Туберкулез. Микобактерии

• Название: Микобактерии
• Дата: 14.03.2023
• Размер: 7.34 Mb.
• Имя файла: Туберкулез.ppt
• Тип: Документы; #990177

Микобактерии

Микобактерии туберкулёза.


1. Характеристика рода . Мycobacterium.
2. Микобактерии туберкулёза (морфология, биологические свойства).
3. Эпидемиология, патогенез. Особенности иммунитета.
4. Лабораторная диагностика.
5. Лечение и профилактика.


Микобактерии - палочковидные бактерии порядка Асtinomycetales, семейства Мycobacteriaceae, рода Мycobacterium; широко распространены в почве, воде и среди людей. Род Мycobacterium включает свыше 160 видов. Они вызывают туберкулез, лепру, микобактериоз.Типовой вид М. tuberculosis.

Виды:

Виды:
Генерализованные инфекции.
Локализованные инфекции.
Инфекции, протекающие без развития видимых поражений.


В настоящее время насчитывают более 160 видов микобактерий.
По патогенным свойствам род Mycobacterium подразделяют на:
Патогенные микобактерии: вызывающие туберкулез – Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, M. microti) и лепру - M. leprae
Условно-патогенные (вызывают микобактериозы): M. avium-intracellulare complex, M. fortuitum, М. scrofulaceum, M. kansasii, M. xenopi, M. marinum, M. chelonei, M. ulcerans и др.
Сапрофиты: M. smegmatis, M. phlei, M. vaccae, M. gordonae, M. terrae и др.


.

По скорости роста:

По скорости роста:
Бысто растущие.
Медленно растущие.
Микобактерии, которые требуют специальных условий для роста.


По способности к пигментообразованию:
Фотохромогенные.
Скотохромогенные.
Нефотохромогенные

Возбудители туберкулеза

Возбудители туберкулеза
M. tuberculosis
M. africanum
M. bovis


Нехромогенные


M. avium complex
M. haemophilum
M. malmoense
M. shimoidei
M. genavense
M. celatum
M. ulcerans
M. terrae complex
M. triviale
M. gastri


Хромогенные (образующие пигмент на свету)


M. kansasii
M. marinum
M. simae
M. asiaticum
M. xenopi
M. gordonae
M. scrofulaceum
M. szulgai
M. flavescens

Нехромогенные

Нехромогенные
M. fortuitum
M. chelonae
M. abscessus
M. mucogenicum
M. smegmati
Хромогенные
M. phlei
M. vaccae


- инфекционно-аллергическое заболевание человека и животных с наклонностью к хроническому течению, характеризующееся образованием специфических воспалительных изменений, часто имеющих вид маленьких бугорков, с преимущественной локализацией в легких и лимфатических узлах.

По данным ВОЗ:

По данным ВОЗ:
ежегодно 8 миллионов человек заболевают туберкулёзом;
2 миллиона умирает.
Доминируют лица 18-26 лет.
На Украине в 1995 году ВОЗ объявила эпидемию туберкулёза.


— немецкий микробиолог. Открыл бациллу сибирской язвы, холерный вибрион и туберкулёзную палочку. За исследования туберкулёза награждён Нобелевской премией по физиологии и медицине в 1905 году.


В 1919 г. микробиолог Альбер Кальметт и ветеринарный врач Камиль Герен создали вакцинный штамм микобактерии туберкулёза для противотуберкулёзной вакцинации людей - «бациллы Кальметта — Герена (BCG — Bacilles Calmette — Guerin).
1921 г. - впервые вакцина БЦЖ была введена новорождённому ребёнку.

Туберкулез Микобактерии.

Туберкулез Микобактерии.
Семейство Mykobacteriaceae. Род Mykobacterium


Mycobacterium tuberculosis(красные палочки) в мокроте. Окраска по Цилю-Нильсену.


Грамположительные тонкие прямые или слегка изогнутые палочки; - Клеточная стенка содержит большое количество восков и липидов (миколовую кислоту), что обусловливает гидрофобность, устойчивость к кислотам, щелочам, спиртам; - Окрашивается по Цилю-Нильсену; - Неподвижны, спор и капсул не образует; - Возможен переход в фильтрующиеся и L-формы


Грамположительные тонкие прямые или слегка изогнутые палочки; - Клеточная стенка содержит большое количество восков и липидов (миколовую кислоту), что обусловливает гидрофобность, устойчивость к кислотам, щелочам, спиртам; - Окрашивается по Цилю-Нильсену; - Неподвижны, спор и капсул не образует; - Возможен переход в фильтрующиеся и L-формы


Аэробы ( при 5-10% СО2 быстрее) ;
Растут на средах, содержащих яйца, глицерин, картофель, аспарагин, витамины, соли;
Чаще всего применяют яичную среду Левенштейна-Йенсена и синтетическую среду Сотона;
растут медленно (рост обнаруживается через 2-3 недели и позднее);
Колонии сухие, морщинистые, сероватые;
Обладают биохимической активностью, позволяющей дифференцировать виды
Основной тест – ниациновая проба (накопление в жидкой среде никотиновой кислоты)


Среда Левенштейна-Йенсена и рост микобактерий.


Ниациновый тест на способность микобактерий синтезировать никотиновую кислоту (ниацин).


Корд-фактор ( рисунок- слева, люм.микроскопия- справа)


микобактерий туберкулеза очень устойчивы во внешней среде. В проточной воде они могут сохранять жизнеспособность до 1 года, в почве и навозе — 6 мес., на различных предметах — до 3 мес., в библиотечной пыли — 18 мес., в высушенном гное и мокроте— до 10мес. При кипячении палочка Коха погибает через 5 мин, в желудочном соке— через 6ч, при пастеризации— через 30мин
прямой солнечный свет убивает микобактерии в течение полутора часов, а ультрафиолетовые лучи за 2-3 минуты. Дезинфектанты, содержащие хлор, убивают микобактерии в течение 5 часов.


Фактор адгезии - корд – фактор = сложный эфир трегаллозы и двухостатков миколовой кислоты (трегалозо-6,6-димиколат);
Восковая фракция липидов – содержит миколовую кислоту, вызывает реакции с образованием многочисленных гигантских клеток;
Сульфолипиды (Сульфатиды) подавляют активность лизосомальных ферментов;
Фосфатидная фракции липидов- специфическая тканевая реакция , с образованием эпителиоидных клеток;
Жировая фракции липидов - вызывает образование туберкулоидной ткани;
Антигены микобактерий индуцируют развитие гиперчувствительности замедленного типа.


Группоспецифический антиген - белковый
Видоспецифический – полисахаридный
Главный антиген, на который развивается иммунный ответ – туберкулин - гликопротеид


Основной источник инфекции – больной туберкулезом органов дыхания
Механизм передачи - аэрогенный
Пути передачи – воздушно-пылевой, воздушно-капельный, реже алиментарный, контактный, трансплацентарный


Наиболее значимым в мире стал ВИЧ;
Курение (особенно более 20 сигарет в день) — увеличивает вероятность туберкулеза в 2 — 4 раза;
Диабет;
Тюремное заключение.


Взаимодействие Mycobacterium tuberculosis с организмом человека начинается при попадании возбудителя в легкие
После адгезии с помощью корд-фактора захватываются альвеолярными макрофагами;
Далее (макрофаги либо сдерживают размножение микобактерий, либо нет), определяются соотношением между бактерицидной активностью макрофагов и вирулентностью микобактерий.
После размножения внутри макрофага микобактерии его разрушают
Моноциты, выходящие из кровотока под влиянием факторов хемотаксиса, захватывают освобождаемые из разрушенных макрофагов микобактерий
Макрофаги переносят микобактерии в ближайшие лимфоузлы, где они долго сохраняются в виду незавершенного фагоцитоза
Таким образом, первоначальное попадание возбудителя в легкие или другие органы вызывает развитие малого или неспецифического воспаления с макрофагальной инфильтрацией


Через 2-4 недели после заражения начинается следующий этап взаимодействия микобактерий с макроорганизмом. При этом наблюдаются:
два процесса
реакция повреждения ткани по типу ГЗТ(специфическая воспалительная реакция) и
реакция активации макрофагов.
С развитием иммунитета и накоплением в первичном очаге большого количества активированных макрофагов формируется туберкулезная гранулема .
Гранулемы состоят из лимфоцитов и активированных макрофагов, то есть эпителиоидных и гигантских клеток .
Развитие реакции повреждения ткани приводит к образованию в центре гранулемы очага казеозного некроза
В случае заживления очага некротические массы уплотняются, обызвествляются в результате отложения солей кальция, вокруг очага формируется соединительно-тканная капсула – очаг Гона
Но микобактерии в виде L-форм сохраняют в таком очаге жизнеспособность долгие годы
При снижении резистентности макроорганизма происходит активация очага с развитием вторичного туберкулеза


Из первичного туберкулезного очага может происходить бронхогенная, лимфогенная и гематогенная диссеминация микобактерий с образованием очагов в других органах и тканях (внелегочный туберкулез)


Самыми первыми симптомами выступают неспецифические проявления интоксикации: слабость, бледность, повышенная утомляемость, вялость, апатия.
субфебрильная температура (около 37 °C, редко выше 38°), потливость, особенно беспокоящая больного по ночам, похудение.
Лимфаденопатия - генерализованное или локальное увеличение лимфатических узлов.


Милиарный туберкулез


Казеозная пневмония с распадом


КЛИНИЧЕСКИЕ ФОРМЫ


Туберкулез глаз.


Внелегочный туберкулез


Туберкулез органов пищеварительной системы


Туберкулез органов мочеполовой системы


Туберкулез центральной нервной системы и мозговых оболочек


Туберкулез костей и суставов


Туберкулез кожи


Первичный иммунный ответ – обеспечивается факторами неспецифической противоинфекционной защиты (макрофаги, Т- и В-лимфоциты). При функциональной недостаточности макрофагального и Т-лимфоцитарного звеньев иммунитета, локализации и обызвествления первичного туберкулезного очага не происходит.


Вторичный иммунный ответ – обеспечивается сенсибилизированными Т-лимфоцитами – основными эффекторами гиперчувствительности замедленного типа (ГЧЗТ), которые распознают инфицированные клетки, атакуют их и разрушают.


должны быть изготовлены из ударостойкого материала;
должны легко расплавляться при автоклавировании;
быть достаточного объёма (40-50 мл):
иметь широкое отверстие для сбора мокроты (диаметр не менее 30 мм);
быть удобными в обращении, прозрачными или полупрозрачными, чтобы можно было оценить количество и качество собранной пробы, не открывая крышку.


сбор материала проводить до начала химиотерапии;
материал для исследования необходимо собирать до утреннего приёма пищи и лекарственных препаратов;
для исследования желательно собрать не менее 3 проб утренней мокроты. Собирают мокроту в течение 3 дней подряд;
собранный материал необходимо как можно быстрее доставить в лабораторию:
в случае, когда доставить материал в лабораторию немедленно невозможно, его сохраняют в холодильнике при температуре воздуха 4 °С не более 48 ч;
при перевозке материала необходимо особенно тщательно следить за целостностью флаконов.


Материал для исследования мокрота, промывные воды бронхов и промывные воды желудка, плевральная и цереброспинальная жидкости, моча, асцитическая жидкость и др.
Ι. Бактериоскопическое исследование мазков из материала:
Прямая микроскопия - по Цилю-Нильсену.
Люминесцентная микроскопия.


2. Люминесцентный метод (окраска родамин-ауромином));


Прямая окразка мазка мокроты по Цилю-Нильсену


Мазок из флотационного слоя по Цилю-Нильсену


Метод микрокультур Прайса (густой мазок мокроты на стекле обрабатывают кислотой, не фиксируют и помещают в сыворотку; через 5-7 дней окрашивают по Цилю-Нильсену; при наличии корд-фактора видны слипшиеся в жгуты микобактерии)


ΙΙ. Бактериологическое исследование
Посев на плотные элективные среды (Левенштейна-Йенсена)
. Ускоренные методы культивирования
Методмикрокультур (метод Прайса - Школьниковой)
Применение полностьюавтоматизированных коммерческих систем бульонного культивирования.


ΙV. Биологическая проба - морским свинкам подкожно или в/брюшинно вводят 1 мл исследуемого материала. Через 1-2 мес развивается генерализованная инфекция с летальным исходом.
V. Серологический метод. ПЦР, ИФА, РИА, РСК, РА, РПГА, РП.
VΙ. Туберкулинодиагностика – кожная аллергические проба Манту.
VΙΙ. Экспресс-диагностика - РИФ, метод лазерной флуоресценции
VΙΙΙ. ИФА - обнаружение антител к возбудителям туберкулеза в сыворотках крови.


Внутрикожное введение высокоочищенного туберкулина (PPD= Purified Protein Derivative)
вызывает у инфицированных микобактериями людей
местную воспалительную реакцию в виде инфильтрата
и покраснения (реакция ГЗТ).
Неинфицированные люди никакой реакции на введение туберкулина не дают. Эту пробу применяют для выявления инфицированных, сенсибилизированных людей.


Химиопрепараты: производные парааминосалициловой кислоты (ПАСК); производные гидразида изоникотиновой кислоты (изониазид, фтивазид, пиразинамид,)
Антибиотики – аминогликозиды (стрептомицин, канамицин), цефалоспорины, виомицин, рифампицин, флоримицин, циклосерин.


Живая вакцина BCG (Bacille Calmette-Guerin), полученная А.Кальметтом и С.Гереном.
Вакцинацию проводят на 1-2-й день жизни, в роддоме внутрикожно.
Ревакцинация – в 7 - 12 – 17 – 22 года и 27-30 лет.
Ревакцинации подлежат только не инфицированные туберкулезом лица, у которых туберкулиновая проба отрицательная, поэтому перед ее проведением ставится проба Манту с 2ТЕ.


Мycobacterium leprae - микобактерии, вызывающие проказу (лепру, или болезнь Гансена) редко встречающееся хроническое заболевание, протекающее в виде трех клинических форм - лепроматозной, туберкулоидной и недифференцированной. Поражаются кожа, слизистые оболочки и периферическая нервная система, верхние дыхательные пути, глаза, яички.
Заражение происходит от человека к человеку воздушно-капельным и контактным путем.
M. leprae - облигатный внутриклеточный паразит; на питательных средах не растет; культивируется на животных (только на броненосцах).


Кислотоустойчивые палочки проказы


Рисунок


Препарат


M. leprae - по морфологическим и тинкториальным признакам сходны с туберкулезными палочками; отличаются меньшей кислотоустойчивостью. Окрашиваются по Цилю-Нельсену в красный цвет. Неподвижны. Располагаются внутриклеточно: параллельными рядами, наподобие пачки сигар, очень редко по одиночке или под углом


Львиное лицо — характерный признак лепроматозной проказы. Кожа утолщена, образует грубые складки. В соскобах кожи легко выявить возбудителя.


При проказе часто встречаются язвенные поражения кожи ног. Это могут быть глубокие язвы на подошвах (как при сахарном диабете) или в области голеностопного сустава (снимок). Из-за потери чувствительности повышается вероятность повреждения ног вследствие длительного сдавления, ожогов и травм. Язвы имеют склонность распространяться и заживают очень медленно с образованием грубых деформирующих рубцов.


Бактериоскопический метод: в мазках из соскоба кожи, препаратах из лепром, окрашенных по Цилю-Нельсену, обнаруживают внутриклеточно параллельно расположенные кислотоустойчивые палочки. Возбудитель выявляется, обычно, только при лепроматозной форме болезни.
Кожно-аллергическая проба путем внутрикожного введения лепромина (суспензии убитых микобактерий лепры, полученных из лепром больного человека или броненосца): ранняя реакция развивается через 48 ч. (реакция Фернандеса), поздняя реакция – через 3-4 недели (реакция Мицуды). При лепроматозной форме реакция Мицуды обычно отрицательная, а при туберкулоидной – резко положительная (диаметр более 5 мм).
Биологическая проба – заражение броненосцев.


Для лечения лепры используются, по большей части, препараты из группы сульфонов, благодаря которым это заболевание перестало считаться смертельным.
Основным противолепрозным препаратом является дапсон (Dapsone), который назначается в комбинации с рифампицином и лампреном. Эта терапия позволила широко применять амбулаторные методы лечения больных лепрой.


Благодарю за внимание!