курсовая. ЭКЗАМЕН по И.О.. Билет 1 Половые органы самок и самцов. Внутренние половые органы самок

• Название: Билет 1 Половые органы самок и самцов. Внутренние половые органы самок
• Анкор: курсовая
• Дата: 30.10.2022
• Размер: 205.6 Kb.
• Имя файла: ЭКЗАМЕН по И.О..docx
• Тип: Документы; #762288
• страница: 6 из 6

Для хранения спермы при температуре 2—4° ее разбавляют специальными средами: для быка и барана — глюкозо-цитратно-желточная, для хряка — глюкозо-хелато-цитратно-сульфатная; для жеребца — лактозо-хелато-цитратно-желточная.

Во всех случаях очень важно, чтобы при хранении спермы колебания температуры были минимальными. Для этого ее хранят в термосе со льдом или хорошо отрегулированном холодильнике. После разбавления сперму разливают в емкости (флаконы, ампулы, пробирки и т. д.) до самой пробки так, чтобы при транспортировке не было взбалтывания. Ампулы, пробирки или флаконы обертывают слоем ваты или упаковывают в поролоновые амортизаторы, помещают в полиэтиленовые или резиновые мешочки, герметически закрывают их и постепенно охлаждают до 2—4° в холодильнике или в термосе с тающим льдом.

 

При таянии льда в термосе талую воду следует сливать, добавлять лед. Хранят сперму при постоянной температуре, отклонения в ту или иную сторону неблагоприятно сказываются на переживаемости спермы.

 

Сроки хранения спермы при 2—4 ° весьма небольшие и, как правило, ее используют в течение суток. Даже если и спермии имеют поступательное движение через 3 дня и более, их оплодотворяющая способность резко снижена.

 

В настоящее время широкое применение нашел метод низкотемпературного замораживания и длительного хранения в жидком азоте (196°) спермы производителей. Такая сперма в замороженном состоянии может храниться в течение многих месяцев или нескольких лет без потери оплодотворяющей способности.

 

При замораживании спермы необходимо: строжайше соблюдать установленную технологию разбавления, охлаждения и замораживания спермы; непрерывно поддерживать низкую температуру (не выше 150°) в течение всего срока хранении спермы. Не допускать колебания температуры во время ее хранения. Для замораживания спермы используют специальное оборудование (аппараты, приборы и т. д.) и хранят в стационарных емкостях, находящихся в специальных хранилищах станций (филиалы), откуда сперма поступает в обслуживающие хозяйства. Для длительного хранения спермы в жидком азоте ее замораживают в форме: необлицованных гранул; облицованных гранул; полипропиленовых соломинок (пайет); ампул.

После замораживания для дальнейшего хранения допускается сперма быка с подвижностью 4 балла, жеребца — 3 балла, барана — 4 балла, хряка — 4 балла.

Билет № 24

1.Продвижение и выживаемость спермиев.

У сам­цов крупного и мелкого рогатого скота эякуляция происходит быстро, одним импульсом, причем сперма рассеивается во влагалище около шейки матки и только часть ее попадает в канал шейки — депо спермиев.

Если принять во внимание, что длина выпрямленного по­лового тракта у взрослых коров равна в среднем 65 см, у телок — 53 см, а скорость собственного движения спермиев состав­ляет 2—7,5 мм/мин (Скорость движения спермиев около 5 мм/мин: у быка—5,6 мм, барана—4,6, жеребца— 5,2 мм.) становится очевидным, что половым клеткам потребовалось бы очень много времени, чтобы достигнуть яйцепроводов, если бы они передвигались за счет собственных движений.

Пере­мещение спермиев через тело и рога матки в основном происхо­дит благодаря сокращениям мускулатуры этих органов.

Собственная подвижность спермиев имеет значение только при движении в шейке матки и в месте соединения матки с яйцепроводом, и при проникно­вении через оболочки яйцеклетки в процессе оплодотворения.

Движение спермиев слагается из двух моментов:

1) дви­жения хвостовой нити в правую и левую стороны, проис­ходящего в плоскости головки спермия.

2) вращения спермия вокруг продольной оси, обусловленного тем, что головка спермия имеет с одной стороны небольшую вогнутость вследствие изгиба се пе­реднего края. Благодаря этому спермий вращается вокруг своей оси.

Движение спермиев осуществляется против тока жидкости (реотаксис), благодаря которому скорость их движения увеличивает­ся в 2—3 раза. Сущность раздражения, вызывающего реотаксис, заключается в неравномерности давления на отдельные участки спермия, производимого разностью скоростей течения отдельных слоев жидкости.

Выживаемость спермиев. В определенных участках половых путей самок спермии могут некоторое время со­хранять свою оплодотворяющую способность.

Среда влагалища самок неблагоприятна для пережи­ваемости спермиев. Здесь они быстро гибнут, если не про­никнут в вершины рогов матки и яйцепроводы.

Наиболее благоприятные условия для переживаемости спермиев имеются в вершинах рогов матки — в депо спермиев.

Здесь слизь, продуцируемая клетками эпителия матки, временно подавляет активность спермиев, сохраняя их энергию.

Фолликулярная жидкость обладает свойствами активировать их. При овуляции фолликулярная жидкость поступает в ампулу яйцепровода и, продвигаясь навстре­чу спермиям, побуждает их к активному движению.

Сперма всех видов животных обладает антигенными свойствами, которые обеспечиваются комплексом растворенных в плазме белков, а также белками спермиев.

Установлено, что слизистая оболочка репродуктивных органов самок обладает способностью синтезировать антитела к спермиям, микробам проникающим во внутрь.

На месте контакта со спермой слизистая оболочка гиперемируется, отмечается выход лейкоцитов и фагоцитирование ими спермиев. При этом стенкой матки активно всасывается жидкость, находящаяся в ее полости.

Установлено, что при осеменении коров с поврежденной слизистой оболочкой (незавершенная инволюция матки, эндометриты) погибшие в половых органах спермии интенсивно всасываются и вызывают массовое образование спермагглютитнинов. Частые осеменения неоплодотво­ряющихся коров повышают титр ан­тител в их крови против спермиев (в конечном итоге приводят к появлению иммунного бесплодия).

Основное количество спермиев попавших в половые пути самки фагоцитируется различными клетками иммунной системы и при этом стимулируется антитело образовательная функция клеток слизистой оболочки. В первую очередь погибают ослабленные и патологически развитые спермии.

Иммунологические реакции антител с антигенами спермы приводят к нарушению оплодотворяемости.

Однако оплодотворение наступает, так как существует в плазме спермы достаточное количество белков, липопротеидов и других веществ которые маскируют собственные антигены спермиев.

В половых органах коров и овец продолжительность жизни спермиев—до 36—48 ч, у свиней и кобыл—30— 48 ч., у кобелей – 134 - 268 ч. (5,5 – 11 дней). Большое значение для переживаемости спермиев имеет общее состояние организма.

Длительность сохранения оплодотворяющей способно­сти спермиев зависит и от качества спермиев производителей.

2.Методы определения концентрации спермиев, интенсивности их дыхания, времени выживаемости и наличия патологических форм спермиев

Концентрацию спермиев (количество в 1 мл эякулята) наиболее точно определяют в счетной камере Горяева. Это один из основных показателей качества спермы, на который ориентируются при разбавлении эякулята.

Для определения концентрации спермиев жеребцов Г.В. Паршутин и Е.В. Румянцева сконструировали специальные стандарты. Они представляют собой запаянные пробирки, содержащие жидкость, имеющую цвет, соответствующий той или иной известной концентрации спермы. Для определения концентрации исследуемую сперму наливают в пробирку с диаметром стандартных пробирок, устанавливают рядом с ней пробирки стандарта и подбирают наиболее подходящий по виду стандарт, на котором отмечено количество спермиев в 1 мл спермы.

Концентрацию спермиев в эякулятах хряка удобно определять оптическим стандартом С.И. Сердюка.

В настоящее время станции искусственного осеменения пользуются фотоэлектроколориметрическим методом, основанным не на прямом подсчете спермиев, а на учете степени оптической плотности спермы, т.е. мутности. Этот метод позволяет быстро (2-3 минуты) определить концентрацию спермиев в сперме, но так как фотоэлектроколориметр создан для анализа истинных растворов, а сперма является взвесью и в ней содержится большее или меньшее количество эпителиальных и других клеток, то результат нередко может быть неточным.

Определение содержания патологических форм спермиев у быков проводят в мазках, окрашенных азурэозином или другими красителями, где подсчитывают 100-200 спермиев и различные включения. Среди нормальных спермиев всегда находится более или менее значительное количество патологических форм. Чаще аномалии выявляются в хвостовой части спермиев, основании головки и шейки. С возрастом к моменту физиологической зрелости производителя количество аномальных спермиев уменьшается. Могут встречаться самые различные патологические формы спермиев: гигантского размера или карликовые, спермин с двумя-тремя головками, но общим хвостом, с двумя хвостами, с укороченным хвостом, его деформацией или отсутствием, с цитоплазматической капелькой, слишком большой или маленькой головкой и другие формы. Иногда встречаются спермин, лишенные головки, но способные двигаться.

Большое количество патологических спермиев свидетельствует о нарушении спермиогенеза, о вредном влиянии патологически измененных секретов придаточных половых желез и мочевых путей или, наконец, указывает на нарушение правил получения спермы и ее хранения во внешней среде от выделения до исследования.

В качестве конкретных причин образования уродливых форм спермиев отмечают: слабо развитые семенники; поражения семенника и придатка (гигантские и карликовые спермин); длительные промежутки между коитусами, обусловливающие старение и распад спермиев в придатке (отдельные головки, изолированные хвосты); половое истощение производителя вследствие большой половой нагрузки или недостаточного кормления (спермин с цитоплазматнческими капельками в области шейки, тела и хвоста -- незрелые спермин). Чем ближе к головке расположена капелька, тем моложе спермий.

Большое значение в образовании патологических форм спермиев придается нарушению терморегулирующей функции мошонки.

Закручивание хвостов спермиев в сторону происходит при смешивании спермы с гипотоническим раствором (неправильная подготовка разбавителей, попадание воды).

Интенсивность дыхание спермиев. И.И. Иванов (1911) впервые установил, что спермин млекопитающих способны усваивать кислород воздуха. Последующими очень важными исследованиями Н.П. Шергина и других авторов была доказана различная интенсивность дыхания спермиев животных разных видов. Так, 100 млн. спермиев быка при 20°С потребляют в час 3,4 мм³, барана - 8,4, хряка -- 7,2, жеребца --4,3 мм³ кислорода. В целом спермин сельскохозяйственных животных поглощают кислород сильнее, чем клетки легких и селезенки.

Понижение температуры спермы на каждые 10?С снижает интенсивность дыхания спермиев в 2 раза. При температуре, близкой к 0°С, дыхание выражено очень слабо. Повышение кислотности тормозит дыхание, а изменение реакции в сторону щелочности усиливает его.

Дыхание -- основной биохимический процесс, обеспечивающий спермиев необходимой энергией для движения. Около 90% всей энергии спермин получают за счет дыхания. В процессе дыхания под влиянием кислорода окисляются углеводы, липиды (фосфатиды), белки и жиры. Прежде всего, окисляются простые сахара (моносахариды) фруктоза и глюкоза, а затем другие вещества.

Овуляция часто не совпадает во времени с проявлением течки и полового возбуждения, поэтому осеменение может не привести к оплодотворению из-за того, что спермии вводятся в половые органы самки слишком рано (до овуляции или значительно позднее ее), т.е. когда яйцевая клетка еще не выделилась пли уже потеряла способность участвовать в оплодотворении. Очень важно иметь конкретные сведения о сроках жизни спермиев в половой сфере в зависимости от наличия и степени проявления течки и других феноменов стадии возбуждения. Этот вопрос недостаточно изучен. Известно, что наиболее неблагоприятные для жизни спермиев условия имеются во влагалище. Максимальная продолжительность жизни спермиев во влагалище кобыл равна 4-4,5 ч, во влагалище овец и коров -- 1-6 ч. Воспалительные процессы во влагалище снижают срок жизни спермиев в несколько раз. При вагините у коров спермин погибают в течение первого часа, у коз -- через 1 ч 45 мин.

Большинство исследователей выделяют шейку матки у самок с влагалищным осеменением как отдел полового аппарата, благоприятный для жизни спермиев. Спермии в шейке матки овцы могут жить до 48 ч, а коровы -- до 30 ч. Но при введении спермы в шейку матки после окончания охоты они погибают уже через 2-4 ч и не достигают вершины рогов матки.

У свиней и кобыл спермин живут в матке до 30-48 ч.

Билет № 25

1.Хранение замороженной спермы .

При замораживании спермы необходимо: строжайше соблюдать установленную технологию разбавления, охлаждения и замораживания спермы; непрерывно поддерживать низкую температуру (не выше 150°) в течение всего срока хранении спермы. Не допускать колебания температуры во время ее хранения. Для замораживания спермы используют специальное оборудование (аппараты, приборы и т. д.) и хранят в стационарных емкостях, находящихся в специальных хранилищах станций (филиалы), откуда сперма поступает в обслуживающие хозяйства. Для длительного хранения спермы в жидком азоте ее замораживают в форме: необлицованных гранул; облицованных гранул; полипропиленовых соломинок (пайет); ампул.

При всех методах замораживания для разбавления в средах минимальные показатели по концентрации и подвижности нативной спермы должны быть: у быка не ниже 0,7 млрд в 1 мл и 8 баллов, у жеребца 0,15 млрд в 1 млн и 6 баллов. После замораживания для дальнейшего хранения допускается сперма быка с подвижностью 4 балла, жеребца — 3 балла, барана — 4 балла, хряка — 4 балла.
2.Оценка качества спермы. Резистентность.

Оценка спермы по интенсивности дыхания

На предметное стекло глазной пипеткой нанести по одной капле краски и спермы и быстро смешать их стеклянной палочкой. Смесь набрать в стеклянную трубочку, чтобы столбик ее был длиной около 2 см. Трубку положить на лист белой бумаги и наблюдать за обесцвечиванием синьки. Обычно она обесцвечивается в середине столбика. На концах столбика могут оставаться голубые кольца, т.к. с концов смесь постоянно обогащается кислородом воздуха.

Для оценки качества спермы жеребца и хряка этот метод не используется, поскольку обесцвечивание смеси метиленовой синьки со спермой затягивается до 60 минут

Оценка спермы по внешним признакам

При наблюдении под микроскопом за двигающимися и вращающимися вокруг продольной оси спермиями можно видеть, что головка представляет собой вогнуто-выпуклую пластинку овальной формы и несколько суженную со стороны шейки.

Короткой и тонкой шейкой головка прикреплена к телу спермия; длина его вдвое больше, чем головка. Внутри шейки, тела и хвоста спермия проходит осевая нить, состоящая из 2 центральных фибрилл и окружающих их 9 тонких фибрилл. В теле спермия параллельно тонким фибриллам расположено наружное кольцо из 9 грубых фибрилл. В хвосте грубые фибриллы отсутствуют. Конец хвоста свободен от оболочки.

Определение резистентности спермиев

Резистентность -это устойчивость спермы при разбавлении ее 1% раствором хлористого натрия.

Методика определения резистентности состоит в отыскании степени разбавления спермы 1% раствором хлористого натра, убивающим спермиев, обладая растворяющим действием на липопротеиновый покров. Чем менее устойчивы спермии, тем более сильное действие оказывает на них этот раствор (особенно ионы хлора), вызывая набухание и разрушение липопротеинового покрова. Спермии, лишенные этого покрова, теряют подвижность и погибают.
Работу проводят при температуре 18-220С.

Во флакон № 1 микропипеткой вносят 0,02 мл испытуемой спермы и малыми порциями добавляют 10 мл 1%-ного раствора хлористого натрия, перемешивая смесь круговыми движениями флакона. Остатки спермы из канала микропипетки смывают во флакон. Стеклянной палочкой каплю смеси наносят на предметное стекло и исследуют на активность спермиев под малым увеличением микроскопа без покровного стекла.

Если спермии неподвижны, то резистентность менее 500 (10 мл : 0,02 мл = 500).

При наличии спермиев с поступательным движением 0,5 мл смеси из флакона №1 переносят во флакон № 2 и доливают 0,5 мл 1%-ного раствора хлористого натрия. Каплю исследуют на
активность спермиев. Если спермии мертвые, резистентность не более 1000.

Если спермии двигаются поступательно, во флакон № 2 наливают еще 1 мл раствора хлористого натрия. При добавлении каждой новой порции раствора резистентность увеличивается на 1000. Добавление раствора проводят до тех пор, пока не прекратится поступательное движение спермиев.

Считается пригодной для осеменения животных сперма быка и барана с резистентностью спермиев не менее 10-40 тысяч.