Занятие № 1 Основные свойства вирусов и правила работы с вируссо. Занятие 1 Основные свойства вирусов и правила работы с вируссодержащим материалом
 Скачать 15.57 Kb.
|
|
Занятие № 1 Основные свойства вирусов и правила работы с вируссодержащим материалом. Цель занятия: ознакомление с вирусами и работой с вируссодержащим материалом. Вирусы - возбудители болезней животных, растений, а также человека. Подобно другим инфекционным агентам, они содержат генетическую информацию в форме последовательности в молекулах нуклеиновых кислот (ДНК или РНК), реализуют ее с помощью триплетного кода, обладают наследственностью и изменчивостью, поддаются естественному и искусственному отбору. Но в отличие от других инфекционных агентов вирусы не имеют своего обмена веществ, и поэтому они ничем не питаются, не дышат и ничего не выделяют, у них нет белоксинтезирующих и энергообразующих систем. Вирусы размножаются только в живых клетках поэтому их можно рассматривать как биологические образования, несущие генетическую информацию, которую они реализуют только в живых клетках животных и растений. А с е п т и к а - система мероприятий и приемов работы, предупреждающих попадание микроорганизмов и вирусов из окружающей среды в организм человека, а также в исследуемый материал. Она предусматривает использование стерильных инструментов и материалов, обработку рук сотрудников, соблюдение особых санитарно-гигиенических правил и приемов работы. А н т и с е п т и к а - комплекс мероприятий, направленных на уничтожение микроорганизмов и вирусов, способных вызвать инфекционный процесс при попадании на поврежденные или интактные участки кожи и слизистых оболочек. В качестве антисептиков используют различные химические вещества: 70%ный этиловый спирт, 5%-ный спиртовой раствор йода, 0,5-3% -ный раствор хлорамина, 0,1 %-ный раствор перманганата калия, 0,5-1 % -ный раствор формалина, 1-2%-ные спиртовые растворы метиленового синего или бриллиантового зеленого. Учет, этикетировка и хранение вирусов в лаборатории. Для всех вирусологических лабораторий установлен единый порядок обращения с вирусами, предусматривающий правила их хранения, регистрации, передачи внутри лаборатории и за ее пределы. Вируссодержащие материалы в пробирках, флаконах и других сосудах должны быть непременно снабжены этикеткой, на которой указан вирус, штамм, дата получения, номер пассажа, объем и другие сведения. Данные этикеток должны полностью соответствовать записям в журнале штаммов лаборатории. Штаммы вирусов хранят в холодильнике под замком с пломбой или печатью. Вирусы выделенных штаммов, как и стандартных штаммов, необходимых для сравнения и серологических исследований, следует хранить в условиях, обеспечивающих их максимально длительную жизнеспособность. Основные методы консервации вирусов. Применяют следующие методы консервирования вирусов: 1) при хранении вирусного материала (кусочки органов или тканей) часто используют глицерин (50%-ный раствор на физиологическом растворе), который обладает бактериостатическим действием и в то же время защищает вирусы. В этом случае вирус можно хранить при 4 ос несколько месяцев; 2) чаще всего вирусы хранят в холодильниках, обеспечивающих температуру минус 20, минус 30, минус 70 ос. При этой температуре некоторые вирусы без добавки защитных веществ сравнительно быстро теряют инфекционность. Известно, что чем меньше белка в вируссодержащей взвеси, тем меньше стабильность вирусов, поэтому очищенные вирусы быстро теряют свою биологическую активность. Хорошее защитное действие при замораживании и хранении вирусов оказывает добавка одного из следующих компонентов: инактивированной сыворотки крови, обезжиренного молока (от 10 до 30%), желатина (0,5-1,5%), ДМСО (10%) и др. При быстром замораживании вируса до минус 196˚С (жидкий азот) с последующим хранением при этой температуре титр вируса в течение нескольких месяцев практически не снижается. Вирусы, чувствительные к низким значениям рН, следует замораживать в жидкостях, не содержащих однозамещенных фосфатов (NaH2P04 или КН2РО4), которые обладают кислой реакцией и имеют более низкую точку замораживания, чем двузамещенные фосфаты (N а2НРО4 или К2НРО4) с щелочной реакцией. Скорость оттаивания вируса не оказывает существенного влияния на его активность. Размораживать вирусы можно как при комнатной температуре, так и в водяной бане при температуре 37˚С. Во избежание частого замораживания и оттаивания одного и того же вируссодержащего материала необходимо хранить его маленькими порциями, достаточными для одноразового титрования или использования, например для реакции нейтрализации; 3) лиофилизация, т. е. высушивание в замороженном состоянии в условиях вакуума - очень хороший способ консервирования вирусов. Вирусологическая лаборатория должна иметь следующую документацию. Журнал вирусологических исследований (экспертиз, сельхозучет, форма . № 13-вет). Журнал учета зараженных животных. Журнал учета выделенных вирусов и их уничтожения. Журнал учета движения производственных или музейных штаммов и другие книги учета согласно утвержденной инструкции. Контрольные вопросы: 1. Понятие о вирусах. 2. Правила работы с вируссодержащим материалом. |