Столбняк. Морфологические и тинкториальные свойства анаэробов
 Скачать 43.5 Kb.
|
1 2 2) Резистентность. С. perfringens. Споры способны длительное время сохраняться в окружающей среде; способны вегетировать в почве, богатой гумусом. С. perfringens типа А относительно толерантен к кратковременным кислородным воздействиям, хотя имеются штаммы, погибающие при воздействии О2 на культуру в течение 3 мин. При варке мяса некоторые споры погибают в течение нескольких минут, тогда как другие выдерживают кипячение в течение 2ч; споры, находящиеся в жировой ткани, выживают на протяжении длительного времени. Термоустойчивость спор серотипов B и D относительно невысока (погибают при кипячении в течение 15-30 мин), споры типов A и C устойчивы и выживают при кипячении и даже автоклавировании в течение 1-6 ч. Споры отличает высокая устойчивость к химическим и физическим воздействиям. С. novyi. Устойчивы к нагреванию, выживают при кипячении в течение 1-2 ч; в костях животных сохраняются до 10 лет. Споры отличает высокая устойчивость к химическим и физическим воздействиям. С. septicum. Споры способны длительное время сохранятся в окружающей среде; вегетативные формы остаются жизнеспособными при доступе кислорода в течение 6-10ч. Споры отличает высокая устойчивость к химическим и физическим воздействиям. 3) Эпидемиология. Естественная среда обитания анаэробов, в том числе возбудителей анаэробной инфекции,— кишечник животных, в особенности травоядных, а также всеядных (свиньи). В их кишечнике, как правило, находят Cl. perfringens, а нередко и других возбудителей анаэробной инфекции; здесь они размножаются как сапрофиты, не вызывая заболевания животного. Из кишечника здорового человека ряд авторов также выделил наряду с другими анаэробами и Cl. perfringens. Хозяйственная деятельность человека — удобрение полей фекалиями, выпас скота и так далее — способствует широкому распространению возбудителей анаэробной инфекции во внешней среде, в первую очередь в почве. В некоторых почвах при наличии питательных веществ, достаточной влажности и температуры патогенные анаэробы могут даже размножаться. Но и при неблагоприятных условиях внешней среды анаэробные бактерии способны сохраняться очень долгое время в состоянии спор; вместе с кормами они вновь попадают в кишечник животных. 4) Иммунитет. В процессе инфекции образуются антитоксины, что приводит к формированию антитоксического иммунитета. Он определяется уровнем антитоксина и противоферментативных антител в сыворотке крови. Однако напряженность постинфекционного иммунитета невысока. Противомикробные антитела не обладают протективными свойствами, чтобы препятствовать размножению клостридий. Образующийся антитоксический иммунитет не является напряженным. 5) Патогенез и клиника. Патогенез.Факт частого возникновения анаэробной инфекции при осколочных ранениях связан с особенностями патогенеза этого раневого осложнения. Осколочные ранения отличаются тем, что в них всегда находится большое количество некротических тканей и тканей с резко пониженной жизнеспособностью; кроме того, при осколочных ранениях более выражена так называемая сила бокового удара, то есть распространение энергии ранящего снаряда в сторону от раны, в результате этого дополнительно повреждаются значительные участки тканей. В поврежденных тканях быстро развивается травматический отек, и они сдавливаются в прочном апоневротическом футляре, сдавливаются и мелкие сосуды мышц, нарушается микроциркуляция и, следовательно, снабжение тканей кислородом. В результате образуется участок ишемизированных тканей, в которых анаэробы находят благоприятные условия для размножения. Клиника. Чаще всего газовая гангрена развивается после обширных и глубоких проникающих ранений мягких тканей. В мирное время это следствие автомобильной или железнодорожной катастрофы, травм на производстве, в сельском хозяйстве или в быту, внебольничных абортов, ожогов, обморожений, хирургических операций на желудочно-кишечном тракте, ампутаций, инъекций различных лекарственных препаратов и т.д. Классификация клиническая (А.П. Колесов и соавт. 1989г.) 1) по микробной этиологии – клостридиальные – неклостридиальные (гнилостные); 2) по характеру микрофлоры – моноинфекции – полиинфекции – смешанные (анаэробы и аэробы); 3) по локализации – местные – регионарные (неограниченные) – системные; 4) по источникам инфекции – экзогенные 10% – эндогенные 90%; 5) по происхождению – внебольничные – внутрибольничные; 6) по причинам возникновения – травматические – спонтанные – ятрогенные. Течение анаэробной инфекции может быть молниеносным, быстро прогрессирующим и торпидным. При молниеносном течении уже спустя несколько часов после ранения развиваются грозные явления, приводящие к смерти через 1-2 суток; лечение в большинстве случаев оказывается неэффективным. При быстро прогрессирующем течении признаки осложнения появляются не ранее 24 час. после ранения (обычно через 2-3 суток); смерть может последовать через 4-6 дней; этот вид встречается наиболее часто. Торпидное течение характеризуется поздним (не ранее 5-6-го дня) развитием анаэробной инфекции, распространение ее идет медленно и к летальному исходу может приводить через 2-3 недели и позже. При быстро прогрессирующем, а тем более при торпидном течении анаэробной инфекции жизнь раненого может быть спасена своевременными и радикальными лечебными мероприятиями. Наиболее благоприятная форма анаэробной инфекции — позднее образование газового абсцесса, обычно вокруг инородного тела или осколка кости. 6) Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат кусочки пораженной ткани, взятые при обработке раны, экссудат из раны, кровь. Методы лабораторной диагностики ботулизма: - Микроскопический (окраска по Граму). - Бактериологический. - Серологический (реакция имунофлюоресценции). - Биологический. - Экспресс-метод. - Микроскопический. Вначале исследуемый материал бактериоскопируют. Наличие в препаратах крупных грамположительных палочек, часть из которых образует капсулу, позволяет поставить предварительный диагноз. Можно использовать метод флюоресцирующих антител. Бактериоскопическое исследование проводится в реакции иммунофлюоресценции с использованием иммунной сыворотки. - Бактериологический. Бактериологическое исследование позволяет выделить возбудителей, идентифицировать их по биологическим свойствам. Выделение чистой культуры ведут, засевая материал на среды Китта-Тароцци, Вильсона-Блера и молоко (среда Тукаева). На среде Китта-Тароцци Clostridium perfringens дают помутнение среды и образование пузырьков газа. При посеве в пробирку со стерильным молоком происходит так называемая «штормовая реакция» - молоко свертывается с образованием сгустка уже через 3-4 ч. На среде Вильсона-Блера появляются колонии черного цвета в глубине среды. - Биологической пробой вызывают у животных анаэробную инфекцию. -Экспресс-метод. Ускоренный метод - газожидкостная хроматография, которая позволяет в течение нескольких минут по выявленным продуктам метаболизма определить наличие клостридий. Для быстрого обнаружения токсина C. perfringens в раневом отделяемом определяют его лецитиназу, что выявляется помутнением жидкости в пробирке. При отрицательной реакции жидкость остается прозрачной. Таблица 1. Дифференцирующие признаки патогенных клостридий - возбудителей газовой анаэробной инфекции
С. perfringens — длинная грамположительная палочка. Имеет серовары А, В, С, D и F. В жидких питательных средах, приготовленных из гидролизатов мяса или казеина (рН 7,4), при 37-43°С растет быстро (3-8 ч) с бурным газообразованием и изменением рН в кислую сторону. Смесь газов (водород, углекислый газ, аммиак, сероводород, летучие амины, альдегиды, кетоны), выделяющихся из больших объемов растущей культуры, в присутствии огня может дать взрыв. Существует три устойчивых варианта колоний С. perfringens: гладкий (S), слизистый (М) и шероховатый (R), однако при определенных условиях могут появляться колонии смешанного (О) варианта. Колонии, выросшие на поверхности кровяного агара, часто окружены одной или двумя зонами гемолиза и при выдерживании на воздухе приобретают зеленоватую окраску. Вокруг колоний, вырабатывающих α-токсин (лецитиназу), в желточном агаре образуется зона перламутрового преципитата. Большинство штаммов обладает протеолитическими свойствами, медленно расплавляя свернутую сыворотку (вареные кусочки мяса) на 2—7-й день. Многие штаммы вырабатывают ферменты, расплавляющие через 24 ч 7% желатин. Характерной для С. perfringens является способность свертывать лакмусовое молоко с образованием сгустка кирпичного цвета и полным просветлением молочной сыворотки. Все штаммы сбраживают с образованием кислоты и газа глюкозу, галактозу, мальтозу, лактозу, левулезу, сахарозу и не ферментируют маннит и дульцит. Некоторые штаммы разлагают глицерин и инулин. С. septicum — полиморфная грамположительная палочка с субтерминальными спорами. В зависимости от состава среды она может превращаться в короткие вздутые формы и длинные нити. Последние часто обнаруживаются в трупах животных на поверхности печени, прилегающей к диафрагме. Строгий анаэроб. На поверхности плотных питательных сред только через 48 ч образует блестящие полупрозрачные колонии диаметром до 4мм с неровными бахромчатыми краями, имеет тенденцию к ползучему росту. Чаще образует R-форму колоний. В глубине 1% агара образует колонии диаметром 1-2мм с уплотненным центром и радиально отходящими перепутанными нитями. В 2% агаре колонии имеют вид чечевиц, сердца и т.п., иногда с протуберанцами. На кровяном агаре узкая зона гемолиза появляется вокруг колонии только на 2-е сутки. Ферментирует с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, лактозу, галактозу, фруктозу, салицин и не разлагает глицерин и маннит, разжижает желатин и свертывает лакмусовое молоко с образованием кислоты и газа. Очень редко разлагает сахарозу. Не образует индол, не восстанавливает нитраты в нитриты и не вырабатывает большого количества сероводорода. С. fallax — грамположительная прямая, иногда инкапсулированная палочка с закругленными концами, редко образующая овальные центральные или субтерминальные споры. Перитрих, подвижна в молодых культурах. Строгий анаэроб. На поверхности агара через 1-2 сут образует плоские прозрачные колонии с неровным краем диаметром 1-2мм, которые затем становятся матовыми, с возвышением в центре. На агаре с кровью лошади вокруг колоний имеется узкая зона гемолиза. В глубине агара колонии напоминают мелкие чечевицы, иногда с выростами на краю. Ферментирует глюкозу, мальтозу, лактозу, сахарозу, маннит, салицин, не разлагает крахмал и глицерин, не сбраживает молоко с образованием кислоты. Не образует сероводород, индол, не восстанавливает нитраты в нитриты. Выделяется из ран в 1-4% случаев. С. sordelii — грамположительная палочка, образующая овальные, центральные и субтерминальные споры на обычных средах. Перитрих, подвижна в свежих культурах. Анаэроб нестрогий. На поверхности питательных сред через 1-2 сут образует слабовыпуклые серовато-белые колонии с неровным краем. На кровяном агаре (эритроциты лошади) колонии окружены узкой зоной гемолиза. В глубине агара колонии имеют форму чечевиц или сердца с выростами по краю. Ферментирует мальтозу, глюкозу и фруктозу, не разлагает лактозу и сахарозу. Разжижает желатин и свернутую сыворотку, вырабатывает сероводород и индол. С. peffringens. Все 6 типов С. peffringens способны вызывать газовую гангрену у человека и животных в том случае, если возбудитель вырабатывает лецитиназу. В экспериментальных условиях весьма чувствительны к заражению голуби, воробьи, тогда как другие животные (кролики, свинки, мыши и т.д.) более устойчивы к заражению. Типичную картину изменения тканей, вызываемых С. perfringens, можно получить при внутримышечной инъекции морской свинке 0,5 мл свежей культуры гладкой формы этого микроба. Смерть животного наступает в сроки от нескольких часов до нескольких суток. С. fallax обнаружены при аппендиците, ранениях, хроническом артрите у людей и при гангрене скота. Свежие культуры, изолированные из ран, в первых генерациях бывают патогенными для мышей и морских свинок, однако вирулентность штаммов быстро теряется. С. sordellii в эксперименте на животных способен вызвать заболевание, похожее на газовую гангрену, с подкожным желатинозным отеком, иногда розово-красного цвета. Смерть животных происходит обычно за счет действия летального токсина в течение 1-2 дней после введения культуры. Описаны случаи смертельных кишечных заболеваний у человека и рогатого скота. Среди других клостридий, относительно часто изолируемых из ран, следует упомянуть С. tertium, С. butyricum, которые непатогенны для лабораторных животных, но могут оказывать некоторое влияние на течение газовой гангрены, находясь в ассоциациях с патогенными клостридиями. 7) Профилактика и лечение. Предупреждение развития анаэробной инфекции состоит в своевременной и полноценной хирургической помощи раненым. Параллельно вводится поливалентная антитоксическая очищенная концентрированная сыворотка по 10 тыс. ME. С лечебной целью эту дозу увеличивают в 5 раз (по 50 тыс. ME каждой сыворотки) и применяют антибиотики. Лечение только одной сывороткой в ряде случаев не дает нужного эффекта, в то время как комплексное применение антитоксической сыворотки и антибиотиков сопровождается значительным снижением летальности. 1 2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||