Микробиология Гангрена. живут только при полном отсутствии кислорода или незначительных его количествах
 Скачать 360.65 Kb.
|
|
Облигатные анаэробы : • живут только при полном отсутствии кислорода или незначительных его количествах; • столь же широко распространены, как и аэробные, обитая в глубоких слоях почвы, иле водоемов, сточных водах, кишечных трактах млекопитающих и птиц • обуславливают процессы гниения (круговорот азота) и брожения (углерода); • составляют основную массу нормальной микрофлоры кишечника человека; • подразделяются на спорообразующие и неспорообразующие, причем к первым из клинически значимых относятся только клостридии Возбудитель столбняка. 1.Таксономия Отдел Firmicutes, Род Clostridium, Вид Clostridium tetani 2.Морфология: Вегетативные клетки Гр+ палочки с закругленными концами в старых культурах могут окрашиваться грамотрицательно Подвижны - жгутики по периферии клетки - перитрих В мазках располагаются одиночно или цепочками, капсула отсутствует Споры Круглые, расположены терминально Диаметр превышает толщину бактерии в 2-3 раза, получили названия «теннисные ракетки» или «барабанные палочки» Споры устойчивы к химическим и физическим воздействиям Выживают в течение 8-10 часов в 5-%ном растворе фенола Выдерживают кипячение до 1 часа 3.Физиология: Строгий анаэроб Культуральные свойства растут в глубине жидких сред после удаления из них кислорода (кипячением), добавления редуцирующих веществ (глюкоза) и покрытия слоем масла Питательные среды должны иметь нейтральную или слабокислую рН Температура выращивания – 35-37 град.С Растет на плотных питательных средах – кровяном (каждая колония окружена зоной гемолиза) и печеночном агаре На МПА и желатине растет медленно и образует колонии 2-ух типов: S колонии гладкие, прозрачные и R колонии – серовато-желтые, шероховатые S колонии образуют отростки-паукообразной формы, потом они сливаются, образуется сеточка на поверхности среды R колонии имеют вид чечевичек Биохимические свойства сахара не ферментируют (только отдельные штаммы расщепляют глюкозу) Слабые протеолитические свойства – медленно расщепляют белки до аминокислот – они разлагаются до угольной кислоты, водорода, аммиака, летучих кислот, индола Образуют желатиназу и рининоподобный фермент – появление затемненных зон вокруг колоний на молочном агаре Медленно сбраживают молоко с образованием очень мелких хлопьев. 4.Антигены: О-антиген (групповой, соматический) H-Ar антиген (жгутиковый, термолабильный) – 10 сероваров (однако, токсин у них идентичный) 5.Факторы патогенности: Определяющим фактором патогенности является сильнейший столбнячный ток- син (экзотоксин). Смертельная доза для человека – всего 2 нг/кг. Токсин состоит из двух фракций: • тетаноспазмин (нейротоксин): - через отростки нервных клеток попадает в ЦНС путем ретроградного транспорта; - подавляет высвобождение в синапсах тормозных медиаторов (глицина и ГАМК); - вызывает тоническое сокращение поперечно-полосатой мускулатуры; - обнаруживается в культурах на 2-е сутки, достигая пика к 5–7-му дню; • тетанолизин (тетаногемолизин): - разрушает эритроциты, проявляет кардиотоксическое действие; - играет менее важную роль в патогенезе; - обнаруживается в культурах через 10 ч, достигая пика уже к 20–30 часу. 6. Экология и эпидемиология: Естественный резервуар и источник инфекции – почва. Человек заражается при попадании спор бактерий в рану при травмах различного генеза – чаще всего ранение нижних конечностей гвоздем, лопатой и т.д. Споры могут разноситься с пылью, проникать в жилище, попадать на верхнюю одежду с улицы, белье, обувь и т.д. Основная группа заболевших – работники сельского хозяйства 7. Патогенез: Столбняк – острое инфекционное токсигенное заболевание человека и животных с контактным путем передачи возбудителя. Споры бактерии выделяются животными и людьми с испражнениями в почву, после чего при контакте или разносе контаминируют различные раны (огнестрельные, колотые, резаные, родовые и др.), причем особенно опасны глубокие раны с анаэробными карманами. Отдельный случай – столбняк новорожденных из-за заражения через пупочный канатик (чаще при домашних родах). Инкубационный период (бактериальная фаза) длится 1-2 недели, в течение которых происходит адгезия и колонизация. Симптомы обычно отсутствуют. Далее следует токсическая фаза, ее патогенез описан ранее. У человека, в отличие от мелких животных, столбняк всегда протекает по нисходящему типу, начинаясь с тризма (тонического спазма) жевательной мускулатуры, сардонической улыбки (губы растянуты, уголки рта опущены) и дисфагии (затрудненное болезненное глотание). В разгаре заболевания все мышцы тела напряжены, малейшие раздражители вызывают болезненные тонические судороги всего тела. При тяжелом столбняке развивается опистотонус: в положении лежа поясничная часть тела приподнята над кроватью. Причиной смерти чаще являются асфиксия и паралич сердца. В случае благоприятного исхода выздоровление длительное (месяцы), возможно развитие осложнений (мышечные контрактуры, параличи черепных нервов). Кратко: Заболевание возникает только в том случае, если имеются условия для образования токсина Входные ворота – широкие рваные раны, содержащие сгустки и некрозы тканей. Обусловлен действием факторов патогенности, в основном – тетаноспазмин Попав в рану, споры прорастают в вегетативные клетки и продуцируют экзотоксины Токсин попадает в кровь, в периферическую, а затем и в центральную нервную систему Инкубационный период – от 3 дней до 1 месяца (длительность зависит от быстроты образования и количества токсина, а также от скорости его образования) 8. Клиническая картина У человека – развитие заболевания по типу нисходящего столбняка Процесс начинается с жевательных и мимических мышц лица, а затем распространяется на мышцы всего тела и нижних конечностей. Первые симптомы – мышечные боли и напряженность мышц на месте ранения или травмы, затем наступает напряжение в жевательных и мимических мышцах лица. Постепенно нарастает ригидность, спазмы и судороги мышц грудной стенки, живота и конечностей. Опистотонус - выгибание спины с запрокидыванием головы назад Все мышцы резко напряжены, тело вытягивается, становится совершенно прямым и неподвижным Развиваются судороги мышц всего тела Температура тела 39-42 град. С Смерть при явлении асфиксии 9.Иммунитет После перенесенного столбняка иммунитет непродолжительный, нарастающий по мере продукции анатоксина При вакцинации – стойкий, напряженный, длительный иммунитет 10.Лабораторная диагностика: Поскольку клиническая картина столбняка очень характерна, лабораторную диагностику обычно не проводят. К лабораторным исследованиям прибегают лишь в спорных, неясных случаях, а также при обследовании перевязочного и шовного материала или образцов почвы. Исследуемым материалом при столбняке служат кусочки тканей из ран, отделяемое ран, кровь, секционный материал, перевязочный материал, почва. Исследование проводится в двух направлениях: - обнаружение токсина путем постановки биопробы; - выделение возбудителя. Для обнаружения токсина проводят реакцию биологической нейтрализации (РБН) на лабораторных животных. Для нейтрализации токсина используют антитоксическую сыворотку. Подкожное введение мышам фильтрата исследуемого материала при наличии токсина приводит к спазму мышц и искривлению тела в сторону места введения токсина Для обнаружения токсина разработаны также серологические реакции: реакция непрямой гемагглютинации (РНГА), иммуноферментный анализ (ИФА), реакция латекс-агглютинации и реакция коагглютинации. Бактериоскопический метод Бактериологический метод 1. Исследуемый материал производят посев в пробирки со средой Китта-Тароцци. Для уничтожения посторонней неспороносной микрофлоры часть исследуемого материала после посева прогревают на водяной бане при температуре 85°С в течение 20 минут. 2. При наличии клостридий среда Китта-Тароцци становится мутной, образуется газ и появляется своеобразный запах «выгребной ямы». · Из проросшей питательной среды готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Наличие типичных микробов позволяет сделать посев на чашки с кровяным агаром и в столбик агара в пробирках. 3. Поверхность кровяного агара в одной из чашек смачивают антитоксической сывороткой без консерванта. Посевы помещают в термостат при температуре 37°С и инкубируют в вакууме в течение суток. · На кровяном агаре без антитоксической сыворотки вырастают прозрачные колонии в виде капелек росы с зоной гемолиза. · На кровяном агаре с антитоксической сывороткой гемолиз не наблюдается (нейтрализация антитоксином). +Проросший бульон среды Китта-Тароцци исследуют на наличие столбнячного токсина с помощью биологической пробы в реакции нейтрализации. С этой целью фильтрат исследуемой культуры делят на две части. Одна из них, являющаяся фильтратом выделенной культуры микробов, составляет контроль, а другую смешивают с антитоксической противостолбнячной сывороткой и оставляют на 1 час при комнатной температуре (опыт). Белых мышей заражают контрольным и опытным фильтратом полученной культуры. За животными наблюдают 1-2 суток. Контрольные мыши погибают, а опытные остаются живыми. Материал для исследования: кусочки ткани из места ранения, иногда – слизистое отделяемое из носа, бронхов, глотки, налет с миндалин Биологический метод – на лабораторных животных – мышах – восходящий столбняк – парализуются мышцы хвоста и задних лапок, затем туловище и мышцы шеи и головы Серологический метод– обнаружение столбнячного токсина реакцией нейтрализации Лечение Адсорбированный столбнячный анатоксин. Входит в состав АКДС, применяется для активной иммунизации Противостолбнячная сыворотка. Получена из крови лошадей, применяется для лечения и профилактики Иммуноглобулин человеческий противостолбнячный. Применяется для пассивной экстренной профилактики столбняка в сочетании со столбнячным анатоксином при повреждениях кожных покровов, а также для лечения начавшегося заболевания. Профилактика. Неспецифическая профилактика столбняка включает в себя профилактику травматизма в быту и на производстве и тщательную хирургическую обработку ран. Специфическая профилактика столбняка может быть плановой (активная иммунизация детей и взрослых) и экстренной (посттравматической). Плановая специфическая профилактика столбняка у детей начинается с 3-месячного возраста с последующей введением вакцины в 4,5 месяца и в 6 месяцев. Ревакцинация проводится в 18 месяцев, в 7 и 14 лет. Плановая вакцинация проводится в соответствии с национальным календарем профилактических прививок Профилактика: Вакцина АКДС В целях профилактики осложнений – антибиотики Хирургическая обработка ран Возбудитель ботулизма. 1. Таксономия Отдел Firmicutes, род Clostridium, вид Clostridium botulinum 2.Морфология Вегетативная форма Гр+, палочка с закругленными концами Жгутиков от 3 до 20 – перитрих Капсулы нет в препаратах располагаются поодиночке или цепочками Споры Образуется при неблагоприятных условиях Расположена субтерминально –на краю Форма теннисной ракетки 3.Физиология Тип дыхания Строгий анаэроб Условия роста Строго бескислородные условия, температура 35 град.С Культуральные свойства Среда Китта-Тароцци после удаления кислорода – муть с выпадением осадка и запахом прогорклого масла На кровяном агаре – колонии неправильной формы с отростками, с зоной гемолиза На печеночном агаре – полиморфные звездчатые колонии На желатине – круглые прозрачные колонии, потом они разжижаются, становятся мутными с отростками в виде шипов Биохимические свойства протеолитические штаммы гидролизуют белки, расщепляют сахара, образуют H2S; непротеолитические штаммы расщепляют сахара, но не белок; H2S не образуют В зависимости от б/х свойств выделяют 4 группы бактерий: - бактерии I группы обладают выраженными протеолитическими свойствами, гидролизуют желатин и эскулин, ферментируют глюкозу и мальтозу, проявляют липазную активность (в эту группу входят штаммы, продуцирующие нейротоксин типа А, и протеолитические штаммы, продуцирующие нейротоксины типов B и F); - бактерии II группы ферментируют глюкозу и мальтозу, но не обладают протеолитической активностью (эта группа объединяет непротеолитические штаммы, продуцирующие нейротоксины типов B и F, и все штаммы, продуцирующие токсин типа E); - бактерии III группы обладают липазной активностью и гидролизуют желатин (группа включает штаммы, продуцирующие токсины типов С и D); - бактерии IV группы гидролизуют желатин, но не обладают сахаролитическими свойствами и липазной активностью (эта группа представлена протеолитическими, но не сахаролитическими штаммами, продуцирующими токсины типа G). 4.Антигены О-антиген – соматический, типоспецифический Н-антиген – жгутиковый, групповой по антигенным свойствам продуцируемого экзотоксина выделяют 8 сероваров: A, B, C1, C2, D, E, F и G; патогенными для человека считают серовары A, B, E и F; все серовары А и некоторые серовары B и F относятся к протеолитическим; все серовары Е и остальные серовары B и F относятся к непротеолитическим. 5.Факторы патогенности Образуются только в анаэробных условиях! Определяющим фактором патогенности является сильнейший экзотоксин. Смертельная доза для человека – 1 нг/кг. Возбудитель в организме практически не размножается. • у патогенных для человека сероваров токсин кодируется бактериальной хромосомой; • продуцируется в виде протоксина в комплексе с белками, защищающими его от воздействия желудочного сока; • сорбируется на слизистой кишечника, проникает в кровь и поражает нейроны; • протеолиз протоксина с превращением в токсин у протеолитических штаммов происходит с помощью «своих» протеаз, а у непротеолитических – протеазами кишечника; • в результате протеолиза образуется H-цепь (ответственна за прикрепление нейротоксина к рецепторам нейрона) и L-цепь (блокирует слияние синаптических пузырьков с мембраной нейрона); • термолабилен (полностью инактивируется при кипячении в течение 20 мин). К факторам патогенности клостридий ботулизма относятся также ферменты агрессии: протеаза, лецитиназа, декарбоксилаза 6.Экология и эпидемиология Естественный резервуар и источник инфекции – почва и различные животные Распространено повсеместно, за исключением районов вечного холода Фактор передачи – мясные, рыбные, овощные консервы домашнего приготовления Попадая в анаэробные условия, спора прорастает – чаще всего в пищевых продуктах – образует вегетативные формы – продуцирует экзотоксин Путь передачи – алиментарный, также существует явление – ботулизм новорожденных – возбудитель проникает через пупочный канатик 7. Патогенез Входные ворота – пищеварительный тракт Патогенез обусловлен продукцией экзотоксина 1. Споры возбудителя ботулизма попадают в пищевые продукты, где в процессе размножения в анаэробных условиях продуцируют токсин. 2. Токсин вместе с пищевыми продуктами попадает в организм человека, сорбируется на клетках слизистой оболочки кишечника и всасывается в кровь. Токсин может всасываться также через слизистые оболочки глаз и верхних дыхательных путей. 3. Вместе с кровью токсин разносится по организму и достигает периферических нервных окончаний, где нарушает передачу сигнала с нервного окончания на мышечное волокно путем блокировки выделения ацетилхолина в мионевральные синапсы (“химическая денервация”). В результате этого нарушается передача нервного импульса на мышцу, что приводит к развитию характерных параличей мышц. 4. При ботулизме попавший в продукт возбудитель размножается и синтезирует токсин. Вместе с пищей токсин проникает в организм человека. Всасывание токсина происходит через слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта, начиная с полости рта, но наибольшее количество - через слизистую оболочку тонкой кишки. Всосавшийся токсин попадает в лимфу, а затем - в кровь. 5. С током крови токсин заносится в синаптическую щель. В синаптической щели ботулотоксин с помощью тяжелой цепи связывается со специфическими гликопротеиновыми рецепторами на пресинаптической мембране и в течение 30 минут путем рецептор-опосредованного эндоцитоза проникает в нервное окончание (интернализация токсина). 6. В нервном окончании токсин формирует везикулы, в которых дисульфидный мостик между цепями токсина разрывается, и легкая цепь через поры выходит в цитозоль нервной клетки. В цитозоле легкая цепь связывается с белками, которые участвуют в выбросе ацетилхолина из нервного окончания в синаптическую щель, и разрушает эти белки. 8. Клиническая картина Первые симптомы – пищевая интоксикация Далее – поражение бульбарных нервных образований Нарушение зрения Асфиксия Очень высокая летальность (до 90 %) пищевой ботулизм, возникающий после употребления в пищу продуктов, содержащих накопившийся ботулинический токсин; - раневой ботулизм, развивающийся при загрязнении почвой раны, в которой имеются анаэробные условия для прорастания попавших спор и токсинообразования; - ботулизм детского возраста (ботулизм новорожденных, ботулизм младенцев), возникающий у детей первого года жизни при попадании спор возбудителя ботулизма с пищей; - неклассифицированный ботулизм, при котором связь заболевания с каким-либо пищевым продуктом не установлена. Основной формой заболевания является пищевой ботулизм, который возникает после употребления продуктов, содержащих ботулинический токсин. Вначале появляются желудочно-кишечные расстройства - тошнота, рвота, боли в животе. Лихорадка, как правило, отсутствует. Затем развиваются неврологические симптомы. Раневой ботулизм возникает в результате попадания спор в рану, в которой создаются анаэробные условия. Симптоматика со стороны желудочно-кишечного тракта отсутствует. Ботулизм новорожденных (ботулизм грудных детей, ботулизм младенцев) наблюдается у детей первого года жизни. Заболевание возникает в основном в социально неблагополучных семьях, проживающих в неудовлетворительных санитарно-гигиенических условиях. Первыми симптомами заболевания являются вялость, слабое сосание, задержка стула. Затем появляются офтальмоплегические симптомы, хриплый плач. 9. Иммунитет не формируется 10. Лабораторная диагностика Материал для исследования – кровь (на наличие токсина), пищевые продукты (наличие возбудителя), кал, моча, рвотные массы, Бактериоскопический метод Бактериологический 1. Первый день. Для обнаружения возбудителей ботулизма производят посев на жидкие питательные среды. Для первичных посевов лучше использовать среду типа Китт—Тароцци. 2. Второй день. Через 48 ч от начала роста из всех флаконов с соблюдением стерильности берут пробы культуральной жидкости (по 10-15 мл) и подвергают их исследованию. Предварительно готовят мазки, окрашивают их по Граму и микроскопируют. С культуральной жидкостью ставят реакцию нейтрализации с поливалентной про-тивоботулинической сывороткой типов А, В, С, Е, F, как это описано для определения токсинов. При получении положительных результатов реакцию нейтрализации ставят с каждой сывороткой раздельно. Для выделения чистых культур ботулинических палочек применяют посев в столбики прозрачной агаровой среды или рассевают на плотные среды в чашках Петри. 3. Третий день. Через 1-2 сут. в последних пробирках с агаровыми столбиками появляются отдельные колонии в виде комочков ваты, пушинок с уплотненным центром или же правильных дисков, «чечевичек». Условные обозначения: КГ - образование кислоты и газа (КГ) - кислота и газ не у всех штаммов + - разжижение или пептонизация, положительная реакция (+) - медленная реакция Биологический метод. Выявление ботулотоксина и определение его типа с помощью реакции нейтрализации имеет важное значение для назначения специфической терапии. Для проведения реакции нейтрализации используют сухие диагностические антитоксические сыворотки типов А, В, С, Е, F, которые разводят физиологическим раствором до 100-200 МЕ / мл, что обеспечивает нейтрализацию гомологичного токсина в исследуемой пробе. Реакцию нейтрализации проводят либо со смесью сывороток (предварительная реакция), либо с моновалентными сыворотками для определения типа токсина. ИФА, РНГА Обнаружение ботулинического токсина Реакция пассивной гемагглютинации с эритроцитами, с антитоксическими противоботулиническими сыворотками Биологический - нейтрализация токсина на белых мышах 10. Лечение и профилактика Лечение антибиотиками неэффективно, промывание желудка, специфические противоботулинические сыворотки Препарат Botox – как специфическая профилактика Не употреблять консервацию домашнего приготовления а) неспецифическая – соблюдение технологии обработки продуктов (консервы автоклавируют 30-40 мин при температуре 120 °C), в продукты вносятся ингибиторы: нитриты. б) специфическая – только по экстренным показаниям: лицам, употреблявшим в пищу зараженные продукты, но еще не заболевшим, назначают поливалентную противоботулиническую сыворотку и ботулинический анатоксин, эатем типовые противоботулинические сыворотки по мере установление типа токсина. Возбудители анаэробной газовой инфекции. Газовая гангрена – полимикробная инфекция, возбудители, которые ее вызывают, делятся на 3 группы по степени патогенности Наиболее патогенные – Clostridium perfringens, Clostridium novyi, Clostridium septicum Менее патогенные – Clostridium histolyticum, Clostridium falaax, Clostridium sporogenes, Clostridium bifermentans Маловирулентные (сами вызвать заболевание не способны, но осложняют течение) – Clostridium sordelii, Clostridium tertium, Clostridium butirticum Заболевание рассмотрим на примере Clostridiumperfringens 1.Отдел Firmicutes, Род Clostridium, Вид Clostridium perfringens (до 90% случаев заражения) 2. Морфология Вегетативные клетки Гр+, в старых культурах могут окрашиваться грамотрицательно Толстые крупные палочки с обрубленными под прямым углом концами Неподвижны in vivo образуют капсулу (единственные среди патогенных клостридий). Споры Крупные, овальные, расположены центрально или у серовара типа А – субтерминально Споры сероваров типа А и С выживают при кипячении до 1-6 часов Споры сероваров В и D погибают при кипячении в течение 30 минут 3.Физиология Нестрогий анаэроб Относительно толерантна к кратковременным кислородным воздействиям Может расти в высоких столбиках сред без герметизации вазелиновым маслом Культуральные свойства Температурный оптимум – 37-43 град.С, оптимум рН 7,2-7,4 На жидких питательных средах (Среда Китта-Тароцци) растет 6-8 часов с бурным образованием газов – характерный запах масляной кислоты. Эти среды используют для накопления возбудителей На кровяном агаре – колонии окружены зоной гемолиза, на воздухе приобретают зеленоватую окраску В желточном агаре – зона перламутрового преципитата На плотных средах (Агар Цейслера, кровяной агар) существуют 3 варианта устойчивых колоний – гладкие (S), слизистые (M), шероховатые(R), или при определенных условиях – смешанные(O) Железосульфитная среда Вильсона-Блера – ее почернение  Биохимические свойства обладают слабыми протеолитическими свойствами, разжижают желатинСвертывает лакмусовое молоко с образованием сгустка кирпичного цвета и полным просветлением молочной сыворотки Сбраживает с образованием кислоты и газа глюкозу, мальтозу, лактозу, сахарозу Восстанавливает нитраты Некоторые штаммы разлагают глицерин и иннулин ферментируют все распространенные сахара (глюкозу, галактозу, мальтозу, лактозу, сахарозу) за исключением маннита 4.Антигены Выделяют 6 сероваров A, B, C, D, E, F 5.Факторы патогенности Альфа-токсин (Лецитиназа С) – дерматонекротизирующее, гемолитическое, летальное действие Бетта-токсин – некротизирующее, летальное действие Коллагеназа и желатиназа – разрушают мышцы и коллагеновые волокна соединительной ткани, летальное, некротизируюшее действие Протеиназа – некротическое действие Гемолизин – разрушение эритроцитов Гиалуронидаза и ДНК-аза – расщепление гиалуроновой и нуклеиновых кислот, повышение проницаемости тканей, нарушение реакций белкового синтеза Энтеротоксин – вызывает рвоту и диарею, но играет важную роль только при попадании в ЖКТ, так как вызывает пищевые токсикоинфекции, в патогенезе газовой гангрены роли не играет  6. Экология и эпидемиология Распространены повсеместно Находятся в воде, почве, сточных водах Попадают в организм человека из внешней среды с инородными телами – пулями, осколками, обрывками одежды, занозами и т.д. У человека вызывают 2 типа поражений – газовая гангрена и пищевые токсикоинфекции 7. Патогенез Газовую гангрену вызывают типы A, C, D Инкубационный период – от нескольких часов до 3 дней Сначала развивается боль в тканях вокруг раны Клостридии размножаются, выделяют токсины, которые повреждают ткани, а также повышают проницаемость для увеличения очага Продуцируют газ, вызывают крепитацию тканей (похрустывание при надавливании – лопаются пузырьки газа в ткани) Из раны выделяется большое количество жидкости, которая позже становится серозно-кровянистой Некроз тканей, интоксикация В развитии заболевания важную роль играет сопутствующая микрофлора 8. Клиническая картина Быстрое распространение отека мягких тканей с их разрушением, а также общая интоксикация организма Некроз тканей и образование газа с гнилостным запахом Входные ворота – поврежденная кожа. Омертвевшие ткани, богатые гликогеном, служат для клостридий благоприятной питательной средой. После попадания в рану в условиях гипоксии споры прорастают в вегетативные клетки, клостридии размножаются в месте входных ворот и синтезируют экзотоксины и ферменты агрессии. В частности, лецитиназа расщепляет лецитин клеточных мембран, гиалуронидаза и коллагеназа увеличивают проницаемость тканей. Результатом действия токсинов и экзоферментов является некроз мышечной и соединительной ткани, развитие отека, скопление газов в тканях, интоксикация организма. Условиями развития клостридиальной инфекции является травматический некроз тканей и наличие в ране анаэробных условий (карманов). Токсины микробов и продукты распада тканей оказывают общее токсическое действие на организм, что приводит к тяжелой интоксикации, нарушающей функции всех жизненно важных органов и систем. 9. Клиника Инкубационный период при клостридиальной анаэробной инфекции составляет 1-3 дня. Кожные покровы вокруг раны бледные, с синюшным оттенком. Края раны отечные, видимые мышцы напоминают вареное мясо. При надавливании из раны выделяются пузырьки газа с неприятным запахом. При пальпации отмечается характерная крепитация. Выражена общая интоксикация организма. Специфическими симптомами газовой гангрены являются: - симптом лигатуры (симптом Мельникова) – при наложении лигатуры (завязанной нити, швов) на участок конечности с газовой гангреной уже через 15-20 минут завязанная нить начинает впиваться в кожу из-за распухания конечности - симптом пробки шампанского – при извлечении тампона (салфетки) из раневого хода слышен хлопок из-за выхода образовавшегося газа; - симптом шпателя - при постукивании металлическим шпателем по поражённой области слышен хрустящий звук; - симптом бритвы - при бритье кожных покровов вокруг раны слышен слышен хрустящий звук; - симптом Краузе - межмышечные скопления газа на рентгеновском снимке напоминают “ёлочки”. 9. Иммунитет Кратковременный, нестойкий 10.Лабораторная диагностика Материал для исследования – содержимое ран и кусочки тканей Бактериоскопический метод – с иммунофлюоресцирующими сыворотками Материалом служат кусочки пораженных тканей и отечная жидкость. Сперва выполня- ется бактериоскопическое исследование. Подозрительным считается наличие в мазке большого числа длинных грам+ палочек. При бактериологическом исследовании используют жидкую элективную среду нако- пления Китта-Тароцци с кусочками печени. Затем культуру пересеивают на плотные среды, например Вильсона-Блэра (железосульфитный агар), где спустя пять часов наблю- дают почернение столбика и разрывы из-за образования газа. Зачастую и на первом, и на втором этапах материал делят на две части, одну из кото- рых после посева прогревают, чтобы выделить споры клостридий. Идентифицируют культуру по совокупности признаков: форма колоний, ферментация сахаров, створаживание молока, лецитиназная активность, результаты реакции преципи- тации токсина с диагностическими антитоксическими сыворотками. Для идентификации токсина более предпочтительным является проведение реакции нейтрализации на зараженных белых мышах: разным особям вводятся разные антиток- сические сыворотки, потому по выжившим можно установить видовую принадлежность. Биологический метод – на мышах, используют редко Бактериологический метод – на жидких и плотных питательных средах (Китта-Тароцци, Вильсона-Блера) Лецитиназная проба – На ЖСА засевают материал для исследования, в случае положительного результата наблюдается помутнение среды Лечение Обеспечить доступ кислорода к ране, промывка перекисью (т.к. возбудитель размножается только в анаэробных условиях) Применяют антибиотики для уничтожения сопутствующей микрофлоры Профилактика Антитоксическая сыворотка |