Валидация методов контроля химических и физико-химических. Методические указания. Му 3 1886
 Скачать 235.08 Kb.
|
|
Таким образом, в нашем примере отбирают 9 образцов (серий) МИБП одного наименования (9 первоначальных проб - по 3 первоначальные пробы в каждом диапазоне концентраций), делят каждую пробу на 20 частей {15 (количество определений) + 5 (резерв)}. Руководитель этапа валидации кодирует пробы, устанавливает очередность их определения в каждой серии определений (например методом случайных чисел) и шифрует пробы четырехзначным номером. Шифр включает номер микросерии, номер аналитической серии в микросерии и очередность пробы в аналитической серии, например, шифр 3109 означает, что проба используется в третьей микросерии, в первой аналитической серии этой микросерии, девятой по порядку. Исполнитель получает пробы с номером, последние две цифры которого означают очередность их анализа. Исполнители после проведения определений возвращают протоколы валидации руководителю этапа валидации, который расшифровывает пробы, организует статистическую обработку концентраций по всем микросериям. (Такой алгоритм расчета может быть использован только в случае одинакового числа степеней свободы для каждой концентрации.) микросерии для каждой концентрации; - рассчитывают для каждой концентрации в микросерии дисперсию где: - рассчитывают сумму дисперсий для каждого диапазона концентраций в микросерии; - рассчитывают сумму полученных сумм для каждого диапазона концентраций по всем микросериям. В нашем примере рассчитывают среднее арифметическое из 3 определений в микросерии для каждой из 3 концентраций в диапазоне концентраций (три средних арифметических), соответствующую дисперсию (три дисперсии) и сумму полученных дисперсий для диапазона концентрации в каждой микросерии (5 сумм), затем рассчитывают сумму полученных сумм дисперсий (сумму 5 сумм дисперсий). где: каждого диапазона концентраций; A - количество аналитических серий в микросерии; D - количество микросерий. результатов определения в условиях повторяемости (r) для каждого диапазона концентраций по формуле: где: t(P, f) - коэффициент Стьюдента, получают из таблицы критерия Стьюдента (Прилож. 10); P - доверительный уровень (обычно 95%); f - число степеней свободы, рассчитывают по формуле: f = M x (A - 1) x D, где: M - число первоначальных проб в диапазоне концентраций; A - число аналитических серий в микросерии; D - число микросерий. Все результаты вносят в сводный протокол: Составляют таблицу для каждого диапазона концентраций: Для низких концентраций Для средних концентраций Для высоких концентраций Приложение 9 Пример протокола 1 этапа валидации (сбор первичных материалов при определении повторяемости) Приложение 9 ПРИМЕР ПРОТОКОЛА 1 ЭТАПА ВАЛИДАЦИИ (СБОР ПЕРВИЧНЫХ МАТЕРИАЛОВ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ ПОВТОРЯЕМОСТИ) Определение повторяемости Микросерия N 1 1. Наименование организации ______________________________________ 2. Наименование лабораторией _____________________________________ 3. Зав. лаборатории ______________________________________________ 4. Исполнитель ___________________________________________________ 5. Наименование метода N СОП "Определение белкового азота с реактивом Несслера". СОП N 6. Условия проведения испытаний: 6.1. Оборудование - центрифуга (охлаждаемая): марка, страна, год выпуска ___________ температура при центрифугировании ____________________________ число оборотов ___________ максимально возможное _____________ радиус ротора, см ____________________________________________ - холодильник: марка, страна _____________________________________ температура при хранении _____________________________________ температура при анализе ______________________________________ - вибрационная мешалка: марка, страна, автоматическая или операция выполняется вручную ______________________________________________ - мерная посуда: объем, ГОСТ _____________________________________ - пипетки: автоматическая, фирма, объем __________________________ или стеклянная по ГОСТ ________________________________ Для мерной посуды и пипеток - дата последней проверки емкости. - песочная баня: марка, страна, с каким обогревом - газовым или электрическим ____________________________________________________ - фотоколориметр: тип, заводской N, год выпуска, дата последней поверки __________________________________________________________ 6.2. Реактивы для построения калибровочного графика: N НД, квалификация, N серии (партии), дата выпуска, срок годности - аммония сульфат ________________________________________________ - аммония хлорид (фиксанал) ______________________________________ Реактив, который не используется, вычеркнуть Дата приготовления основного раствора ________________________ Дата приготовления рабочего раствора _________________________ 6.3. Реактивы - реактив Несслера ТУ N __________________________ N серии _______________________ дата выпуска _________________________________________________ или приготовленный _____________________________________________ Реактив, который не используется, вычеркнуть. - кислота трихлоруксусная (N НД, квалификация, N серии, дата выпуска, срок годности) __________________________________________ Дата приготовления и проверки титра 80%-ного раствора ТХУ ________ Дата приготовления 20%-ного раствора ТХУ _________________________ - кислота серная, концентрированная (N НД, квалификация, N серии, дата выпуска, срок годности) _____________________________________ - натрия гидроксид (N НД, квалификация, N серии, дата выпуска, срок годности) ___________________________________________________ - пергидроль (N НД, квалификация, N серии, дата выпуска, срок годности) ________________________________________________________ Микросерия N 1 Серия определений (аналитическая серия) N 1 Таблица 1.1.1 Калибровочный график Содержание азота в аликвоте раствора, мкг Взятая аликвота, мл 5 0,1 10 0,2 15 0,3 20 0,4 25 0,5 Результат измерения оптической плотности Таблица 1.1.2 Результаты определения N Код про- бы Дата начала опреде- ления Дата оконча- ния опреде- ления Объем ми- нерализата на колори- метрирова- ние, мл Резуль- тат изме- рения оп- тической плотности Формула расчета результа- та опре- деления Результат определе- ния белко- вого азо- та, мг/мл 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Микросерия N 1 Серия определений (аналитическая серия) N 2 Таблица 1.2.3 Калибровочный график Содержание азота в аликвоте раствора, мкг Взятая аликвота, мл 5 0,1 10 0,2 15 0,3 20 0,4 25 0,5 Результат измерения оптической плотности Таблица 1.2.4 Результаты определения N Код про- бы Дата начала опреде- ления Дата оконча- ния опреде- ления Объем ми- нерализата на колори- метрирова- ние, мл Резуль- тат изме- рения оп- тической плотности Формула расчета результа- та опре- деления Результат определе- ния белко- вого азо- та, мг/мл 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Микросерия N 1 Серия определений (аналитическая серия) N 3 Таблица 1.3.5 Калибровочный график Содержание азота в аликвоте раствора, мкг Взятая аликвота, мл 5 0,1 10 0,2 15 0,3 20 0,4 25 0,5 Результат измерения оптической плотности Таблица 1.3.6 Результаты определения N Код про- бы Дата начала опреде- ления Дата оконча- ния опреде- ления Объем ми- нерализата на колори- метрирова- ние, мл Резуль- тат изме- рения оп- тической плотности Формула расчета результа- та опре- деления Результат определе- ния белко- вого азо- та, мг/мл 1 2 3 4 5 6 7 8 9 7. Замечания о ходе выполнения программы. Руководитель лаборатории: Ответственный исполнитель: Исполнитель: Аналогично составляется протокол сбора первичных данных для других микросерий. Приложение 10 Значения t-критерия Стьюдента (при доверительной вероятности 0,95) Приложение 10 ЗНАЧЕНИЯ T-КРИТЕРИЯ СТЬЮДЕНТА (ПРИ ДОВЕРИТЕЛЬНОЙ ВЕРОЯТНОСТИ 0,95) Число степеней свободы t Число степеней свободы t Число степеней свободы t 1 12,71 14 2,14 28 2,05 2 4,30 15 2,13 29 2,05 3 3,18 16 2,12 30 2,04 4 2,78 17 2,11 40 2,02 5 2,57 18 2,10 50 2,01 6 2,45 19 2,09 60 2,00 7 2,36 20 2,09 70 1,99 8 2,31 21 2,08 80 1,99 9 2,26 22 2,07 90 1,99 10 2,23 23 2,07 100 1,98 11 2,20 24 2,06 110 1,98 12 2,18 25 2,06 120 1,98 13 2,16 26 2,06 130 1,97 27 2,05 беск. 1,96 |