Энтеробактерии
 Скачать 109 Kb.
|
|
Энтеробактерии. Семейство: Enterobacteriacae, родов более 30, наиболее значимые: Escherichia, salmonella, shigella, klebsiela, proteus, lersinia – представители этих родов вызывают самостоятельные заболевания (сальмонеллез, шигелез, клебсиелез, мнее значимые рода вызывают как кишечную инфекцию, так и вне кишечную инфекцию. Медицинское значение энтеробактерий: Возбудители общих кишечных заболеваний (диарейного синдрома) Возбудители внекишечных заболеваний (гнойно-воспалительные, бактериэмии, менингиты, поражение урогенитального тракте, осложнения послеродовые) Показатели фекального загрязнения (санитарно-показательные микроорганизмы), показатель коли-титра – минимальный объем вещества в котором содержится определенное количество бактерии семейства энтеробактерии. Количества видов огромно, только в роде сальмонелла более 2500. Общие свойства семейства: Все палочки Неспорообразующие Средних размеров Г- В мазке находятся хаотично Факультативные анаэробы Легко культивируются на простых питательных средах Капсулу не имеют Оксидаза - Ферментация глюкозу «+» Переводят нитраты в нитриты Место обитания – кишечник человека, животного, птиц, насекомых, земноводных Выделяются в фекалиями В организм попадают через рот водным путем, пищей или контактно-бытовым путем. Дифференциация родов внутри семейства проводится по набору биохимических тестов и антигенным свойствам и другое:
Вообще эта галерея может включать до 30-40 тестов. Изучается с помощью индикаторных бумажек или диагностических тест систем. Антигенные свойства изучаются с помощью антигенных сывороток. Наиболее важными тестами является: определение подвижности, капсулообразование, тест на сероводород, глюкозу, индол, образование газа, усвоение цитрата натрия, малоната натрия, отношение к мочевине, наличие реакции метилрот, лизина, орнитина, декарбоксилазная активность, разжижение желатины. Род Escherichia Внутри рода эшерихия 7 видов: Coli, helmani, pulntris, fergusoni, blatae. Общие свойства: такие же как у всех энетробактерий, дополнительно: подвижность +, лактоза +, глюкоза + индол +, газ + сероводород – реакция метилрот + цитрат натрия – Ф/П – Питательные среды для изучения, выделении и дифференциации: среды с лактозой, глюкозой, полиуглеводные с добавлением соли – среда Эндо, Клиглера (агар, лактоза, глюкоза, железо лимоннокислое, тиосульфат натрия, индикатор – феноловый красный в кислой среде желтый), Альгиницкого. На этих средах изучают лактозный признак, отношение к глюкозе, тест на сероводород, выделение газа. На среде Эндо эшерихии растут разным цветом (синим, красным). На среде Клиглера – желтеет (лактоза +), и железо не дает черный цвет у основания (сероводород -). Антигенные свойства разнообразны: внутри вида различают более 170 О-антигены, они являются групповыми, Н-антиген типоспецифический его вариантов 57, К-антигенов около 90. поэтому внутри вида E. Coli можно выделить большое количество сероваров. При лабораторной диагностике надо не только опрелить не только вид но и серовар. Установление Н-антигена проводится в реакции аглютинации, О-антиген с живими культурами. Факторы патогенности: Фактор адгезии и колонизации: фимбрии, ворсинки, белок наружной мембраны интимин. За счет этих факторов происходит прикрепление к клеткам и их колонизация. Эти факторы кодируются плазмидными генами. Изучают эти факторы с помощью способности адгезироваться на клеточных культурах ткани. Факторы инвазии: с момощью них проникают внутрь клетки, размножаются и вызываю гибель. Эти факторы белки наружной мембраны, кодируются плазмидными генами. Продукция экзотоксинов: энтеротоксин – обеспечивает избирательное действие на слизистую кишечника, стимулируют гиперсекрецию клетками жидкости, выход солей, с этим связано нарушение водно-солевого баланса. Другие токсины способны разрушить клетки эндотелия, капилляров и клетки слизистой кишечника, вызывают сыпь, диарею. Кодируется генами умеренного фага. Продукция эндотоксинов: по химической природе липополисахарид клеточной стенки. Вызывает эндотоксический шок, оказывает действие при разрушении клетки Coli антибиотиками, макрофагами. С этими токсинами связывают повышение температуры. Многие факторы патогенности кодируется плазмидами – Col-плазмида, F – плазмида, R-плазмидами. E. Coli входят в состав нормальной микрофлоры, но в них может проникнуть плазмида и они становятся возбудителями. В зависимости от превалирования какого-то конкретного фактора E. Coli может быть: Энтеротоксигенные (ЕТЕС) – главный фактор патогенности продукция токиснов, включают серогруппы О6, О8… заболевание сопровождается нарушением водно-солевого обмена и вызывают холероподобные заболевания, локализация тонкий кишечник, болеют дети и взрослые. Энтероинвазивные (ЕIЕС) О124, 44. локализуется в толстом кишечнике, передается пищевым путем, напоминает дизентерию, болеют дети и взрослые Энтеропатогенные (адгезии) (ЕРЕС) О55, 111 поражает только детей первого года жизни. Адгезируются на ворсинках и нарушают функцию всасывания. Локализуются в толстом кишечнике, путь заражения пищевой, молочные смеси. Энтерогемморагические (EHEC) О157, 145. Вызывают эшерихиозы с гемолитическим синдромом из за токсина действующего на кишечник и эпителий почечных клубочков. Источник заражения КРС, МРС, путь заражения пищевой. Вспышки связаны с употреблением фарша, молочных продуктов, болеют дети и взрослые. Характерно тяжелое течение. Лабораторная диагностика: бактериологический – посев материала (фекалии, толстый и тонкий кишечник) с целью выделения чистой культуры на среду Эндо → изучение лактоза+ колоний (красный) на второй день, она аглютинируется с поливалентными сыворотками (О111, 155) → колония дающая положительную реакцию на стекле отвивается на среду Клиглера и биохимическую галерею для родовой идентификации → изучают морфологию, биохимию до рода, вида, серовара. Иммунитет после перенесенного заболевания ненапряженный, видо специфичен имеет значение местный иммунитет, плазматические клетки кишечника продуцируют IgA, которые содержатся в слизи. Защитное значение имеет флора и биоценоз кишечника. Лечение: антибиотики, препараты из микробов антагонистов Профилактика: специфическая неразработана Внекишечные эшерихиозы. Не через рот, фекально-оральный механизм не работает. Пути операционные раны, травмы, бактериэмия попадают бактерии через инструменты, грязные руки, предметы обихода. Могут носить госпитальный характер. Клинически проявляются разнообразно в зависимости от локализации (гнойные воспаления, гемморагический синдром). Диагностика: см. выше. Автогенные серовары О1, О2, О4, О75 (уропатагенные) О1, О2, О18, О25 (бактериэмия) О6, О7 (менингиты). Распространение вызвано нарушением санитарно-гигиенического режима. Род Salmonella. Открыт в 1885 году Сальмоном возбудитель – сальмонеллеза. В 1880 Эбер открыл возбудителя брюшного тифа. 1885 Шотмюллер – паратифа. В роду сальмонелл выделяется более 2500 сероваров. Современная классификация сальмонелл: S. Enterica 6 подвидов, поражают человека и теплокровных S. Bongori поражают холоднокровных Внутри каждого подвида отделяют О-подгруппы (50 групп), которые обозначены латинскими буквами и цифрами. Типоспецифический Н-антиген, по нему устанавливают серовар (1367). Серовары называются: энтеритидис, сурис, инфантика. Названия могут быть географические, по клиническим проявлениям. Современная классификация предложена Кауфманом-Уайтом.
Медицинское значение сальмонелл. S. paratyphi A, В, С – возбудители брюшного тифа и паратифов. S. typhi – исключительно патогенна только для человека, А, В, С – патогенная и для человека и для животных. Остальные сальмонеллы вызывают заболевания домашних животных, птицы, грызунов, кошек. Свои названия сальмонеллы получают либо географически, либо по симптомам, а также от животных у которых встречается (S. Typhimurium – мышиный тиф). Все другие сальмонеллы выступают как возбудители токсикоинфекций или госпитальных сальмонеллезов. Сальмонеллы высоко патогенны для животных и представляют большую ветеринарную проблему. Общая характеристика сальмонелл. Палочки, Г -, мелкие, подвижные, спор не продуцируют, капсулы не имеют. Метаболизм в большей степени бродильный, ферментирует в анаэробных условиях углеводы. Растут при температуре +8 - +40 градусов, оптимальная температура +5. Растут на простых питательных средах, для их дифференцировки используют среды с углеводами: Эндо, Клиглера, Алькиницкого, элективные среды ЖБ, Раппопрт, висмут сульфид агар (колонии черного цвета в следствии продукции Н2S). В биохимическом отношении высоко активны, биохимическая галерея используется для родовой идентификации и подвидовой идентифткации. Для рода: Глюкоза + Газ -/+ Лактоза – Цитрат симонсона + Индол – Уреаза – Сероводород + Лизиндекарбоксилазная активность + Подвижность + Факторы патогенности связаны с островками патогенности (SPI) – генами в хромосомах и плазмидными генами. SPI 1 – факторы инвазии контролируют проникновение сальмонелл в эпителиальную клетку, апоптоз SPI 2- контролируют выживание сальмонелл внутри макрофагов, в связи с белками клеточной стенки. SPI 3 – обеспечивают продукцию эндотоксинов, цитотоксинов Плазмидные гены: устойчивость сальмонелл к бактерицидному свойству крови. В общем есть факторы адгезии, колонизации – пили (на пейеровых бляшках, эпителии кишечника), факторы инвазии – обеспечивают внутриклеточный паразитизм, факторы продукции токсинов, факторы устойчивости. Экология сальмонелл. Естественный резервуар организм животных, птиц. Человек только для S. typhi, S. parathyphi B. В окружающую среду попадают с калом, мочой и длительно сохраняются в окружающей среде. В водоемах, как в люду, так и в обычной воде около 4-6 месяцев, в морской воде до 1 месяца, в почве 9 месяцев, пыль в комнатах до 1,5 лет, в пищеых продуктах до 4 месяцев, в замороженном мясе более 1 года, в яйцах, яичном порошке 13 месяцев, на овощах до 2 месяцев, на бумаге до 1 года. Сальмонеллами поражены до 20% домашних животных, гуси и утки 50%, кошки 10%, грызуны 40%. Сальмонеллы чувствительны к высокой температуре, кипячению, дезинфектантам. Эта устойчивость делает среду обитания накопителем. Основной путь передачи – пищевой (продукты животного происхождения). Затем водный (питьевая вода, хозяйственная вода. И контактно-бытовой. Госпитальные сальмонеллезы могут передаваться воздушно-капельным путем и медицинские инструменты. S. thyphi (палочка Эберта, брюшной тиф). Возбудитель брюшного тифа. Патогенез.
Лабораторная диагностика. Инкубационный период: не производится. Первая неделя: посев крови на гемокультуру Вторая (3,4,5) неделя: исследование кала на копрокультуру, мочи на уринокультуру Шестая неделя: кал, моча + желчь Перед выпиской: желчь Питательные среды: кровь: желчный бульон, Рапопорт кал, моча: Эндо-Левина Этапы: посев отбор лактозо + колонии пересев на среду Клиглера, биохимическую галерею дифференцировка по антигенной культуре: реакция агглютинации с О и Н сыворотками Серологический метод: исследование сыворотки крови для определения антител. Используют не ранее 2-й недели. Реакции агглютинации с диагностикумами О, Н, Vi. Вначале появляются О-антитела 1:100, 1:200, затем после 2-й недели титр не повышается, но появляется Н-антиген и их титр нарастает 1:400, 1:800 – это показатель свежего заболевания. Vi – антитела имеют значение для диагностики бактерионосительства. Для формирования носительства имеет значение состояние желчного пузыря, состояние иммунитета, гельминтозы, особенно печеночные. Диагностика хронического брюшнотифозного носительства. Для диагностики берут переболевших, работников эпид важных объектов (в пищевой промышленности, детских учреждениях, медицинских учреждениях). Прежде всего исследуют кал, мочу для выделения чистой культуры, обязательно исследование желчи. Делают многократно 3-5 раз после приема слабительного. Так же используют исследование сыворотки крови для обнаружения Vi-антител в реакции непрямой агглютинации (Ви-эритроцитарным брюшным диагностикумом), носитель если 1:40. Иммунитет. После перенесенного заболевания стойкий пожизненный иммунитет. Заболевание тяжелое дает летальные исходы. Осложнения кровотечения, перфорация, инфекционный миокардит. Брюшной тиф не путать с сыпным тифом (возбудитель рикеции), возвратным тифом (возбудитель спирохета) Профилактика. Не специфическая: контроль за водоснабжением, продуктами, выявление носителей, выявление больных, дезинфекция, соблюдение сан-эпид режима. Специфическая: вакцинация по эпид показаниям в определенных регионах – спиртовая брюшнотифозная вакцина (только для взрослых), брюшнотифозная вакцина обогощенная Vi-антигеном, химическая вакцина содержащая один Vi-антиген (можно детям с 3-х лет), брюшнотифозный бактериофаг – жидкий или таблетированный, рекомендуется контактным, используется для профилактики. Сальмонеллезы. Заболевания вызываемые разными сальмонеллами: Пищевые токсикоинфекции: гастро-энтериты Генерализованная форма с бактериэмией, сепсисом по тифоподобному варианту Госпитальные сальмонеллезы Пищевая токсико-инфекция. Заболевание связанное с употреблением пищевых продуктов в которых находятся живые микроорганизмы и их токсины. Причем они там могут размножаться и накапливаться (тушенка, колбасы, мясо). Вызываются: сальмонеллами, эшерихиями, протеями, клебсиелами, энтеробактериями и другими представителями семейства энтеробактерий. Псевдомонадами, бациллами, клостридиями, вибрионами. ПТЭ носят эпидимический характер или групповых поражений, имеют очень короткий инфекционный период, выраженные симптомы со стороны ЖКТ, интоксикацию. Принципы лабораторной диагностики: исследование пищи и выделений больного для обнаружения возбудителя – посевы. Профилактика: ветеринарный контроль пищи, термическая обработка пищи Пищевые интоксикации. Группа заболеваний связанная с употреблением пищи содержащей микробные токсины (сами микробы уже погибли). Возбудители: золотистый стафилококк, грибы, клостридии ботулина. Принципы лабораторной диагностики: обнаружение в пище или выделениях больного токсин методом биологической пробы, иммуноферментного анализа. Род Shigella. Название в честь японского ученого Шига, который описал в 1898 году, возбудитель открыт в 1888 году Шентемесом. В чистой культуре выделил Григорьев в 1891 году. Серовар 1 Sh. Disenteria – палочка Григорьева-Шига, серовар 2 – палочка Лард – Сакса, 3 – Штурца – Шмитца.
Лактоза - (искл. Sh. Sonnei ч/з 48 часов) Глюкоза + Газ - (искл. внутри вида Sh. Flexneri серовар №6 – палочка Ньюкастль) Сероводород - Индол - Уреаза - Ф/А - Цитрат натрия - Молонат натрия - Общие свойства рода. Присущи все свойства энтеробактерий. Дополнительные свойства: палочки, Г-, неспорообразующие, маленькие, жгутиков нет, подвижности нет, растут на простых средах, факультативные анаэробы, в биохимическом отношении не активны. Резистентнтность довольно значительна: на бумаге 30-36 дней, в сухих испражнениях 4-5 месяцев, в ночве 3-4 месяца, в воде до 3 месяцев, на овощах до 2 недель, молочные продукты до 2 недели. Погибают при температуре 600 ч/з 15 -20 минут, при 1000 мгновенно. Чувствительны к дезинфектантам. Абсолютные патогенны для человека. Механизм заражения фекально-оральный. Источник только люди которые выделяют их только с фекалиями и попадают в новый организм ч/з рот водным, пищевым и контактно-бытовым путем. Факторы патогенности. Факторы адгезии и колонизации: пили, ворсинки, белки клеточной стеник, которые способны разрушить слизь, муцин слизи. Ферменты: муциназы, нейроамидазы. Факторы инвазии: проникают внутрь эпителиоцитов, макровфагов и размножаются там. Клетка погибает, наступает ее апоптоз. Факторы инвазии кодируются генами плазмид. Факторы эндо- и экзотоксиноза: Экзотоксины продуцируют только палочка Шига, остальные эндотоксины. Палочка Шига вызывает тяжелую дизентерию с кровавым поносом. Экзотокисн сходен с гемотоксином эшерихий, сальмонелл. Ген отвечающий за токсинообразованиее входит в состав умеренного фага → передается из клетки в клетку. Эндотоксины – липополисахаридные комплексы оказывающие пирогенное действие, общетоксическое действие. Эндотокссинообразование кодируется плазмидными генами. В зависимости от эндотоксинообразования шигеллы зоне дают колонию двух типов 1 (с геном) и 2 (без гена). Возбудители дизентерии. Основные возбудители в настоящее время Sh. Flexneri и Sh. Sonnei, остальные встречаются редко. Особенности патогенеза: источник больной человек (особенно опасены легкие формы), бактерионоситель. Пути передачи: водный, пищевой, контактно бытовой Входные ворота: рот Инкубационный период: от 1 до 5 дней это необходимо что бы прошел слой слизи, гликокаликса и адсорбироваться на слизистой оболочке дистального отдела кишечника ( особенно в сигмовидной и прямой кишке) там идет стадия адгезии и колонизации → проникновение эпителиоцитов → размножение. Клинические симптомы: воспаление, эрозии, язвы на слизистых оболочках кишки. Болезненные, спастические сокращения кишечника, болезненные позывы на стул (тенезмы), стул маленького объема (ректальный плевок), много слизи и прожилки крови. Явления общей интоксикации. Иммунитет: не стойкий, не продолжительный, не напряженный, типо- и видоспецифический. Защитное значение имеет местный иммунитет связанный с образованием в кишечнике IgA – копроантитела. Гуморальный характер иммунитета большого защитного значения не имеют. Лабораторная диагностика: только бактериологический. Материал: фекалии, слизь из прямой кишки в количестве 1 г. Посев делают быстро, лучше у постели больного т.к. во внешней среде гибнет. При заборе надо исключить контакта фекалий с дезинфектантами. В качестве консерванта: физ.рр + глицерин 3:1. Можно сразу сеять в среды обогащения (соляные среды). Посев делают на среды Эндо, Леви, Плоскирева (содержит соли желчных кислот и задерживается рост эшерихий). Растут лактозонегативными колониями. Колонии отвивают на среду Клиглера с последующий идентификацией. Виды определяют с помощью аглютинирующих сывороток. Все это идет 5 дней. Серологический: исследование сыворотки больного в реакции пассивной гемагглютинации, ко-аглютинации, РИФ. Аллергический: проба с дизентерином внутрикожная для определения инфекционной аллергии в предплечье ч/з 48 часов измеряют размер папулы (типичая реакция ГЗТ отвечают за нее лимфоциты) при положительном результате 10 мм. Профилактика. Неспецифическая: выявление больших, правильное содержание общественных и личных туалетов, мытье овощей и фруктов. Защита водоемов, хлорирование, кипячение воды. Специфическая профилактика отсутствует. Дизентерийные бактериофаги для профилактики контактных. Род Yersinia Виды: Y. pestis (чума), Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica, Y. intermtdia (ирсиниозы кишечные). Общая характеристика: палочки, Г-, нет спор, овоидной формы (бочоночки), биполярно красящиеся, неподвижные (pestis), подвижные (Y. pseudotuberculosis, Y. Enterocolitica), хорошо растут на простых средах, способны размножаться в почве, воде и накапливаться на окружающих растениях, психрофилы – растут при температуре от -2 до +40, оптимум +24, размножаются в холодильнике. Лактозо-негативные. Биохимические свойства: Лактоза - Глюкоза + Газ - Сероводород - Цитрат натрия - Мочевина + Индол - Подвижность +/- Экология: живут в организме грызунов, мышей, крыс, зайцев выделяются от грызунов с фекалиями, трупным материалом, мочой и загрязняют воду, почву и длительно там хранятся. Человек заражается алиментарным путем (поедая продукты питания). Течение заболевания: протекает как гастроэнтерит, часто поражаются мезентеральные лимфатические узлы, может вызвать аппендицит. Иногда развиваются генерализованные варианты → бактериемия, скарлатиноподобная сыпь, боли в суставах. Заболевание может принять длительное течение. Лабораторная диагностика: Бактериологический: посев материала (фекалии, пищевые продукты, кровь, моча. Делают посев на среды Эндо, Левина. Плоскирева при 250. Лактозонегативные колонии идентифицируют по б/х свойствам и антигенам. Серологический метод: сыворотка больного исследуется на специфические антитела в реакции непрямой гемагглютинации для этого добавляют эритроцитарный иерсиниозный диагностикум на Y. pseudotuberculosis, Y. Enterocolitica в разведении 1:800. Профилактика: специфическая отсутствует. |