Применение методов в методах Биохимия 2. Применение энзиматического и кинетического методов. Применение энзиматического и кинетического методов на примере глюкозы

• Название: Применение энзиматического и кинетического методов на примере глюкозы
• Анкор: Применение методов в методах Биохимия 2
• Дата: 23.05.2023
• Размер: 205 Kb.
• Имя файла: Применение энзиматического и кинетического методов.ppt
• Тип: Документы; #1154303

Применение энзиматического и кинетического методов на примере глюкозы

Методы определения глюкозы в крови условно разделяются на несколько групп:
Редуктометрические
Колориметрические
Энзиматические
Кинетические
Рассмотрим два метода измерения глюкозы в крови, а именно, энзиматический и кинетический методы.

Кинетический метод

Суть метода состоит в том, что при определенном соотношении активностей глюкозооксидазы и пероксидазы, скорость образования окрашенного соединения некоторое время после внесения пробы в рабочий раствор будет пропорциональна концентрации глюкозы в пробе. Преимущество такого метода состоит в том, что результат не зависит от наличия в пробе других соединений, поскольку поглощение последних стабильно во времени.
Этот метод требует применения кинетического фотометра, полуавтоматических анализаторов или автоматических биохимических анализаторов.

Энзиматический метод

Суть метода состоит в том, что глюкоза под действием гексокиназы фосфорилируется за счет АТФ, образовавшийся Гл‑6‑Ф в присутствии дегидрогеназы восстанавливает НАДФ.
Количество последнего определяют по увеличению светопоглощения в ультра-фиолетовой области.

Достоинства и недостатки кинетического метода

Достоинства	Недостатки
Достоинствами кинетического ме-тода анализа является высокая чувствительность, быстрота и прос-тота выполнения анализа.	Основным недостатком является резковыраженная зависимость скорости химической реакции от внешних условий в частности от температуры, ионной силы раст-вора, примесей посторонних ве-ществ что влечет за собой соблюдение определенных усло-вий выполнения анализа.

Достоинства и недостатки энзиматического метода

Достоинства	Недостатки
Специфичность, отсутствие влияния антикоагулянтов	Снижение активности ферментов при хранении (нужна периодическая кали-бровка)
Простота анализа (конечная точка, монореагент)	Возможность некоторого занижения результатов из-за неспецифичности пероксидазы (окисление всех редуцирующих веществ)
Доступность и невысокая стоимость реактивов	Необходимость предварительной депротеинизации (при анализе цель-ной крови)

Заключение

Итак, были рассмотрены два метода измерения глюкозы в крови, а именно, энзиматический и кинетический. Также были даны описания вышеперечисленных методов на основе чего для них были выделены достоинства и недостатки. Из этого можно сделать вывод, что энзиматический метод является наиболее оптимальным, так как он обладает высокой специфичностью, прос-тотой анализа и доступностью.