коллок. 1. Возбудители газовой анаэробной инфекции
 Скачать 268.25 Kb.
|
|
1.Возбудители газовой анаэробной инфекции. Разновидности Этиология: три главных возбудителя: Cl. perfringens, Cl. septicum, Cl.аedemаitiens. Наиболее часто причиной анаэробной инфекции является Cl. Perfringens. К этим трем возбудителям присоединяют еще два – это Cl. hystolyticum и Cl. sordelli – первый не патогенный для человека, но в сочетании с другими усиливает патогенные свойства друг друга и может быть причиной смерти. Cl.sordellii более токсичен и способен выделять смертельный токсин. 1) Cl. Perfringens Морфология, окраска. Вегетативные клетки — крупные, грамположительные, неподвижные. Классические формы представлены короткими палочками с обрубленными под прямым углом концами. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями; в старых культурах могут быть грамотрицательными. В организме образуют капсулы; капсулы наиболее выражены у вирулентных штаммов, резистентных к фагоцитозу. При культивировании на питательных средах материала, полученного от больных газовой гангреной, спор не образуют, это является одной из характерных особенностей C. perfringens. Споры крупные, овальные, расположены центрально или субтерминально. Факультативные анаэробы На плотных питательных средах C.peifiingens типа А образует S- и R-колонии. В жидких питательных средах, приготовленных из гидролизатов мяса или казеина (рН 7,4), при 37—43 °С растет быстро (3—8 ч) с бурным газообразованием и изменением рН в кислую сторону. Существует три устойчивых варианта колоний С. perfringens: гладкий (S), слизистый (М) и шероховатый (R), однако при определенных условиях могут появляться колонии смешанного (О) варианта. Колонии, выросшие на поверхности кровяного агара, часто окружены одной или двумя зонами гемолиза. Характерное свойство колоний clostridium perfringens типа А, служащее дифференцирующим признаком, — способность менять серовато-белый цвет на зеленовато-оливковый после кратковременного пребывания в аэробных условиях. Факторы патогенности Для человека патогенны С. perfringens типов А, С и D; (типы В, С, D и Е вызывают аналогичные заболевания у сельскохозяйственных животных.) Возбудитель образует как минимум 12 идентифицированных токсинов и ферментов, играющих роль в патогенезе газовой гангрены Мишенью для действия основных токсинов являются биологические мембраны клеток; в основе механизма поражения лежат ферментативные процессы, катализирующие гидролитическое расщепление и нарушение клеточной проницаемости, что в последующем ведет к отеку в области поражения тканей, который сопровождается снижением окислительно-восстановительного потенциала в клетках, активацией эндогенных протеаз, приводящих к аутолизу тканей, характерному для газовой гангрены. С. perfringens типов А и С образуют энтеротоксин, вызывающий пищевые токсикоинфекции; по своей природе это термолабильный протеин, продуцируемый при споруляции бактерий в толстой кишке; Энтеротоксин вызывает рвоту и диарею, оказывает летальное действие, 2. Эпидемиология, основные проявления, специфическая профилактика и лечение газовой анаэробной инфекции Эпидемиология газовой гангрены. - Газовая гангрена развивается при попадании С. perfringens на раневые поверхности, где бактерии активно размножаются в условиях пониженного содержания кислорода. Споры микробов могут быть занесены в раны из внешней среды, а также с кожи или из ЖКТ пациента. - Инкубационный период составляет 1-3 дня. - Иммунитет : Естественный (неспецифический) – из-за наличия в кишечнике здорового человека клостридий Постинфекционный (специфический) непродолжительный ведущая роль принадлежит антитоксическому иммунитету, который также ненапряженный Основные проявления: Локальные симптомы : отек инфицированных тканей, крепитация подкожных тканей и мышц, выделение неприятно пахнущей темной жидкости, образование газа вызывает сдавление подкожных тканей и боль, быстрой распространяющийся некроз Генерализованные симптомы – лихорадка, токсемия, шок и смерть. Лечение. - Вакцинация населения не проводится - Направлено на нейтрализацию гангренозных токсинов антитоксином; хирургическое удаление некротизированных тканей. Применяют антитоксические сыворотки, антибиотики и гипербарическую оксигенацию. Лечение заключается в обработке ран, раннем введении с профилактической целью поливалентной антитоксической очищенной концентрированной сыворотки по 10 тыс. ME. С лечебной целью эту дозу увеличивают в 5 раз (по 50 тыс. ME каждой сыворотки) и применяют антибиотики. Лечение дает нужный эффекта лишь при комплексном применение антитоксической сыворотки и антибиотиков, что сопровождается значительным снижением летальности. Направлено на нейтрализацию гангренозных токсинов. Применяют также и гипербарическую оксигенацию. Профилактика. При травмах проводится хирургическая обработка раны; соблюдение правил асептики и антисептики при операциях; борьба с травматизмом. Для пассивной профилактики и терапии применяют поливалентную сыворотку или иммуноглобулин. Для специфической профилактики проводится плановая или экстренная иммунизация. 3. Лабораторная диагностика газовой анаэробной инфекции Лабораторная диагностика газовой гангрены Лабораторная диагностика газовой гангрены. Для бактериологического исследования на газовую гангрену берут экссудат, кусочки измененной ткани из раны больного, а также кровь из вены. Трупный материал следует брать по возможности быстрее после смерти, так как в ткани трупа могут проникать различные патогенные анаэробные микроорганизмы, всегда имеющиеся в желудочно-кишечном тракте. Все взятые материалы помещают в стерильную герметически закрывающуюся стеклянную посуду и немедленно пересылают в бактериологическую лабораторию. Все пробы подвергают микроскопии. Для этой цели готовят мазки-отпечатки и окрашивают их по Граму. Наличие в пробе большого количества крупных грамположительных палочек служит ориентировочным признаком для подозрения на клостридиальную инфекцию. Бактериологическое исследование - плотные материалы стерильно измельчают, кровь или экссудат подвергают центрифугированию в течение 30 мин. Взвесь исследуемого материала засевают на кровяной агар, агар Вильсона-Блэра и бензидиновый агар. Посевы инкубируют в анаэробных условиях при 37°С, просматривают на следующий день и затем через каждые 2 дня (до 7 суток) для выделения подозрительных колоний. Выраженные колонии, вызывающие гемолиз на кровяном агаре проверяют на чистоту и наличие грамположительных палочек (путем микроскопии) и затем отсевают в пробирки с жидкой казеиново-грибной средой под слоем вазелинового масла, либо на анаэробную среду Китта-Тароцци. Выделенные чистые культуры проверяют на токсичность и вирулентность, а также проводят биологическую пробу на лабораторных животных (мышах, морских свинках). 4.Возбудитель столбняка: морфология, окраска, биологические свойства, токсинообразование Столбняк - острое инфекционное заболевание с преобладанием симптомов токсикоза, проявляющееся судорогами поперечно-полосатых мышц вследствие поражения токсином двигательных клеток центральной нервной системы. Возбудитель столбняка обнаружен А. Николайером в 1884 г. в содержимом ран. Чистая культура была получена японским ученым С. Китазато в 1889 г. Морфология и окраска Хорошо окрашивается всеми анилиновыми красителями, грамположительные палочки с закругленными концами, длиной 4—8 мкм Располагаются одиночно или цепочками; подвижны (содержат 20 и более жгутиков, перитрихи), в старых культурах преобладают неподвижные формы. Споры круглые, реже овальные; расположены терминально; их диаметр в 2—3 раза превышает толщину бактерий, вследствие чего клетка имеет форму «барабанной палочки». Биологические свойства Строгий анаэроб, чрезвычайно чувствительный к кислороду. Хорошо растет в глубине жидких питательных сред, налитых в высокие пробирки при наличии в них редуцирующих веществ (глюкоза, кусочки печени). Питательные среды должны иметь нейтральную или слабокислую реакцию. Оптимальной температурой при выращивании посевов является 35—37 "С. На плотных питательных средах — кровяном или печеночном агаре — столбнячная палочка хорошо растет только при полном удалении кислорода. На чашках с кровяным агаром через 2—4 сут вырастают отдельные прозрачные или слегка сероватые колонии диаметром 2—5 мм. Края колонии шероховатые, ветвящиеся. На кровяном агаре каждая колония окружена зоной гемолиза. При посеве в конденсационную жидкость скошенного агара в пробирках С. tetani растет в виде едва заметных нитевидных отростков, вползающих на поверхность агара. Эту особенность микроба можно использовать при выделении чистой культуры. Токсинообразование Патогенность обусловлена способностью продуцировать экзотоксины — тетаноспазмин и тетанолизин. • Тетаноспазмин — нейротоксин, фиксируется на поверхности отростков нервных клеток. Механизм действия связан с подавлением высвобождения тормозных нейромедиаторов, в частности глицина и у-аминомасляной кислоты, в синапсах. Вызывает тоническое сокращение поперечно-полосатой мускулатуры. Токсин появляется в культурах на 2-е сутки, достигая пика образования к 5—7-му дню. Разрушается при длительном хранении в термостате, под действием света и кислорода. • Тетанолизин (тетаногемолизин) обладает гемолитическим, кардиотоксическим и летальным эффектами, максимальное накопление токсина в культуре наблюдают уже через 20-30 ч; процессы его образования не связаны с синтезом тетаноспазмина. 5. Эпидемиология и основные клинические проявления столбняка -Естественный резервуар источник возбудителя инфекции — почва. -Механизм передачи — контактный, путь — раневой (бытовая травма, огнестрельные ранения и др.). Восприимчивость — высокая; заболеваемость значительно возрастает среди раненых во время военных действий; основная группа риска в мирное время — работники сельского хозяйства, жители сельских районов (80—86 % заболевших), дорожные и строительные рабочие, шахтеры и т. д. Ежегодная смертность от столбняка превышает 1,2 млн человек. Столбняк часто поражает новорожденных при родах в антисанитарных условиях. У них развивается «пупочный столбняк», от которого ежегодно гибнет более 1 млн новорожденных. Клиника. Инкубационный период 6 -1 4 дней. Легкая форма (локальный столбняк) характеризуется периодическими спазмами в пораженной области. Генерализованный столбняк — наиболее часто встречаемая форма с характерными мышечными спазмами; из других проявлений можно отметить разбитость, тахикардию, аритмии, менингит, гинокальциемию. Ведущее проявление болезни — судорожный синдром, включающий болезненные сокращения мышц и длительное напряжение мышц {мышечная ригидность). Характерными проявлениями последнего считаются опистотонус (тетанический спазм, при котором позвоночник и конечности согнуты; больной лежит на спине и опирается на затылок и пятки) и сардоническая улыбка (подобие оскала). Мозговые поражения включают поражения черепно-мозговых нервов; характерны конические спазмы лица и глотки. Естественный иммунитет у человека к столбняку отсутствует. 6. Лабораторная диагностика столбняка - Микробиологическая диагностика у больных практически не проводится вследствие выраженности клинической формы. - Возбудитель обычно обнаруживают в месте его проникновения в организм больного. Поэтому наиболее рационально исследование различного материала, взятого в месте ранения. Для диагностики применяют бактериоскопический, бактериологический и биологический методы. Обнаружение в мазках из материала, взятого от больного или трупа, тонких длинных грамположительных палочек с круглыми терминальными спорами «барабанные палочки» вызывает подозрение на наличие Clostridium tetani, однако на основании бактериоскопии нельзя делать заключение о присутствии возбудителя, так как в материале могут находиться морфологически сходные с ним клостридии. Выделение возбудителя проводят по обычной схеме. Исследованию подлежат материал от больного или трупа, перевязочный и шовный хирургический материал, а также почва, пыль и воздух. Исследуемый материал засевают на среду Китта—Тароцци, инкубируют в термостате 3 -4 суток, после чего пересевают на плотные среды для получения колоний. Выделенную культуру идентифицируют и определяют ее токсигенность на белых мышах. 7. Возбудитель ботулизма: морфология, окраска, биологические свойства, токсинообразование. Морфология и окраска Палочки с закругленными концами размером 4—8 мкм в длину и 0,6—0,8 мкм в поперечнике. подвижны, перитрихи. При неблагоприятных условиях образуют субтерминально расположенные споры; их диаметр в 2—3 раза превышает толщину бактерий, вследствие чего клетка имеет форму «теннисной ракетки». Молодые культуры окрашиваются грамположительно, 4-5-суточные — грамотрицательно. Биологические свойства Строгий (облигатный) анаэроб. Температурный оптимум 35 "С. На среде Китта—Тароцци образует муть с последующим выпадением осадка, культура издает запах прогорклого масла. На кровяном агаре формируются колонии неправильной формы с отростками, окруженные зоной гемолиза. На желатине возбудители ботулизма образуют круглые прозрачные колонии, окруженные зонами разжижения, в дальнейшем колонии становятся мутными с отростками в виде шипов. По биохимическим свойствам вьщеляют 4 группы: • бактерии I группы — проявляют выраженные протеолитические свойства, гидролизуют желатину и эскулин, ферментируют глюкозу и мальтозу; проявляют липазную активность на яичном агаре; • бактерии II группы — проявляют сахаролитическую, но лишены протеолитической активности; • бактерии III группы — проявляют липазную активность и гидролизуют желатину; • бактерии IV группы — гидролизуют желатину, но не проявляют сахаролитических свойств и липазной активности, что послужило основанием для предложения выделить их в отдельный вид — Clostridium argentiense. Все типы Clostridium botulinum образуют желатиназу, лецитиназу и H2S. Токсинообразование Патогенность обусловлена сильным экзотоксином, чувствительность к которому различна у человека и животных. Человек наиболее чувствителен к токсинам типов А, В, Е. Ботулотоксин — белок, проявляющий нейротоксическое действие. Токсин состоит из двух субъединиц: одна отвечает за адсорбцию на рецепторах чувствительных клеток, другая — за проникновение внутрь путем эндоцитоза. Проникнув из кишечника в кровь, токсин поступает в периферические нервные окончания, где блокирует слияние синаптических пузырьков с мембраной. Токсин разрушается при кипячении в течение 20 мин. Человек и животные очень чувствительны к токсинам ботулизма. Ботулотоксин является самым сильным ядом, известным человеку. По расчетным данным, 1 г кристаллического токсина содержит 10 смертельных для человека доз токсина. Токсины всех типов проявляют гемолизирующее действие. Оптимальная температура для токсинообразования вариабельна: для бактерий типов А, В, С и D — 35 °С, да бактерий типов Е и F — 28-30 °С. 8. Эпидемиология и основные клинические проявления ботулизма. Эпидемиология. Заболевание регистрируют повсеместно, исключая районы вечной мерзлоты. Наиболее часто заболевания вызывают типы А, В и Е. Естественный резервуар и источник возбудителя инфекции — почва и различные животные. Повышенную заболеваемость отмечают в регионах с теплым климатом. Механизм передачи — фекально-оральный, путь — алиментарный. Споры, попадая в пищевые продукты (мясные, овощные, особенно консервированные), прорастают, образуют токсин, который при употреблении пищи вызывает отравление. Клинические проявления заболевания зависят от вида пищевого продукта, ставшего причиной отравления, и от резистентности микроорганизма. Начало клинической картины протекает по типу пищевой интоксикации, в дальнейшем поражаются бульбарные нервные образования, нарушается зрение, возникает асфиксия. Летальность при ботулизме может достигать 60%. При попадании С. botulinum в рану возникает раневой ботулизм, который проявляется по типу пищевой интоксикации. Различают также ботулизм новорожденных, когда возбудитель проникает через пупочный канатик. Постинфекционный иммунитет отсутствует. 9. Лабораторная диагностика ботулизма Микробиологическая диагностика. Исследованию подлежат остатки пищевых продуктов; рвотные массы, промывные воды желудка, фекалии, моча, кровь, секционный материал От трупа забирают кусочки печени (50—60 г), отрезки кишечника и желудка и их содержимое, лимфатические узлы, головной и спинной мозг, кровь. Ботулотоксин определяют в биопробе на животных или в PHГА и ИФА. Для выявления ботулотоксина и определения его типа, мышам вводят исследуемый материал и смесь материала с антитоксической ботулинической сывороткой типов А, В, Е и др. По гибели животных устанавливают наличие токсина и его тип. Кровь исследуют только на наличие токсина в биологической пробе на мышах или морских свинках. Испражнения исследуют только на наличие возбудителя посевом на питательные среды, весь остальной материал — на наличие токсина и возбудителя. 10. Специфическое лечение и профилактика ботулизма. Лечение. Для лечения по Безредко больному внутривенно вводят одну международную лечебную дозу; однократного введения обычно бывает недостаточно, поэтому ее вводят ежедневно до достижения клинического эффекта. После лабораторного выявления типа возбудителя вводят сыворотку только против данного типа. Профилактика. Для специфической профилактики применяют ботулинический полианатоксин, содержащий анатоксины А, В Для экстренной профилактики используются поливалентная лошадиная сыворотка, выпускаемая в жидком и сухом виде. 11. Возбудители туберкулеза у человека: морфология, окраска, биологические свойства, факторы патогенности. Туберкулез — первично хроническое заболевание человека и животных, сопровождающееся поражением различных органов и систем (органов дыхания, лимфатических узлов, кишечника, костей и суставов, глаз, кожи, ночек и мочевыводящих путей, половых органов, ЦНС). Морфология и окраска Возбудители туберкулеза характеризуются выраженным полиморфизмом. Они имеют форму длинных, тонких (М tuberculosis, М. africanum) или более ко ротких и толстых(М bovis) прямых или слегка изогнутых палочек с гомогенной или зернистой цитоплазмой. Зернистость М. bovis менее выражена. Грамположительны,: неподвижны, спор не образуют. Имеют микро- капсулу. Из-за больщого содержания липидов в клеточной стенке, содержащих миколовую кислоту, они плохо воспринимают анилиновые красители. Для их выявления применяют окраску по Цилю—Нильсену, в основу которой положен принцип термокислотного протравливания. В препаратах микобактерии обнаруживаются в виде ярко-красных кислотоустойчивых палочек, расположенных по одиночке или небольшими скоплениями из 2-3 клеток, образующих римскую цифру V. Биологические свойства М. tuberculosis относится к аэробам, характеризуется медленным ростом. Они требовательны к питательным средам, глицеринзависимые. Им нужны факторы роста: витамины группы В. глицерин и глюкоза. Стимулятором их роста является лецитин. Оптимальная температура культивирования 37-38 °С. Рост и размножение происходят, в основном, путем простого деления или более сложно — путем почкования. Для них характерно вильчатое ветвление с образованием мицелиоподобных нитей. На жидких средах через 5 -7 дней дает рост в виде толстой твердой и сухой морщинистой пленки кремового цвета. На плотных средах рост отмечается на 15—20-й день в виде светлокремового чещуйчатого налета с неровными краями. М. bovis — микроаэрофилы, растут на средах еще медленнее, чем М. tuberculosis; пируватзависимые. При росте на плотных средах на 21-60 -й день образуют мелкие шаровидные влажные серовато-белого цвета колонии (S-форма колоний). М. africanum - тонкие длинные кислотоустойчивые, медленнорастущие бактерии, образующие видимые колонии в течение 31—42 дней при 37 °С на яичных и агаровых средах с бычьей сывороткой, патогенны для морских свинок, мышей и, в меньшей степени, для кроликов. Малопатогенны для человека и сходны по биохимическим свойствам с М. bovis. Факторы патогенности Основными химическими компонентами микобактерий являются белки (туберкулопротеины), углеводы и липиды. Туберкулопротеины составляют 56 % сухой массы вещества микробной клетки. Они являются основными носителями антигенных свойств микобактерий, высокотоксичны. На долю полисахаридов приходится 15% сухой массы вещества микобактерий. Это родоспецифические гаптены. В отличие от других бактерий, на долю липидов приходится от 10 до 40 % срой массы вещества микобактерий. Миколовая кислота, входящая в состав липидных комплексов обуславливает КИСЛОТО-, спирто- и щелочеустойчивость данных микроорганизмов. Липиды вызывают развитие гранулем и казеозного некроза, подавляют активность фагоцитарных клеток, разрушая митохондрии пораженных клеток и препятствуя слиянию фагосомы с лизосомой, блокируют активность клеточных липаз и протеаз. 12. Источники, пути передачи, локализация патологического процесса при туберкулезе. Основным источником инфекции является больной туберкулезом органов дыхания, выделяющий микробы в окружающую среду с мокротой. Больные сельскохозяйственные животные а также люди, страдающие внелегочными формами заболевания и выделяющие возбудителей туберкулеза с мочой и калом, играют второстепенную роль. Основной механизм заражения при туберкулезе — воздушный (аэрогенный) с соответствующими ему воздушно-капельным и воздушно-пылевым путями передачи инфекции. Входными воротами при этом могут быть слизистая оболочка полости рта, миндалины, бронхи и легкие. Реже заражение туберкулезом может происходить пищевым путем при употреблении термически не обработанных мясомолочных продуктов, что особенно характерно для заболеваний, вызванных М. bovis, чаще поражающих детей. Возможен контактный путь передачи инфекции от больных туберкулезом через поврежденные кожные покровы и слизистые оболочки использовании инфицированной одежды больных и других предметов. Внутриутробное заражение плода может происходить не только через пупочную вену и плаценту, но и при заглатывании амниотической жидкости, содержащей микобактерии. 13. Лабораторная диагностика туберкулеза. Специфическая профилактика туберкулеза. Основными методами микробиологической диагностики туберкулеза являются бактериоскопическое и бактериологическое исследования, биологическая проба, а также туберкулинодиагностика. Материалом для исследования служат мокрота, промывные воды бронхов и желудка, плевральная и цереброспинальная жидкости, моча, менструальная кровь и т.д. Чаще всего исследуют мокроту. Бактериоскопическое исследование заключается в многократном проведении прямой микроскопии мазков из исследуемого материала, окрашенных по Цилю—Нильсену. В препаратах можно обнаружить единичные микроорганизмы, если в 1 мл мокроты их содержится не менее 10000—100000 бактериальных клеток (предел метода). Метод прямой микроскопии прост, экономичен. При получении отрицательных результатов прибегают к методам обогащения материала: флотации и гомогенизации (седиментации). Бактериологическое исследование является более чувствительным, чем бактериоскопическое, и позволяет выявить возбудителей туберкулеза при наличии в исследуемом материале всего нескольких десятков жизнеспособных микроорганизмов. Наиболее чувствительным методом выявления возбудителей туберкулеза является постановка биологической пробы, позволяющая обнаружить от 1 до 5 микробных клеток в исследуемом материале. Туберкулинодиагаостика основана на определении повышенной чувствительности макроорганизма к туберкулину, которая наступила после заражения возбудителями туберкулеза или после вакцинации BCG, с помощью кожных аллергических проб. В основе данных проб лежит развитие реакции гиперчувствительности 4 типа, что свидетельствует об инфицировании. Специфическая профилактика туберкулеза Препараты для специфической профилактики. Специфическую профилактику осуществляют путем введения живой вакцины (БЦЖ), полученной А. Кальметтом и К. Гереном путем длительного культивирования М. bovis. Вакцинацию проводят у новорожденных на 3 -7 -й день жизни внутрикожно с последующей ревакцинацией в соответствии с утвержденным календарем прививок. Ревакцинации подлежат только не инфицированные туберкулезом лица, у которых туберкулиновая проба отрицательная, поэтому перед ее проведением ставится проба Манту. У новорожденных со сниженной резистентностью и в регионах, благополучных по туберкулезу, применяется менее реактогенная вакцина BCG-M, содержащая в 2 раза меньшее количество микробов. 14. Особенности иммунитета при туберкулезе. Проба Манту, ее значение.  15. Возбудитель лепры: морфология, окраска, биологические свойства, культивирование на животных. Лабораторная диагностика лепры. Лепра — генерализованное первично хроническое заболевание человека, сопровождающееся гранулематозными поражениями кожи и слизистой оболочки верхних дыхательных путей, а также периферической нервной системы и внутренних органов. Морфология, окраска. М. leprae имеет вид прямой или изогнутой палочки размером длиной 1—7 мкм с закругленными конпами. По своим морфологическим свойствам близки к возбудителям туберкулеза грамположительные, спор и капсул не образуют, имеют микрокапсулу, жгутиков не имеют. Характерной особенностью является кислото- и спиртоустойчивость, что обуславливает их элективную окраску по Цилю—Нельсену. Воздействие антилепрозных препаратов приводит к изменению их морфологии, снижению и исчезновению кислото- и спиртоустойчивости. Биологические свойства, культивирование на животных Образование фибронектинсвязывающего белка способствует их проникновению в клетку, а наличие микрокапсулы и клеточной стенки, богатой липидами, делает М. leprae устойчивой к действию фаголизосомных ферментов. На долю липидов, представляющих собой у М. leprae приходится 25—40%. Кроме миколовой кислоты, они содержат воск-лепрозин и лепрозиновую кислоту, которая есть только у М. leprae. Размножение возбудителя лепры происходит медленно путем поперечного деления. Время генерации составляет от 12 до 20— 30 дней. Оптимальная для роста и размножения температура 34—35 "С. Токсинов не образует. Эти свойства микроорганизма обусловливают длительный инкубационный период М. leprae является облигатным внутриклеточным паразитом тканевых макрофагов; не культивируется на искусственных питательных средах. Разработаны культуры клеток для их культивирования. В экспериментальных условиях к М. leprae восприимчивы мыши и девятипоясные броненосцы. У мышей происходит медленное локальное размножение М. leprae при заражении в подушечку лапки (метод Шепарда). Медленное размножение в подушечке лапки мыши М. leprae и определение ДОФА-оксидазы применяется для их идентификации. Заражение мышей используют для определения жизнеспособности М. leprae при лечении лепры, при испытании новых противолепрозных средств, а также для установления устойчивости М. leprae к действию физических и химических факторов. С помощью этого метода было установлено, что М. leprae остаются жизнеспособными после 10-12 лет хранения лепром при комнатной температуре в 40% формалине. По методу Шепарда стали успешно заражать крыс и хомяков. Наилучшей экспериментальной моделью лепры человека является заражение девятипоясных броненосцев, которые в филогенетическом отношении близки к приматам. При заражении их большими дозами М. leprae внутривенно у 80 % броненосцев через 18-35 месяцев развивается генерализованный специфический процесс с наличием в пораженных тканях большого количества М. leprae. Клиническое течение заболевания и морфологическая картина у броненосцев соответствуют лепроматозному типу лепры у человека. Но, в отличие от человека, у броненосцев рано и интенсивно поражается легочная ткань. Разработка данной модели позволила значительно продвинуться в изучении биологических свойств М. leprae и вплотную подойти к изготовлению диагностических и вакцинных препаратов. 16. Основные клинические формы лепры. Лепроминовая проба, ее значение Свидетельствует об иммунореактивности организма при лепре. Суспензию из убитых кипячением микобактерий лепры, взятых из лепром человека вводят внутрикожно в среднюю треть передней поверхности предплечья. Реакцию учитывают через 3 сут. У здоровых людей и у больных туберкулоидной формой лепры реакция положительная. Она выражается в появлении ограниченного инфильтрата. У больных лепроматозной формой лепры лепроминовая проба отрицательная. При недифференцированной лепре реакция может быть как отрицательной, так и положительной. Лепроминовая проба является надежный критерием эффективности лечения лепроматозной формы лепры. При излечении проба стойко положительная. Туберкулоидная форма заболевания возникает при высокой устойчивости макроорганизма. Она имеет доброкачественное течение и характеризуется появлением на коже гипопигментированных пятен или эритематозных бляшек с измененной тактильной, температурной и болевой чувствительностью. Гранулема, образовавшаяся в тканях, имеет эпителиоидный характер. М. leprae выявляются только при гистологическом исследовании биоптатов, а в соскобах кожи и слизистой оболочки носа отсутствуют. Лепроминовая проба положительная. С эпидемиологической точки зрения данная форма заболевания неопасна. Лепроматозная форма заболевания возникает при низкой резистентности макроорганизма. Она характеризуется злокачественным течением и сопровождается длительной бактериемией, большим разнообразием кожных поражений. У 30% больных развиваются трофические язвы стоп. При бактериоскопическом исследовании во всех высыпаниях обнаруживается большое количество М. leprae. Гранулема состоит из макрофагов с вакуолизированной цитоплазмой и содержащих М. leprae в виде шаров. Лепроминовая проба отрицательная. Эта форма заболевания эпидемиологически опасна. 17. Возбудитель гемофильной инфекции: морфология, окраска, биологические свойства, факторы патогенности Гемофильные палочки впервые были выделены русским бактериологом М. И. Афанасьевым в 1891 г. и позднее, в 1892 г., немецким бактериологом Р. Пфейффером от больных, умерших от гриппа. Поэтому Я. influenzae долгое время считали возбудителем гриппа; в связи с этим бактерии носили названия «папочка инфлюэнцы» (от англ. influenza — фипп) или «палочка Пфейффера». Морфология, окраска Гемофилы представляют собой мелкие грамотрицательные сферические, овоидные или палочковидные бактерии обычно менее 1 мкм в ширину и различные по длине, иногда образующие пары, короткие цепочки или нити. Такое свойство микробов принято называть «плеоморфизмом». Гемофильные бактерии неподвижны, спор не образуют, имеют пили (фимбрии). Образование капсулы является непостоянным признаком Гемофильные бактерии — факультативные анаэробы, однако лучше растут в аэробных условиях. Практически все виды нуждаются в готовых факторах роста, присутствующих в крови: Х-факторе, а также V-факторе (НАДФ). Это связано с тем, что гемофилы не способны синтезировать гем, входящий в состав ферментов дыхательной цепи. Для культивирования гемофильной палочки применяют шоколадный агар — питательную среду коричневого цвета, которую получают путем прогревания кровяного агара при 80 °С в течение 15 мин. В результате нагревания происходит гемолиз и высвобождение из эритроцитов гемина и НАД. Оптимальная температура роста бактерий 35-37 °С. Колонии появляются через 36-48 ч. Для Н. influenzae характерна способность к образованию R- и S-форм колоний. Для гемофильных бактерий характерен так называемый «феномен кормушки» или «феномен сателлита», который проявляется в их способности расти на кровяном агаре вокруг колоний стафилококков или других бактерий, продуцирующих НАД или вызывающих а-гемолиз. Для самих гемофильных палочек способность вызывать гемолиз не характерна. Гемофильные бактерии — хемоорганотрофы. Метаболизм дыхательный и бродильный. Утилизируют глюкозу до кислоты, восстанавливают нитрат до нитрита. Другие углеводы ферментируют плохо. Н. influenzae разделяют на 8 биоваров в зависимости от их способности продуцировать индол, уреазу. Факторы вирулентности. Ведущим фактором вирулентности Я. influenzae является капсула, которая защищает бактерии от фагоцитоза, обеспечивает выживаемость бактерий в организме и способствует распространению инфекции. Гемофильные палочки могут продуцировать IgA-протеазу, способную инактивировать секреторные антитела. Пили и IgA-npoтеаза возбудителя играют ведущую роль в прикреплении микроорганизмов к эпителию респираторного тракта и его колонизации. Экзотоксин Я. influenzae не продуцирует. ЛПС наружной мембраны играет роль эндотоксина, участвуя также в процессах адгезии и инвазии гемофильной палочки. Эндотоксин может также вызывать паралич ресничек мерцательного эпителия респираторного тракта человека, способствуя тем самым микробной колонизации верхних дыхательных путей. 18. Лабораторная диагностика гемофильной инфекции. Методы диагностики. Микроскопическое исследование малоинформативно, однако применяется при гнойном менингите (изучение мазков из цереброспинальной жидкости, окрашенных по Граму). Для ускоренной диагностики и дифференциации гемофильной палочки от других возбудителей менингита используют серологические тесты с целью обнаружения капсульного антигена Н. influenzae прямую РИФ или реакцию латекс-агглютинации с анти-Ь-антителами. При высокой концентрации возбудителя в исследуемом материале возможна также постановка «теста набухания капсулы». Для выделения и идентификации возбудителя из материала от больных применяют бактериологический метод исследования. Посев для выделения гемофилов производят на шоколадный или кровяной агар (как описано выше) и инкубируют до появления колоний в течение 24—48 ч. Н. influenzae дифференцируют от других близкородственных грамнегативных палочек по их потребности в X- и V-факторах роста, отсутствию гемолиза на кровяном агаре и другим тестам. |