Пироплазмоз собак. Курсовая работа по патологической анатомии сельскохозяйственных животных на тему " Патанатомия пироплазмоза собак "
 Скачать 326 Kb.
|
|
МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ РФ МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ПРИКЛАДНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ Кафедра ветеринарно – санитарной экспертизы Курсовая работа по патологической анатомии сельскохозяйственных животных на тему: “Патанатомия пироплазмоза собак ”. Выполнила: студентка Вет-Сан ф-та 4-го курса 1 группы Корытина Татьяна МОСКВА 2006. Содержание: Историческая справка………………………………………………………………….3 Клинические симптомы………………………………………………………………..4 Патогенез………………………………………………………………………………......5 Диагностика……………………………………………………………………………….6 Гемоцитологический метод диагностики………………………………………7 Патологоанатомические изменения …………………………………………10 Гистологическая картина………………………………………………………..11 Проявление гемосидероза при различных течениях пироплазмоза……...16 Морфологические особенности сверхострого течения пироплазмоза…...17 Морфологические проявления пироплазмоза у новорожденных щенков собак…………………………………………………………………………………………19 Дифференциальная диагностика…………………………………………………..21 Список литературы…………………………………………………………………….22 ИСТОРИЧЕСКАЯ СПРАВКА. Пироплазмоз собак – протозойная неконтагиозная трансмиссивная болезнь, вызывающая инвазию и разрушение эритроцитов простейшим паразитом рода Piroplasma. Болезнь протекает остро, подостро, хронически. Проявляется заболевание повышенной температурой, анемией, гемоглобинурией, поражением ЦНС. Lounsbury (1902) стало известно от некоторых старых исследователей в провинции «Cape», что о билиарной лихорадке собак знали ещё в середине XIX века в Южной Африке. Он предполагал также, что заболевание собак, описанное Lady Anne Barnard в письме, датированном 29 ноября 1779 года, было не иначе как бабезиоз собак. В 1895 году Piana и Galli Walerio сообщили, что заболевание, известное как желчная лихорадка или злокачественная желтуха охотничьих собак в Ломбардии (Италия), было обусловлено кровопаразитом, которому они дали название: bigeminum (вариант canis). Этот паразит позднее был определён как Piroplasma canis, ещё позже - Babesia canis. Hutcheon (1896) считал заболевание самостоятельным, хотя первоначально болезнь рассматривалась как билиарная форма чумы собак. R.Koch в 1898 году наблюдал у собак в восточно-германской Африке (Dar-es-Salam) маляриеподобное заболевание и обнаружил при этом паразитов, более или менее сходных с паразитами малярии человека. В 1899 году Hutcheon описал подобное заболевание в Южной Африке (15). Spreul (1899), заразил восприимчивых собак небольшой дозой крови, взятой от больной собаки, таким образом он установил трансмиссивный путь заражения, а также то, что при внутривенном пути введение болезнь протекает гораздо тяжелее, чем при подкожном. Микроскопическое исследование проводил Purvis (Hutcheon, 1896) обнаруживший внутриэритроцитарных паразитов. Robertson (1901), подтвердил наблюдения Purvis и Spreul, констатируя, что внутриэритроцитарные паразиты наблюдались в каждом случае заболевания на четвёртый день после подкожного заражения, а кровь становится инвазированной на третий день. Lounsbury в 1901 году первым определил переносчика заболевания клеща Haemaphysalis leachi. Theiler (1904, 1905) изучая заболевание в Трансваале, в многочисленных опытах по иммунизации собак, установил наличие преиммуниции у переболевших бабезиозом собак. Nuttall и Graham-Smith (1909) считали, что B. canis не поражает лис (Canis vulpes) и шакалов (C. mesomelas) в Южной Африке, но Schoop и Dedie (1938), в серии опытов, заразили черно-бурых лис в Германии. Rau (1926) сообщил, что индийский шакал (С. aureus) восприимчив к паразиту и может служить ему природным резервуаром (26). Данные исследований природы, морфологии, жизненного цикла паразита впервые приведены в работах Nuttall (1904), Nuttall и Graham-Smith (1905, 1906, 1907, 1909). В 1908 году J.P.McIlvaine и E.F.McCampbell оставили подробное исследование в патогистологии: было описано экспериментальное заражение паразитами, выделенными от больных щенков, свиней, коровы, кролика, собаки, кошки, лошади, крысы; была разработана своя техника окраски мазков; описан возбудитель. В России возбудитель Babesia canis был обнаружен в 1909 году В.Л.Якимовым в Петербурге у собаки, привезённой с Северного Кавказа, и В.Л.Любинецким, наблюдавшим возбудителя в Киеве, затем было сообщение от А.И.Джунковского и К.К.Луса о возбудителе в Закавказье. Кроме них, пироплазмоз в России исследовали: И.П.Оболдуев (1910), Дубицкий (1921), Орлов в Сибири (1926), Фролов в Казани, Виноградов в Саратове, Якимов, Арбузов и Самарцев в Уральске (1928, 1929) Белицер и Мирков (1929) (13;15). Якимов (1926), в связи с открытием новых форм пироплазм, поместил Babesia canis в подрод Piroplasma на том основании, что паразит имеет размеры больше радиуса эритроцита. Заболевание широко распространено во всех регионах земного шара, но чаще в тропической зоне. В субтропиках и умеренном климате встречается реже. Переносчиком возбудителя является в Африке Haemaphysalis leachi, в Индии и Тунисе - Rhipicephalus sanguineus, во Франции – Dermacentor marginatus. В России переносчиком служит, по сообщениям Белицера и Маркова, клещ Dermacentor marginatus. Laveran и Nattan-Larrier (1913); Regendanz и Reichenow (1932); Reichenow (1935); Brump (1938), докладывали, что вирулентность B.canis проявляется значительными вариациями в разных ареалах распространения. Так, штамм из одной зоны может вызвать быстрое развитие клинических признаков и смерть у восприимчивой собаки, в то время как штамм из другой зоны вызывает только относительно слабую реакцию, хотя паразиты морфологически схожи. Laveran и Nattan-Larrier (1913), обнаружили, что собаки, иммунизированные французским штаммом, восприимчивы к североамериканскому. Исходя из этого, они заключали, что оба штамма могли быть рассмотрены как различные виды или варианты B.canis. Reichenow 1935, полагал, что морфологически схожие виды крупных собачьих пироплазм в реальности являются отдельными видами. Он предположил это на основе того, что один из природных штаммов B.canis, который переносится клещом Rhipicephalus sanguineus, не может переноситься клещом Dermacentor marginatus. В то же время штамм, который переноситься D.marginatus, не может переноситься Rh.sanguineus. Исследования в 1989 году G.Uilenberg , подтвердили различия и специфичность переносчика (с помощью методов перекрёстного иммунитета и непрямой иммунофлюоресценции) между штаммами крупных собачьих бабезий, которые передаются трансмиссивно клещами родов Dermacentor, Rhipicephalus, Haemaphysalis. А также исследователи предложили номенклатурные названия подвидам B.canis: B.canis canis (Piano and Galli-Valerio, 1895), B.canis vogeli (Reichenow, 1937), B.canis rossi (Nuttall, 1910) (60). Довольно часто в научной литературе можно встретить сведения о том, что бабезиоз сопровождается лептоспирозом и гепатитом. По данным P. Seneviratna (1965), из 132 обследованных им собак вторичные инфекции имели: 28 собак -паразитарное заболевание, обусловленное Ancylostoma caninum, 15 -подострые и хронические нефриты, 8 – филяриоз, 6 – лептоспироз, 15 собак - другие инфекции. Внутриэритроцитарный паразит размножается бинарным делением только в красных клетках крови. Инкубационный период природного штамма для B.canis составляет 10…21 дней. КЛИНИЧЕСКИЕ СИМПТОМЫ. В зависимости от течения заболевания продолжительность его варьирует от 3-7 дней (острое течение) до 3 месяцев (хроническое). Болезнь начинается с повышения температуры тела до 40-42˚С с последующим снижением до нормальной и субнормальной (35-36˚С), отмечается снижение аппетита или полный отказ от корма, быстрая утомляемость, вялость, животные становятся апатичными. В результате разрушения эритроцитов крови гемоглобин частично выделяется с мочой, отчего последняя приобретает красный цвет (гемоглобинурия), а частично перерабатывается в желчные пигменты (билирубин), что приводит к желтушной окраске слизистых и серозных оболочек, кожи, подкожной клетчатки и даже мышц. Усиливаются компенсаторные функции сердечно-сосудистой и дыхательной систем, которые постепенно ослабевают. Снижается газообмен, нарушается кислотно-щелочное равновесие. Наступает кислородное голодание и, как следствие, одышка, застойные явления, возможен отек легких. В результате увеличения порозности сосудов появляются отеки и кровоизлияния в различных органах и тканях. Снижается количество лейкоцитов, эритроцитов, гемоглобина. Отмечается анизоцитоз, пойкилоцитоз, полихроматофилия, базофильная зернистость в эритроцитах. Сами паразиты и продукты их жизнедеятельности вызывают серьезные нарушения функций различных органов и систем, последствия которых могут оставаться на всю жизнь: поражения печени и поджелудочной железы, дистрофия почек, миокардит и т.д. Кроме того, развивающиеся при этом вторичные иммунодефицитные состояния, обусловливают повышенную восприимчивость организма к бактериальным и вирусным инфекциям. Тяжелее всего болеют пожилые и старые собаки, у которых иммунная система уже не столь сильна. У таких собак отмечается возрастное снижение функций печени, селезенки и костного мозга, что усугубляет тяжесть протекания болезни. Ведь при пироплазмозе печень должна выводить из организма большое количество токсинов, которые образуются при поражении пироплазмой элементов крови. Селезенка и костный мозг должны работать очень интенсивно, чтобы восполнять потери эритроцитов, разрушаемых возбудителями болезни. Одним из симптомов пироплазмоза является гематурия - появление крови в моче. Другой признак - повышение температуры. Нужно отметить, что оба эти симптома являются кратковременными: около суток наблюдается повышение температуры, и столько же - проявление гематурии. Затем внешне все приходит в норму. Но начинает развиваться анемия, которая обусловлена потерей эритроцитов - переносчиков кислорода ко всем органам. При дальнейшем развитии болезни наблюдаются увеличение печени и селезенки, вызванные массированной интоксикацией. Но одним из наиболее неприятных проявлений пироплазмоза является гипоксия мозга, в результате чего развиваются тяжелые, а иногда - необратимые поражения центральной нервной системы. Довольно часто пироплазмоз сопровождается лептоспирозом и гепатитом, реже - другими инфекционными заболеваниями. Иммунная система организма, ослабленная в результате борьбы с пироплазмой, не может обеспечить надежную защиту от других инфекций. Следует оговориться, что это практически не относится к собакам, которые были вакцинированы от упомянутых болезней. Ситуация усугубляется еще и тем, что сезонные пики заболеваемости пироплазмозом, лептоспирозом и гепатитом практически совпадают. Поэтому если собака не была привита и заболела пироплазмозом, то она имеет высокий шанс получить дополнительно еще какую-нибудь инфекционную болезнь. Поэтому при проведении лабораторных анализов параллельно с тестами на наличие пироплазмы мы всегда проводим серологические исследования, чтобы выявить другие инфекции, и, к сожалению, нередко их находим. А ведь и пироплазмоз, и лептоспироз являются тяжелейшими заболеваниями, и даже одного из них вполне достаточно, чтобы потерять собаку. ПАТОГЕНЕЗ. P. canis и их токсины являются первыми патогенетическими факторами, оказывающими аллергическое воздействие на организм и вызывающими нарушение функций органов кроветворения и лизис эритроцитов у собак. В патогенезе заболевания решающее значение имеет разрушение эритроцитов, в которых происходит развитие паразитов. У 80% больных животных разрушение эритроцитов приводит к значительному уменьшению периферической крови, что и определяет низкий уровень гемоглобина. Количество эритроцитов в некоторых случаях уменьшается до 2.5 – 3.0*10¹²/л, а количество гемоглобина – до 35 - 40 г/л, что приводит к развитию анемии гемолитического типа. Освобождающийся гемоглобин остается растворенным в плазме крови и частично всасывается эритроцитами, которые становятся гиперхромными, а частично выделяется с мочой (гемоглобинурия – 57%), что является одним из характерных признаков болезни. Какая – то часть гемоглобина превращается клетками РЭС в билирубин и гемосидерин. Так, в 54.5% случаев усобак, больных пироплазмозом, отмечается повышение уровня билирубина (до 330 – 362 мкмоль/л), что приводит к возникновению гемолитической желтухи, принимающей впоследствии гемолитически – гепатогенный характер. Недостаток эритроцитов и гемоглобина вызывает нарушение функций всех органов. При этом накапливается много недоокисленных веществ, что отражается, в первую очередь, на сердечно – сосудистой системе. Происходит ослабление функций миокарда, а в дальнейшем расстройство кровообращения. В результате развивается учащение сердцебиения, застой в большом и малом кругах кровообращения, отек легких, нарушается газообмен, наблюдается гипоксемия, ацидоз. Токсины воздействуют и на нервную систему, что проявляется угнетением и повышением температуры. Если происходят необратимые изменения в ЦНС, то прогноз болезни неблагоприятный. Одновременно в организме происходят нарушения в желудочно-кишечном тракте, что проявляется усилением перистальтики, снижением аппетита (у 89% больных собак), рвотой(у 44%), ухудшением процессов переваривания и всасывания пищи. Постепенно развивается катаральное воспаление, ослабление перистальтики, метеоризм. В начале заболевания наблюдается понос (12%), а затем запор. Животные заметно худеют. Нарушения кровообращения и интоксикация организма приводят к нарушению функций почек (альбуминурия, олигурия, анурия). Как результат, уменьшение выделения токсических веществ из организма. Изменения в сосудах способствуют резкому увеличению их проницаемости, приводящей к отечности перикапиллярной ткани диапедезным геморрагиям, аноксемии, снижению способности обезвреживать токсические продукты. Позднее развиваются более тяжелые изменения, указывающие на тяжелую интоксикацию всего организма. При этом кровь приобретает водянистый вид, морфология эритроцитов изменяется, развивается анизоцитоз, пойкилоцитоз, полихроматия, появляются эритроциты с базофильной зернистостью. В острых случаях отмечают небольшой лейкоцитоз. При этом в первые дни наблюдается кратковременное преобладание эозинофилов, и в лейкоцитарной формуле отмечается сдвиг влево – до юных, которые затем уступают место нейтрофилам, а в дальнейшем регистрируют лимфоцитоз (в 50%). Лейкоцитопения выявляется у животных с хроническим течением заболевания, за счет снижения уровня нейтрофилов. Изменение биохимических процессов приводит к гиперплазии клеток РЭС, т. е. к увеличению объема печени, селезенки и лимфоузлов. Одновременно с этим повышается уровень общего белка за счет глобулиновых фракций, при одновременном снижении концентрации альбуминов. Процесс выздоровления при пироплазмозе собак длительный и при тяжелой форме нередко осложняется миокардитами, нефритами и гепатитами. Таким образом, в зависимости от вирулентности возбудителя, от степени восприимчивости и резистентности животного инвазия может протекать как тяжелый процесс с нарастающими явлениями сердечно – сосудистой недостаточности. В результате развивается отек легких и возможна смерть. ДИАГНОСТИКА. Диагностика пироплазмоза собак содержит в себе определенные трудности, связанные с наличием атипичных форм болезни и необходимости дифференцировки от других заболеваний собак. Морфологический метод диагностики пироплазмоза собак является наиболее точным и совершенным. Морфологический метод включает в себя:
Поставить диагноз на пироплазмоз собак можно лишь комплексно, используя: патологоанатомический + гемоцитологический методы; либо патологогистологический + гемоцитологический методы. Само по себе обнаружение паразитов без определенных морфологических изменений в органах и тканях собаки не может быть доказательством пироплазмоза, а лишь свидетельствует о наличии пироплазм в организме — о пироплазмоносительстве. 1. ГЕМОЦИТОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ 1.1. Кровь для и з г о т о в л е н и я м а з к а берут у взрослых собак из кровеносных сосудов уха, у щенков — из сосудов хвоста. Чтобы получить мазок хорошего качества, необходимо взять чистое, обезжиренное в спирт-эфире предметное стекло, нанести на него первую каплю крови, шлифованное стекло установить под углом 35-45° и, когда капля равномерно распределится вдоль его нижнего ребра, плавно размазать кровь по предметному стеклу.  Пироплазмы в мазках крови собаки: 1 – в эритроцитах; 2 – свободные в плазме; 3 – на лимфоцитах; 4 – в нейтрофилах. Патология крови: 5 – звездчатые эритроциты; 6 – лейкоциты в состоянии некробиоза. М а з к и - о т п е ч а т к и готовят в процессе вскрытия трупов животных, прижимая чистое обезжиренное стекло к поверхности свежего разреза органа. При подозрении на пироплазмоз собак делают мазки-отпечатки лимфоузлов, селезенки, печени, почек, миокарда и легких. Мазки крови и мазки-отпечатки органов высушивают и фиксируют в метиловом спирте 3-5 минут. 1.2. Окраска мазков и мазков - о т п е ч а т к о в п о Р о м ан о в с к о м у - Г и м з а производится краской, состоящей из азура П — 3,0 г, эозина В — 0,8; глицерина и метилового спирта — по 250,0 мл. Мазки крови (мазки-отпечатки) погружают в рабочий раствор (1 мл дистиллированной воды + 1-3 капли краски) на 20-40 минут, затем промывают под струей воды, сушат и проводят микроскопирование. 1.3. Для окраски м а з к о в и мазков - о тпе ч а т к о в п о Браше 20 мг очищенного в хлороформе метилового зеленого растворяют в 4 мл дистиллированной воды и 90 мг пиронина Ж- в 9 мл дистиллированной воды и к ним прибавляют 12 мл дистиллированной воды и 25 мл 0,1-нормалыюго ацетатного буфера с рН = 5,6; мазки помещают в эту краску на 3-5 минут, после чего промокают фильтровальной бумагой. 1.4. Микроскопическое исследование мазков крови и мазков-отпечатков внутренних органов проводят в иммерсионной системе микроскопа (об. х 90 или х 100). 1. P. canis — паразит, имеющий в мазках грушевидную, овальную, округлую или амебовидную форму, размер — от половины радиуса до диаметра эритроцита: округлые диаметром 2,0-4,2 мкм, грушевидные- величиной 3,1-5,3 х 1,9-3,1 мкм. Количество пораженных эритроцитов достигает 6-10%. В одном эритроците может располагаться 1,2,4,8,16,32 пироплазмы. Пироплазм обнаруживают в эритроцитах, свободнолежащими в плазме, в нейтрофилах, моноцитах, на поверхности лимфоцитов. Каким бы способом ни был окрашен мазок, пироплазмы не светятся насквозь. При вращении микровинта паразит «исчезает» и «появляется» вместе с эритроцитом (лейкоцитом), в который он заключен. 2. В мазках крови, окрашенных по Р о м а н о в с к о м у - Г и м з а, пироплазмы имеют дымчато-голубую цитоплазму, причем в центре более светлую, чем по периферии, и рубиново-красный хроматин, чаще всего располагающийся в виде двух небольших ядер. В эритроците вокруг пироплазмы непременно имеется зона просветления. Лейкоциты при пироплазмозе собак имеют размытые, окрашенные в бледно-синие тона ядра и нечеткие границы цитоплазмы, за исключением менее дистрофированных — лимфоцитов. В цитоплазме моноцитов находятся красно-фиолетовая зернистость и прозрачные вакуоли. Эритроциты бледно-розовые с белым прозрачным центром - гипохромные. Часто встречаются эритроциты с зубчатыми краями, с базофильной зернистостью, различного размера — в основном больше нормы. Нередкий случай — диффузная окраска мазка в розовый цвет — свидетельство лизиса эритроцитов. 3.Окраска мазков крови по Браше позволяет очень точно дифференцировать пироплазм от сходных структур, от «грязи», так как этим методом окрашиваются только нуклеиновые кислоты: ДНК - в сине-зеленый цвет, РНК — в розово-сиреневый. Пироплазмы чаще всего имеют розовую цитоплазму и сине-зеленый хроматин. Лейкоциты бедны нуклеиновыми кислотами: ядра их бледно-зеленые, цитоплазма светло-розовая или не окрашивается. Эритроциты приобретают фоновую желтовато-розовую окраску. Итак, для того, чтобы с помощью мазков крови подтвердить диагноз - пироплазмоз собак - необходимо обнаружить пироплазм и патологию крови: анизоцитоз, пойкилоцитоз,.гипохромазию эритроцитов, дистрофию лейкоцитов.  |