Нуклеиновые кислоты. СРС по МБ. Выполнили Бабажанова Алсу Кондратьева Александра
 Скачать 2.58 Mb.
|
"Физические и химические свойства нуклеиновых кислот"; "Методы очистки и идентификации нуклеиновых кислот"Выполнили : Бабажанова АлсуКондратьева АлександраОмарова АянаТшанова АидаНуклеиновые кислоты – важнейшие компоненты всех живых клеток. Эти вещества регулируют передачу наследственных признаков в ряду поколений. Их относительная молекулярная масса колеблется в пределах 20 000 – 10 000 000 ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота ) и РНК (рибонуклеиновая кислота ) – линейные полимеры, мономерами которых являются нуклеотиды. Последовательность нуклеотидов в ДНК или РНК – это первичная структура этих нуклеиновых кислот. Методы очистки нуклеиновых кислотВыделение ДНК и РНК — важный шаг подготовки проб перед биохимическими и диагностическими процессами. Многие приложения, такие какамплификация, проведение обратной транскрипции, детектирование накопления продуктов амплификации методом ПЦР в реальном времени,клонирование, секвенс, гибридизация, синтез ДНКи т. д., не могут быть выполнены непосредственнона биологических образцах без предварительнойочистки нуклеиновых кислот.Фенол-хлороформом На спин-колонках На магнитных микроносителях Умная экстракция Ферментативная температурно-зависимая экстракция Метод фенол-хлороформной экстракции широко распространен благодаря своей дешевизне, но он всё же уступает другим технологиям по качеству и выходу НК, а также требует сложных и длительных манипуляций, которые могут привести к контаминации и потере образца, а сам процесс трудно автоматизировать. Принцип выделения ДНК заключается в разделении фаз раствора ДНК и фенол-хлороформной смеси и удалении вместе фенольной и хлороформными фазами белков и полисахаридов. В данной методике образец лизируют, а затем лизат смешивают с фенолом, хлороформом и изоамиловым спиртом. После центрифугирования эта смесь разделяется на две фазы, причем в нижней органической фазе остаются все жиры и липиды, в интерфазе – белки, а в верхней водной фазе – нуклеиновые кислоты . Для повышения чистоты экстракта эти действия повторяют несколько раз и таким образом получают выделенные и очищенные НК. |