СРС. СРС1. Клебсиеллы. Род Klebsiella включает 4 вида, первый из которых К. pneumoniae состоит из трех подвидов К. subsp pneumoniae, К. ozaenae и К. rhinoscleromatis. Морфология

• Название: Клебсиеллы. Род Klebsiella включает 4 вида, первый из которых К. pneumoniae состоит из трех подвидов К. subsp pneumoniae, К. ozaenae и К. rhinoscleromatis. Морфология
• Дата: 24.05.2020
• Размер: 23.35 Kb.
• Имя файла: СРС1.docx
• Тип: Документы; #125061

Диагностика заболеваний, вызванных условно-патогенными организмами (Klebsiella, Proteus, Pseudomonas).

КЛЕБСИЕЛЛЫ.Род Klebsiella вклю­чает 4 вида, первый из которых К. pneumoniae состоит из трех подвидов: К. subsp. pneumoniae, К. ozaenae и К. rhinoscleromatis.

Морфология.Короткие тол­стые палочки, в препаратах распола­гаются поодиночке, парами и короткими цепочками. Неподвиж­ны, спор не образуют. Характерным признаком клебсиелл явля­ется наличие выраженной капсулы. Не требовательны к пит средам. На плотных средах – блестящие куполообразные слизистые колонии, в жидких средах – интенсивное по­мутнение.

АГ.О-АГ (ЛПС) и 82 К-АГ (ПС), на их основе проводится серотипирование. Некоторые О- и К-АГ клебсиелл являются общими с эшерихиями и сальмонеллКультивирование. Клебсиеллы являются факультативными анаэробами, хемоорганотрофы, обладающие и дыхательным и бродильным типами метаболизма. Оптималь­ная температура роста 36-37° С, рН 7,2. Хорошо растут на всех широко используемых в лабораторной практике питательных средах.

Исследуемый материал (за исключением содержимого толстого отдела кишечника и фекалий) высевают в пробирки с МПБ, на МПА, дифференци­ально-диагностические среды Эндо и Плоскирева.

Соскоб с пораженного участка слизистой оболочки тонкого отдела кишечника (примерно 0,5 г) суспендируют в 10 см³ стерильного физиоло­гического раствора, выдерживают для осаждения крупных частиц 10-15 мин при комнатной температуре и надосадочную жидкость высевают на среды Эндо и Плоскирева. Аналогичным образом производится посев фекалий. Посевы инкубируют при 37° С в течение 18-24 часов. По истечении указанного срока пробирки и чашки Петри с посевами просматривают, отбирают характерные для клебсиелл колонии, готовят из них мазки, кото­рые окрашивают по Граму и по Гинсу (для выявления капсул).

При отсутствии роста на плотных питательных средах, но наличии его в МПБ и при обнаружении в нем небольших грамотрицательных палочек осу­ществляют пересев культур из МПБ на плотные питательные среды. Пере­севы инкубируют при указанных выше условиях.

Характерные для клебсиелл колонии, состоящие из грамотрицатель­ных, образующих капсулу палочек, отбирают для дальнейших исследо­ваний

ами.

Вирулентность клебсиелл обусловлена капсулой, защищающей микроорганизмы от фагоцитоза, и действием эндотоксина. Клебсиеллы пневмонии продуцируют термостабильный энтеротоксин, действие которого проявляется в усилении выпота жидкости в просвет тонкой кишки.

Эпидемология.Обитают у чка и Ж! в кишечнике, на коже и слизистых. Широко распростра­нены. Благодаря капсуле устойчивы к факторам окр среды, длительно сохраняются в почве, в воде, на предметах. Чувствительны к растворам обычных дезинфектантов.

Патогенез.Являются возбудителями ЗОД (риносклерома, озена, пневмония), могут поражать слизистые век, мочеполовых органов, мозговой оболочки, суставов, способны вызывать сепсис, острые кишечные инфекции, гнойные послеродовые осложнения. У новорожденных → тяжелые пневмонии, кишечные инфекции, токсико-септические состояния. Вызывают внутрибольничные инфекции, часто микст–инфекции.

Клебсиеллы ОЗЕНЫвызывают хронические ЗОД. Воспаление сопровождается выделением вязкого секрета, со зловонным запахом.

Клебсиеллы РИНОСКЛЕРОМЫ вызывают хронические вос­палительные процессы слизистых ВДП с образованием инфильтратов, которые затем рубцуются.

Лабораторная диагностика– выделение чистой культуры, дифференциация (от других энтеробактерий) и идентификации вида, определении серовара. Серодиагностика проводится в РСК с А-АГ клебсиелл.

Профилактика и лечение.Вакцинопрофилактика не разработана. Для лечения применяют АБ. За послед­ние годы отмечается широкое распространение антибиотикорезистентных штаммов клебсиелл.

ПРОТЕИ.–род Proteus (3 вида, часто встречаются Р. vulgaris и Р. mirabilis).

Морфология.Палочки (встречаются кокковидные и нитевидные формы), спор и капсул не образуют, имеют перитрихиально расположенные жгутики.

Протеи хорошо растут на простых питательных средах. На агаровой среде дают «ползучий» рост (роящиеся Н-формы). Штаммы, не способные к роению, образуют крупные с ровными краями колонии (О-форма). Некоторые штаммы вызывают гемолиз эритроцитов в кровяных средах.

Ферментируют многие углеводы с образованием кис­лоты, разжижают желатину, продуцируют H₂S. Виды различают по способности продуцировать индол, расщеплять мальтозу, давать реакцию Фогеса–Проскауэра и др. Имеют уреазу и способны

АГ.Имеют 49 О- и 19 Н-АГ, очень многие из них перекрестно реагируют с другими энтеробактериями.

Патогенез. Относятся к условно-пат Б!!. Токсические свойства связаны с ЛПС, которые освобождаются после разрушения мк. При попадании ↑ доз протея в ЖКТ возникает пищевая токсикоинфекция (проявляется в виде острого гастроэнтерита).

Р. mirabilis чаще, чем Р. vulgaris, вызывают гнойно-воспа­лительные заболевания (особенно МПТ), это м.б. следствием заражения, а порою раз­виваются как аутоинфекции при иммунодефицитных состояниях. Особенно опасны заражения новорожденных: попадание про­теев в пупочную ранку → бактериемия или менингит.

Эпидемология.Обитателями в кишечнике чка и Ж!! В окружающей среде более устойчивы, чем эшерихии, способны сохранять жизнедеятельность в слабых растворах фенола и других дезин­фектантов. В природе распространены широко, участвуют гниении.

Лабораторная диагностика.Бактериологическим методом. Выделенные чистые культуры идентифицируют по культуральным и БХ свойствам. Этиологическая роль устанавливает­ся так же, как и всех других условно-патогенных микроорга­низмов.

Профилактика и лечение.Профилактика. Лечение используют АБ и бактериофаг (местно или в полость поражения) после проверки чувствительности к фагу выделенного возбудителя. В случаях смешанных инфекций, вызванных эшерихиями и протеем, приме­няют коли–протейный бактериофаг.

ПСЕВДОМОНАДЫ

Семейство Pseudomonadaceae включает 4 рода: Pseudomonas – облигатно патогенные для чело­века: Р. mallei (сап), Р. pseudomallei (мелиоидоза) и большая группа условно-пат (Р. aeruginosa).

Микроорганизмы рода Pseudomonas — грамотрицательные палочки размерами 0,5—1,ОХ 1,5—4,0 мкм, не образующие спор, капсул. Многие виды подвижны, имеют один или несколько по­лярно расположенных жгутиков.

Различа­ют виды внутри рода Pseudomonas по подвижности, пигменто-образованию, БХ активности.

к условно-патогенным микроорганизмам. В настоящее время частота возникновения воспалительных процессов, в этиологии которых зарегистрирована синегнойная палочка, значительно возросла.

Морфология.Гр– подвижная палочка (имеет 1-2 полярных жгутика). Оюлигатный аэроб, к питательным средам не требовательны. На плотных средах дает круглые слизистые колонии (капсулоподобной слизи), в жидких – равномер­ную муть. Культуры издают запах, напоминающий аромат жас­мина.

Сахаролитческая активность не выреженна, но ферментируют глюкозу. Протеолитическая активность ↑: разжижают желатин, свернутую сыворотку, гидролизуют казеин. На кровяных средах – ГЕМОЛИЗ. Есть ОКСИДАЗА. Продуцируют 2 ПИГМЕНТА – зеленого флюоресцеина ипиоциазина (неко­торые культуры ещё икорич­нево-красный пиорубин,красный эритроген, черный меланоген, а некоторые –лишены пигмента).

Питательные среды для культивирования и идентификации псевдомонад

⇐ ПредыдущаяСтр 15 из 29Следующая ⇒


Среда Кинга А. Пептон — 20,0 г, глицерин — 10,0 г, калий серно­кислый — 10,0 г, магний хлористый — 1,4 г, агар — 20,0 г, вода дис­тиллированная — до 1000,0 мл.

Среда Кинга В. Пептон — 20,0 г, глицерин - 10,0 г, калий фосфор­нокислый двузамещенный — 1,5 г, магний сернокислый — 1,5 г,агар — 15,0 г, вода дистиллированная — до 1000,0 мл (рН 7,2).

Среда Мак-Конки. Пептон — 20,0 г, лактоза — 10,0 г, натрий хло­ристый — 5,0 г, таурохолат натрия — 5,0 г, нейтральный красный — 0,03 г, агар — 20,0 г, вода дистиллированная — до 1000,0 мл (рН 7,4).

Среда Хью-Лейвсена. Пептон — 2,0 г, агар - 3,0 г, натрий хлорис­тый — 5,0 г, калий фосфорнокислый двузамещенный — 0,3 г, 0,2 %-ный водный раствор бромтимолового голубого — 15,0 мл, глюкоза — 10,0 г, дистиллированная вода — до 1000,0 мл.

Цетримидный агар. Пептон — 20,0 г, агар —13,0 г, магний хлористый — 1,4 г, калий сернокислый — 10,0 г, цетримид (цетилтриметиламмония бромид) - 0,3 г, глицерин — 10,0 г, вода дистиллированная — до 1000,0 мл (рН 7,2).

Селективная среда (Мороз, Бекбергенов, Афиногенов). Пептон — 20,0 г, агар — 10,0 г, калий сернокислый — 7,0 г, магний хлористый — 15,0 г, магний сернокислый — 1,5 г, цетилпиридиния хлорид — 2,0 г, вода дистиллированная — до 1000,0 мл (рН 6,8-7,0).

Среда с ацетамидом. Агар — 15,0 г, натрий хлористый — 5,0 г, маг­ний сернокислый — 0,2 г, аммоний фосфорнокислый однозамещенный — 1,0 г, калий фосфорнокислый двузамещенный — 1,0 г, ацетамид — 20,0 г, вода дистиллированная — до 1000,0 мл (рН 6,7).

Среда Паллерони—Дудорова. Хлористый аммоний — 1,0 г, маг­ний сернокислый — 0,5 г, железо аммоний цитрат — 0,05 г, хлористый кальций — 0,005 г, 0,33 М Na-К фосфатный буфер (рН 6,8) — до 1000 мл. Первые два ингредиента добавляют к буферному раствору и автоклавируют при 115°С 30 минут. Железа аммонийцитрат и хлорис­тый кальций стерилизуют путем фильтрации и вносят в основной раст­вор асептически (перед засевом среды).

Картофельно-глицериновая среда. Вырезанные из очищенного кар­тофеля цилиндры диаметром 1 см и длиной 4-5 см разрезают по диаго­нали для получения клиньев. Клинья выдерживают 2 ч в 1%-ном раство­ре бикарбоната натрия, после чего подсушивают и в течение 2 суток выма­чивают в 5-6%-ной глицериновой воде или бульоне. Опускают основа­нием вниз в пробирки с 5%-ной глицериновой водой. Для того чтобы картофель не касался глицериновой воды, используют пробирки с пере­тяжкой в нижней части или в них опускают короткие стеклянные палоч­ки. Среду автоклавируют при 115-120°С 20 минут.

Пробирки со средой хранят в наклонном положении плоской по­верхностью картофеля вниз (с целью сохранения поверхности для по­сева влажной).

Вирулентность.Синегнойная палочка обладает О- и Н-АГ. АГ свойствами также обладают слизистое веще­ство, токсины, адгезин, фимбрий, экзоферменты. Созданы наборы диагностических сывороток, но антигенная общность с дру­гими псевдомонадами не позволяет надежно использовать их в практике.

Патогенность.Имеет фимбрии (адгезия); продуцирует ряд токсинов и ферментов:экзо­токсин А – основной, ведущий фактор патогенности, обладает цитотоксическим действием,гемолизины, лейкоцидин, ферменты –коагулаза, эластаза и др. Патогенность обусловлена также слизью капсулоподобного вещества, защищающей от фагоцитоза.

Эпидемология.Обитает в почве, воде, на растениях. Широко распространеналегко инфицирует человека. Выделяясь от больных, мкдлительное время сохраняются на предметах обихода, мед инструментах, особенно долго – в раневом отделяемом. Чувствительны к многим дезинфектантамиt°С. В больницах распространены эковары синегнойной палочки высокоустойчивые к АБ и антисептикам (могут контаминировать лекар­ственные препараты, оставаясь жизнеспособными в антисепти­ках, дезинфицирующих растворах).

Патогенез.Гнойно-воспалительные процессы в различных тканях и органах при инфицировании ран, мочевых путей и ожоговых поверхностей (особенно часто). Присутствует при смешанных инфекциях. Чаще возникает у детей, у людей пожилого воз­раста и у лиц со сниженным иммунным статусом. Один из главных возбудителей внутрибольничной инфекции.

ДиагностикаВыделение культу­ры из пат материалов и изучение ее биологических свойств. Основные дифференцирующие признаки: восстановление нитрита до газообразного азота, разжижение 15% желатины, окисление глюкозы. Внутривидовую дифференциацию проводят фагами, пиоцианами, устанавливают варианты по чувствительности к антибио­тикам и антисептикам.

Профилактика и лечение.Для специфической профилактики разработана ассоциированная вакцина, включающая АГ синегнойной палочки, протея, стафилококка. При ожогах местно можно применять пиоиммуноген.

В терапии используют АБ и гетерологичный Ig (местно), пиоиммуноген (при ожогах), иммунную плазму.