реферат. Спец.микробиология_Лр.№1. Лабораторная работа 1 Исследование сырого и пастеризованного молока на общую бактериальную обсемененность и присутствие бгкп
 Скачать 300.61 Kb.
|
|
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Волгоградский государственный технический университет» Кафедра «Технология пищевых производств» ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 1 «Исследование сырого и пастеризованного молока на общую бактериальную обсемененность и присутствие БГКП» Выполнил: студент группы ПП-352 ______________ РЕШЕТНИКОВА С.А. (подпись) Проверила: доцент кафедры ТПП _________ _________ ГРИГОРЯН Л. Ф. (дата) (подпись) Цель работы Изучение микробиологических требований, предъявляемых к молоку сырому, пастеризованному и влияния температуры хранения на качество сырья и молока питьевого. Аппаратура, материалы и реактивы весы лабораторные общего назначения; микроскоп; предметные стекла; набор красителей; спиртовки; стерильные ступки, пипетки; чашки Петри; песок; вода; воронка; тара стеклянная не более 1 дм3; чашка Петри; палочка стеклянная; флаконы с крышками или пробирки с пробками; молоко сырое и пастеризованное; вода дистиллированная; вата медицинская гигроскопическая; марля медицинская; бумага индикаторная; фильтр бумажный. Экспериментальная часть Задание 1. Изучить нормативные требования, предъявляемые к молоку сырому, пастеризованному. Методика выполнения: Пользуясь нормативным документом - «Технический регламент Таможенного союза "О безопасности молока и молочной продукции" (ТР ТС 033/2013)», изучить и занести в лабораторный отчет микробиологические требования, предъявляемые к молоку сырому, пастеризованному. Задание 2. Пользуясь ГОСТ 32901-2014, изучить методику посева молока на содержание КМАФАнМ (количество мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов) и провести оценку качества представленных образцов молока сырого согласно требований, предъявляемых по данному показателю. Сделать посев молока на КМАФАнМ и сравнить результаты исследований с нормативной документацией (ТР ТС 033/2013). Методика выполнения: Каждое разведение засевают в количестве 1 мл на 1 чашку Петри и заливают расплавленной и охлажденной до 40-45ºС средой. После заливки среду перемешивают покачиванием чашки и ставят в термостат на 72 часа при температуре 30ºС. Общее количество бактерий в 1 мл в единицах вычисляют по формуле:  ,где Х – количество образующих единиц (к.о.е.) см3, n – количество колоний, m – число десятикратных разведений. Результаты исследований отразить в таблице 2. Задание 3. Изучить методику посева на БГКП (ГОСТ 32901-2014) молока сырого и пастеризованного, нормативные показатели согласно «ТР ТС 033/2013». Сделать посев молока на БГКП и сравнить результаты исследований с нормативной документацией (ТР ТС 033/2013). Методика выполнения: Метод основан на способности БГКП сбраживать лактозу, в результате чего образуется кислота и газ, по наличию которого определяют коли-титр кишечной палочки. Если на среде Кесслер обнаружено газообразование, то делают пересев на среду Эндо. При обнаружении бесцветных колоний на среде Эндо посевы передают в СЭС. При определении БГКП пользуются термином коли-титр – это наименьшее количество продукта, в котором обнаруживается хотя бы 1 клетка кишечной палочки. Если газообразования нет коли-титр менее 3 мл. Если в пробирке с 1 мл обнаружено газообразование, то коли-титр 3 мл. Если брожение обнаружено боле чем в 1 пробирке с 1 мл продукта, или хотя бы в одной пробирке с 0,1 мл, то коли-титр составляет менее 0,3 мл. Если газообразование обнаружено во всех пробирках с 1мл или хотя бы в 2-х пробирках с 0,1 мл, то коли-титр 0,3 мл. Методика пересева проб на среду Эндо со среды Кесслер. Микробиологической петлей берут материал из пробирки или колбы со средой Кесслер и высевают на чашки Петри со стерилизованной средой Эндо штрихом. Перед посевом дно чашки Петри делят на сектора. Из каждой пробирки или колбы со средой Кесслер посев производят на отдельный сектор. Чашки Петри с посевами помещают крышками вниз в термостат с температурой 37°С на 18-24 часа. При отсутствии на среде Эндо колоний, типичных для бактерий группы кишечных палочек (красных, с металлическим блеском, розовых, бледно-розовых), продукт считают не загрязненным кишечной палочкой. При наличии на среде Эндо колоний, типичных для БГКП, их изучают дальше. Из изолированных колоний делают фиксированный препарат, окрашивают по Граму, микроскопируют. Результаты микроскопирования отразить в таблице 3. Пример расчетов: КМАФАнМ в сыром молоке:  КМАФАнМ в пастеризованном молоке:  Вывод: Изучение микробиологических требований, предъявляемых к молоку сырому, пастеризованному и влияния температуры хранения на качество сырья и молока питьевого. Были получены следующие данные: по КМАФАнМ данное молоко не соответствует требованиям НТД (КМАФАнМ составляет 9 · 105 КОЕ/см3, что превышает допустимую норму не более 5 · 105); по показателю БГКП молоко не соответствует требованиям ГОСТ 32901-2014 (БГКП были обнаружены в 0,001 мл продукта при норме их отсутствия в 1 мл продукта); при микроскопировании сырого молока были обнаружены колиформы. Сырое молоко не соответствует нормам НТД. В ходе исследования питьевого пастеризованного молока были получены следующие результаты: по КМАФАнМ данное молоко соответствует требованиям ТР ТС 033 (КМАФАнМ составляет 1 · 104 КОЕ/см3, что соответствует допустимой норме не более 1 · 105); по показателю БГКП молоко соответствует требованиям ГОСТ 32901-2014 (БГКП не были обнаружены в 0,01 мл продукта, что соответствует норме их отсутствия в 1 мл продукта). Пастеризованное молоко соответствует нормам НТД. ПРОТОКОЛ НАБЛЮДЕНИЙ Количество разведений: 1 разведение – 1:10 (100 клеток в 1 см3) 2 разведение – 1:100 (10 клеток в 1 см3) 3 разведение – 1:1000 (1 клетка в 1 см3) 4 разведение – 1:1000 (1 клетка в 10 см3) 5 разведение – 1:10000 (1 клетка в 100 см3) (подчеркните ваши разведения) Таблица 1 – Коли-титр образцов молока
Таблица 2 – КМАФАнМ образцов молока
Таблица 3 – Микроскопирование образцов молока
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
