частям мочи. Если посуда используется для транспортировки, она обязательно должна иметь плотно закрывающуюся крышку, чтобы избежать вытекания содержимого, при этом крышка должна легко открываться. Сосуд и крышка не должны содержать химических веществ, например, детергентов, которые могут мешать при определении некоторых химических составляющих мочи. Сосуд для сбора мочи не используется повторно без специальной обработки. Диагностические тест-полоски. Диагностическая тест-полоска представляет собой изделие для диагностики in vitro, предназначенное для одноразового применения. Она состоит из одной или нескольких реакционных зон, расположенных на пластиковой подложке. Реакционная зона содержит высушенный и импрегнированный в волокна пористой матрицы комплекс химических реактивов в количествах, предусмотренных методикой исследования. В основе методов, используемых в тест-полосках для анализа мочи, лежат цветные реакции, приводящие к изменению окраски тестовой зоны полоски. В зависимости от химических свойств определяемого аналита используются разные химические методы. Диагностически значимые изменения показателей мочи должны вызывать визуально заметные изменения окраски. Концентрация реактивов в тестовых зонах должна быть подобрана таким образом, чтобы быстро получить результат (в пределах нескольких десятков секунд). П р и м е ч а н и е ─ При обнаружении патологического результата какого-либо аналита на тест-полосках проводят исследование химическими методами (подтверждающие тесты): количественное определение белка в моче с пирогаллоловым красным, сульфосалициловой кислотой или другим химическим методом, глюкозы – глюкозооксидазным или гексокиназным методами (на анализаторе глюкозы), качественные пробы используются для подтверждения результатов билирубина (проба Фуше) и уробилиногена (проба Нейбауера). В зависимости от типа полоски оценка результатов исследования мочи может быть произведена и зарегистрирована: - визуально, путем субъективного сравнения оператором с прилагаемой к изделию цветной шкалой; - оптическим способом. 3.5 Технологии выполнения химических исследований мочи с помощью диагностических тест-полосок Химический анализ мочи может быть выполнен с использованием различных тест-полосок, выпускаемых разными производителями (см. п. 2.5.2.). Эти диагностические полоски можно использовать для качественного или полуколичественного исследования мочи (см. приложение Б). С помощью тест-полосок могут быть определены следующие аналиты, входящие в состав общего анализа мочи: - относительная плотность - рН - белок (альбумин), - глюкоза, - кетоновые тела, - билирубин, - уробилиноген, - эритроциты / гемоглобин, - нитриты - лейкоциты (нейтрофилы). -аскорбиновая кислота П р и м е ч а н и е 1 – Тестовая зона для определения содержания аскорбиновой кислоты используется как контрольный параметр, позволяющий учесть риск получения неправильных результатов таких важных показателей, как гемоглобин, глюкоза, билирубин, уробилиноген, относительная плотность. При отсутствии зоны для оценки содержания аскорбиновой кислоты необходимо обратить внимание на перечень лекарственных препаратов, принимаемых пациентом. Для исследования используется свежесобранная моча, хранившаяся до анализа не более четырех часов. При отсроченном проведении анализа мочу следует хранить в холодильнике. Использование консервантов нежелательно, так как они могут ингибировать некоторые тесты. Перед исследованием мочу тщательно (без пены) перемешивают. Методика проведения исследования: необходимое для анализа количество полосок изъять из пенала, не прикасаясь руками к тестовым зонам. Пенал следует быстро закрыть крышкой для предотвращения поступления влаги из воздуха. П р и м е ч а н и е 2 – В крышке или внутри пенала находится осушитель, поглощающий влагу при открывании пенала. Это обеспечивает длительный срок хранения полосок даже после вскрытия пенала. После удаления избытка мочи полоску следует держать горизонтально для исключения перекрестного загрязнения реактивами из прилегающих зон. При определении результата анализа мочи на отражательном фотометре диагностическую полоску после удаления избытка мочи помещают в специальный держатель, транспортер или на место считывания результата (в зависимости от конструкции прибора). Анализатор мочи (отражательный фотометр) проводит полуколичественное измерение параметров в стандартном режиме. П р и м е ч а н и е 3 – При работе на некоторых анализаторах нет необходимости предварительного удаления избытка мочи, так как он удаляется в процессе движения полоски на транспортере к фотометру, в котором происходит детекция результата. Иногда для удаления избытка мочи в анализаторе предусмотрена отдельная функция. После помещения полоски в анализатор происходит измерение и распечатывание результата. Патологические результаты отмечаются особыми пометками (флагами). В тест-полосках для исследования мочи на отражательных фотометрах с полуколичественным определением предусмотрены так называемые компенсационные зоны. Эти зоны, как правило, белого цвета, не импрегнированны реактивами. Они представляют собой своего рода «холостые пробы», постановка которых необходима для приборной компенсации окрашивания реакционных зон нативной мочой при определении химических компонентов. В некоторых случаях (экстренный анализ мочи при отсутствии фотометра, измерение параметров на приеме у врача общей практики, при наличии интенсивной окраски мочи, которая меняет цвет фона) результаты могут быть оценены визуально через промежуток времени, который указан в инструкции. Время экспозиции должно быть точно соблюдено для получения надежных результатов. После погружения полоски в мочу сравнивают окраску тестовых зон с окраской соответствующих зон цветной шкалы на пенале и регистрируют результат. Временной интервал между нанесением мочи на полоску и моментом чтения результата критически важен для точности определения: слишком короткий интервал может вызвать занижение результата из-за незавершенности цветной реакции, а слишком длинный интервал - из-за нестабильности окрашенного продукта. Визуальная оценка результатов по цветным шкалам, нанесенным на контейнеры для хранения полосок, может быть выражена как в единицах концентрации, так и в виде полуколичественной (порядковой) оценки результатов: «отрицательные» (-), «сомнительные» (+-), «положительные» (+, ++, +++ или ++++). Для подтверждения результатов исследований, полученных с помощью диагностических тест-полосок, используют химические методы (приложение В). 1. Анализ мочи с применением диагностических тест-полосок Исследования проводились в соответствии с положениями инструкции к тест-полоскам. Каждую пробу мочи тщательно перемешивали перед анализом. Диагностическую полоску Uriscan погружали в мочу. Избыток мочи удаляли прикосновением к мягкой ткани, далее диагностическую полоску помещали на направляющую панель анализатора мочи «Uriscan PRO» (Yeongdong Diagnostics, Korea). Принцип действия прибора: интенсивность света, отраженного от поверхности полоски, регистрируется специальными датчиками прибора. В отраженном свете определяется доля трех основных цветовых составляющих, которая, наряду с компенсационной цветовой составляющей, используется для расчета изменения коэффициента отражения (КО в %). Последний показатель преобразуется в соответствующий интервал (в условных единицах +,-) или концентрацию, который и выводится на табло прибора. Интервалы диагностических полосок Uriscan и соответствующие им концентрационные диапазоны определяемых показателей представлены в Таблице 1.  |