лабораторная. бетагистин дигидрохлорид. Фармакопейный анализ бетагистина дигидрохлорида Приготовление необходимых растворов

• Название: Фармакопейный анализ бетагистина дигидрохлорида Приготовление необходимых растворов
• Анкор: лабораторная
• Дата: 17.02.2020
• Размер: 81.57 Kb.
• Имя файла: бетагистин дигидрохлорид.docx
• Тип: Документы; #108824

Фармакопейный анализ бетагистина дигидрохлорида

Приготовление необходимых растворов

Раствор серной кислоты 0,05М

0,1 н раствор серной кислоты.

5.0 раствора серной кислоты 1М помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, и доводят объём раствора водой до метки. Используют свежеприготовленным.

Натрия гидроксид 10%

10 гр натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл. Раствору дают отстоятся, прозрачную жидкость сливают. Хранят раствор в стеклянной таре с резиновыми пробками.

Необходимое оборудование

- Образцы лекарственных препаратов, которые реализуются через аптечную сеть (бетагестин таблетки 8, 16,24 мг № 20 – 60 производство Канонфарма, Вертекс, бетасерк таблетки 8, 16,24 мг № 20 – 60 производство Эбот, Вестибо таблетки 8, 16,24 мг № 20);

- Спектрофотометр Portlab 501 (УФ- и видимая область) с компьютером и принтером;

- Спектрофотометр Portlab 510;

- Титровальные установки;

- рН-метры, рН-150 М, рН-150МИ;

- Хроматографические камеры для ТСХ и БХ;

- УФ-облучатель, пластины для ТСХ, бумага хроматографическая.

- Сушильный шкаф, вытяжной шкаф

- Электрические плитки, водяные бани, термометры, химическая посуда, фарфоровые тигли и чашки,

- Весы аналитические и техно-химические электронные;

Бетагистина дигидрохлорид - Betahistini dihydrochloridum



N-Метил-2-(пиридин-2-ил)этанамина дигидрохлорид

C₈H₁₂N₂ • 2HCl М.м. 209,12

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % бетагистина дигидрохлорида C₈H₁₂N₂ • 2HCl в пересчете на сухое вещество.

Описание. Кристаллический порошок от белого до светло-жёлтого цвета. Очень гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, растворим в спирте
96 %, практически нерастворим в 2-пропаноле.

Подлинность.

1. ИК-спектр. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца бетагистина дигидрохлорида.



Рисунок 1 ИК-спектр Бетагистина

2. УФ-спектр. Ультрафиолетовый спектр 0,004 % раствора субстанции в 0,05 М растворе серной кислоты в области длин волн от 200 до 350 нм должен иметь максимум поглощения при длинах волн 245 нм и 310 нм. Отношение оптических плотностей А₂₄₅/А₃₁₀ должно быть от 3,2 до 3,4.

3. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика (испытание «Родственные примеси») на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика бетагистина на хроматограмме раствора сравнения А.

4. Субстанция дает характерную реакцию на хлориды.

К 2 мл раствора хлорида (2 – 10 мг хлорид-иона) прибавляют 0,5 мл азотной кислоты разведенной 16 % и 0,5 мл серебра нитрата раствора 2 %; образуется белый творожистый осадок, нерастворимый в азотной кислоте разведенной 16 % и растворимый в аммиака растворе 10 %. Для солей органических оснований испытание растворимости образовавшегося осадка проводят после отфильтровывания и промывания осадка водой.

Cl^- + Ag⁺ → AgCl↓ (аморфный осадок белого цвета)
Температура плавления. От 150 до 154 ºС (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Температура плавления, определенная капиллярным методом, представляет собой температуру, при которой последняя твердая частичка уплотненного столбика вещества в капилляре переходит в жидкую фазу.

рН. От 2,0 до 3,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 2,0 г натрий додецилсульфата в смеси 15 мл 10 % (о/о) серной кислоты, 35 мл раствора тетрабутиламмония 17 г/л и 650 мл воды. Доводят рН раствора до 3,3 раствором натрия гидроксида 10% и смешивают с 300 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. 25 мг субстанции растворяют в 25,0 мл ПФ.

Раствор сравнения А. 5 мг стандартного образца бетагистина дигидрохлорида и 5 мг стандартного образца примеси А – 2-винилпиридин растворяют в 25 мл ПФ. 1,0 мл полученного раствора разбавляют ПФ до 25 мл.

Раствор сравнения Б. 1,0 мл испытуемого раствора доводят ПФ до 100,0 мл.

Раствор сравнения В. 4,0 мл раствора сравнения Б доводят ПФ до 20,0 мл.

Хроматографические условия

Колонка		15 × 0,3 см, октадецилсилил силикагель деактивированный по отношению к основаниям, 5 мкм;
Скорость потока		1,0 мл/мин;
Детектор		спектрофотометрический, 260 нм;
Объем пробы		20 мкл.
Время хроматографирования		4-кратное от времени удерживания бетагистина

Пригодность хроматографической системы: на хроматограмме раствора сравнения А разрешение (R) между пиками примеси А и бетагистина должно быть не менее 3,5.

Относительные времена удерживания компонентов: примесь В (2-(пиридин-2-ил)этанол) – около 0,2; примесь А – около 0,3, бетагистин – 1,0 (около 7 мин); примесь С (N-метил-2-(пиридин-2-ил)-N-[2-(пиридинил-2-ил)этил]-этанамин) – около 3,0. При определении содержания примеси В площадь пика этой примеси на хроматограмме испытуемого раствора умножают на поправочный коэффициент 0,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площади пика примеси А, примеси В (с учётом поправочного коэффициента 0,4) и примеси С не должны превышать площадь пика бетагистина на хроматограмме раствора сравнения В (0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика бетагистина на хроматограмме раствора сравнения В (0,1 %);

- сумма площадей всех пиков примесей с учётом поправочного коэффициента не должна превышать 0,5 площади пика бетагистина на хроматограмме раствора сравнения Б (0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади пика бетагистина на хроматограмме раствора сравнения В.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Если не указано иначе, пробу высушивают в течение 2 ч в сушильном шкафу в пределах температурного интервала, указанного в фармакопейной статье или нормативной документации. Затем открытый бюкс вместе с крышкой помещают в эксикатор для охлаждения на 50 мин, после чего закрывают крышкой и взвешивают. Последующие взвешивания проводят после каждого часа дальнейшего высушивания до достижения постоянной массы. При отсутствии других указаний пробу сушат до постоянной массы при температуре от 100 до 105ºС.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Точную навеску испытуемого вещества (обычно 1 – 2 г) помещают в предварительно прокаленный тигель, смачивают 1 мл серной кислоты концентрированной и осторожно (избегая сильного вспенивания вещества) нагревают на пламени, песчаной бане или электрической плитке с закрытым нагревательным элементом и терморегулятором до обугливания. После охлаждения смачивают остаток 1 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают до удаления паров серной кислоты. Затем тигель помещают в муфельную печь и прокаливают при температуре 550 – 650 ºС до тех пор, пока остаток полностью не превратится в пепел. При этом следует избегать появления пламени, сплавления золы и спекания ее со стенками тигля. По окончании прокаливания тигель охлаждают в эксикаторе, взвешивают и рассчитывают процентное содержание остатка.

Остаточные органические растворители. ОФС «Остаточные органические растворители».

Содержание остаточных органических растворителей в лекарственных средствах регламентируется следующим образом:

◾при наличии растворителей 1 класса каждый из них должен быть идентифицирован и определен количественно;

◾при наличии растворителей 2 класса каждый из них должен быть идентифицирован и определен количественно;

◾при наличии растворителей 3 класса, если их суммарное содержание не превышает 0,5 %, для определения допускается применение неспецифического метода «Потеря в массе при высушивании»; если их содержание превышает 0,5 %, каждый из них должен быть идентифицирован и определен количественно. Предельно допустимое содержание в лекарственных средствах остаточных органических растворителей 3 класса токсичности составляет 50 мг/сут.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Около 0,080 г (точная навеска) субстанции растворяют в 50 мл спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 10,46 мг бетагистина дигидрохлорида C₈H₁₂N₂ *2HCl.

Расчеты:

Объём аликвоты равен 50 мл

m = 0,080 грамм C₈H₁₂N₂ · 2HCl содержится в аликвоте, взятой для титрования.
Молярность раствора гидроксида натрия C_M(NaОН)= 0,1 моль/л

Молярная масса бетагистина дигидрохлорида M_r(C₈H₁₂N₂ • 2HCl) = 209,12 г/моль.
Количество вещества ранитидина гидрохлорида в аликвоте:

n(C₈H₁₂N₂ • 2HCl) = m / Mr = 0,080/ 209,12 = 3.825*10^-4 моль
Уравнения реакции прямого титрования:
C₈H₁₂N₂· 2HCl + 2NaOH = C₈H₁₂N₂+ 2NaCl + 2H₂O
Согласно уравнениям реакций составим пропорцию:

1 моль бетагистина дигидрохлорида реагирует с 2 моль гидроксида натрия.

3.825*10^-4 моль реагирует с x моль гидроксида натрия.
Количество вещества гидроксида натрия пойдет на титрование

x = 2 * 3.825*10^-4 моль / 1 = 7.65*10^-4 моль.
Объем раствора гидроксида натрия:

V = x / C_M = 7.65*10^-4/ 0,1 моль/л = 7.65*10^-4 моль = 7.65 мл.
Хранение. В защищенном от света месте.