экзамен микра. 1. Микроорганизмы как основные объекты исследования молекулярной генетики. Генетический анализ и принципы картирования генов. Понятие о генной инженерии
 Скачать 115.09 Kb.
|
3.Роберт Кох и значение его работ для медицинской бактериологии.введение в практику анилиновых красителей использование в микроскопии иммерсионной системы и конденсора разработка метода культивирования на биологических жидкостях и плотных питательных средах разработка метода дробных пересевов открытие возбудителя сибирской язвы, холеры, туберкулеза и туберкулина Примерно в те же годы сформировалась и успешно работала немецкая школа микробиологов во главе с РОБЕРТОМ КОХОМ (1843 — 1910). Кох начал свои исследования в то время, когда роль микроорганизмов в этиологии инфекционных заболеваний подвергалась серьезным сомнениям. Для ее доказательства требовались четкие критерии, которые были сформулированы Кохом и вошли в историю под названием «триады Генле — Коха». Суть триады заключалась в следующем: предполагаемый микроб-возбудитель всегда должен обнаруживаться только при данном заболевании, не выделяться при других болезнях и от здоровых лиц; микроб-возбудитель должен быть выделен в чистой культуре; чистая культура данного микроба должна вызвать у экспериментальных зараженных животных заболевание с клинической и патологической картиной, аналогичной заболеванию человека. Практика показала, что все три пункта имеют относительное значение, поскольку далеко не всегда удается выделить возбудителя болезни в чистой культуре и вызвать у подопытных животных заболевание, свойственное человеку. Кроме того, болезнетворные микроорганизмы были найдены у здоровых людей, особенно после перенесенного заболевания. Тем не менее на ранних этапах развития и формирования медицинской микробиологии, когда из организма больных выделяли многих микроорганизмов, не имеющих отношения к данной болезни, триада сыграла важную роль для установления истинного возбудителя заболевания. Исходя из своей концепции, Кох окончательно доказал, что ранее обнаруженный у животных, больных сибирской язвой, микроорганизм отвечает требованиям триады и является истинным возбудителем данного заболевания. Попутно Кох установил способность сибиреязвенных бактерий образовывать споры. Велика роль Коха в разработке основных методов изучения микроорганизмов. Так, он ввел в микробиологическую практику метод выделения чистых культур бактерий на твердых питательных средах, впервые использовал анилиновые красители для окраски микробных клеток и применил для их микроскопического изучения иммерсионные объективы и микрофотографирование. В 1882 г. Кох доказал, что выделенный им микроорганизм является возбудителем туберкулеза, который был впоследствии назван палочкой Коха. В 1883 г. Кох с сотрудниками выделил возбудителя холеры — холерный вибрион (вибрион Коха). С 1886 г. Кох полностью посвящает свои исследования поискам средств, эффективных для лечения или профилактики туберкулеза. В ходе этих исследований им был получен первый противотуберкулезный препарат — туберкулин, представляющий собой вытяжку из культуры туберкулезных бактерий. Хотя туберкулин не обладает лечебным действием, его с успехом применяют для диагностики туберкулеза. Научная деятельность Коха получила мировое признание, и в 1905 г. ему была присуждена Нобелевская премия по медицине. Используя методы, разработанные Кохом, французские и немецкие бактериологи открыли многие бактерии, спирохеты, и простейшие — возбудители инфекционных болезней человека и животных. Среди них возбудители гнойных и раневых инфекций: стафилококки, стрептококки, клостридии анаэробной инфекции, кишечная палочка и возбудители кишечных инфекций (брюшнотифозная и паратифозные бактерии, дизентерийные бактерии Шига), возбудитель кровяной инфекции — спирохета возвратного тифа, возбудители респираторных и многих других инфекций, в том числе вызванных простейшими (плазмодии малярии, дизентирийная амеба, лейшмании). Этот период называют «золотым веком» микробиологии. 4.Микрофлора воздуха. Санитарно-гигиеническая оценка микрофлоры воздуха в лечебных учреждениях. Санитарно-бактериологическое исследование воздуха.Воздух является неблагоприятной для обитания микробов средой. Отсутствие питательных веществ, высушивание, действие ультрафиолето¬вых лучей вызывают быструю гибель микробов в воздухе. Вместе с тем некоторые виды могут сохраняться длительно. В воздух микробы попа¬дают из почвы, со слизистых верхних дыхательных путей и кожи людей. Распространение микробов в воздухе связано с образованием аэрозоля. Чем больше частицы аэрозоля, тем быстрее они оседают, чем меньше размер частицы аэрозоля, тем дольше она будет находиться в воздухе. Наиболее постоянно в открытом воздухе присутствуют пигментные бактерии, споры бактерий и грибов, которые более устойчивы к высушиванию, действию прямых солнечных лучей. В воздухе закрытых поме¬щений обнаруживаются гемолитические стрептококки, стафилококки и др., иногда патогенные бактерии (палочки дифтерии, коклюша). О микробном загрязнении воздуха судят по микробному числу воздуха. Микробным числом называется количество мик¬робов содержащихся в 1 м3 воздуха. Кроме того, определяют количество санитарно-показательных микробов. Санитарно-показательными микробами воздуха являются пато¬генные стафилококки, гемолитические и зеленя-щие стрептококки, которые обитают в верхних дыхательных путях человека и загрязняют воздух. В настоящее время все большее внимание уделяется непосредственному обнаружению патогенных и условно патогенных микроорганизмов. При исследовании воздуха стационаров (хирургические клиники, ро-дильные дома) основное внимание направлено на определение патогенных стафилококков, а так же грамотрица-тельных условно патогенных бактерий – возбудителей внутрибольничных инфекций. Допустимые уровни микробной обсемененности воздуха помещений стационара Место отбора проб Время отбора проб Результаты исследований Общее количе-ство микробов (КОЕ/м3) 1 м3 На золотистый ста-филококк На грамотрицатель-ные Операционный блок До работы Не более 100 отсутствие отсутствие После работы 1000 отсутствие отсутствие Реанимационное от-деление (палаты) Подготовленные к работе Не более 1000 Не более 4 отсутствие Процедурная До работы Не более 50 отсутствие отсутствие Во время работы 1000 Не более 1-2 Не более 1-2 Для микробиологического исследования воздуха используют мето¬ды, основанные на осаждении (се-диментации) и аспирации. При помощи седиментационных методов можно получить общее представ-ление о содержащихся в воздухе микробах. Аспирационные методы дают возможность определить не только качественное, но и количественное содержание микробов в определенном объеме воздуха. Для опре-деления микробного числа посев воздуха проводят на МПА, для определения стрептококков – кровяной агар с добавлением генцианвиолета, для стафилококков – желточно-солевой агар. Метод седиментации (метод Коха) – простейший метод бактериологического исследования, основан на оседании бактериальных частиц и аэрозоля под действием силы тяжести на поверхность агара открытой чашки Петри. Метод оседания не дает представления о количественном содержании мик-рофлоры в воздухе, так как плохо улавливаются тонкодисперсные фракции частиц, а задерживаются крупные пылевые частицы. Этот метод используется, только для атмосферного воздуха, где имеют место колебания в скорости движения. Аспирационные методы основаны на отборе проб воздуха с помощью приборов. Для этой це-ли используют: прибор Кротова, в котором воздух с заданной скоростью просасывается через узкую щель в пластине, закрывающей чашку с питательной средой; ПАБ-1 (пробоотборник аэрозольный бактериологический) в котором улавливание микроорганизмов основано на электризации аэрозоля и осаждении на электрод противоположного знака; мембранные фильтры, через которые с помощью воздуходувки просасывается воздух. После инкубации посева производят расчет микробного числа по формуле: количество колоний, выросших на чашке Микробное число воздуха = х 1000* объем пропущенного воздуха (л) * - искомый объем воздуха |