Название метода

• Название: Название метода
• Дата: 26.06.2021
• Размер: 340.68 Kb.
• Имя файла: Spektralnye_metody (1).docx
• Тип: Документы; #221752

Оптические методы.

Название метода : Рефрактометрия

С хема прибора : 1 – зеркало;

2 – вспомогательная откидная призма;

3 – основная измерительная призма;

4 – матированная грань откидной призмы;

5 – исследуемая жидкость;

6 – призмы Амичи компенсатора;

7 – объектив зрительной трубы;

8 –поворотная призма;

9 – окуляр зрительной трубы.

Условия проведения анализа : При стабильной температуре (20 ±0,3ºС) и длине волны линии D спектра натрия 589,3 нм.

Основан на определении показателя преломления исслед вещества

Определяемые вещества : Неорганические и органические ЛВ.

Область применения : Определение концентраций ЛВ в растворах, для ряда веществ – установление подлинности и чистоты (эфирные масла).

Измеряемая величина : Показатель преломления

Расчеты : Концентрация раствора в процентах (С):



где n – показатель преломления раствора;

n0 – показатель преломления растворителя;

F – фактор, равный величине прироста показателя преломления при увеличении концентрации на 1%.

Для количественного анализа лекарственной смеси, состоящей из двух или более компонентов, концентрация компонента:

где C1, C2, Сn-1 – процентное содержание ЛВ, найденных химическим методом;

F1, F2 – факторы растворов ЛВ, определяемых химическим
Оптические методы.

Н азвание метода : Поляриметрия

Схема прибора

1 – источник света; 2 – неподвижный поляризатор; 3 – раствор оптически активного вещества;

4 – поляриметрическая трубка; 5 – плоскость поляризации света изменяется при прохождении через раствор; 6 – анализатор.

Метод основан на способности веществ вращать плоскость поляризованного света

Условия проведения анализа: При стабильной температуре (20 ±0,3ºС) и длине волны линии D спектра натрия 589,3 нм

Определяемые вещества: Оптически активные вещества: антибиотики, алкалоиды, эфирные масла, белки, нуклеиновые кислоты, морфин, никотин, кислота винная и др.

Область применения: Установление подлинности ЛВ;оценка чистоты ЛВ; определение концентраций ЛВ в растворах.

Измеряемая величина: Угол вращения плоскости поляризации света

Расчеты: Для растворов вращение удельное определяют по формуле



где α – угол вращения;

С – концентрация раствора, %; ℓ – толщина трубки, дм.

Концентрация вещества в растворе:


Спектральные методы.

Н азвание метода : ИК-спектроскопия

Схема прибора :

1 – источник непрерывного ИК- спектра; 2 – зеркало осветителя; 3 – кювета с исследуемым веществом; 4 – входная щель монохроматора;5 – монохроматор;6 – выходная щель монохроматора 7 – зеркало конденсора;8 – приёмник излучения; 9 – усилитель;10 – измерительный или регистрирующий прибор.

Метод основан на поглощении энергии электромагнитного излучения по сопряженным системам ( двойные связи, неподеленные электр пары)

Условия проведения анализа : Средняя ИК- область(4000 до 400 см-1)

Определяемые вещества: Неорганические и органические ЛВ, биологически активные вещества растений и др

Область применения: Установление подлинности ЛВ; оценка чистоты ЛВ, количествен ное определение ЛВ.

Измеряемая величина: Пропускание (Т), оптическая плотность

Расчеты: Расчет количественного содержания индивидуального

вещества (Х):

• 
  в субстанциях:
  

где Х – содержание индивидуального вещества, %;

A и AСО оптическая плотность растворов исследуемого и стандартного образца соответственно;

С – концентрация раствора стандартного образца, г/мл;

а – точная масса лекарственного вещества, г;

V – разведение, согласно НД, мл.
Спектральные методы.

Название метода: УФ-спектрофотометрия

1 – источник излучения; 2 – монохроматор; 3 – кюветы с исследуемым раствором и растворителем; 4 – детектор (фотоэлемент); 5 – электронная схема; 6 – цифровой индикатор.

Метод основан на поглощение монохроматического света, описываемого законом Бугера –Ламберта Бера.

Условия определения анализа: Аналитическая область: УФ-(190-380нм),видимая область (380-800 нм)

Определяемые вещества: Вещества способные поглощать монохроматическое излучение ЛВ, имеющие в структуре хромофорные группы (группы,содержащие в составе сопряженные двойные связи и неподеленные пары электронов).

Область применения: Установление подлинности ЛВ; оценка чистоты ЛВ;

определение количественного содержания ЛВ.

Измеряемая величина: Оптическая плотность

Расчеты: Расчет количественного содержания индивидуального вещества (Х):

г де Х – содержание индивидуального вещества, %;

A и AСО - оптическая плотность растворов исследуемого и стандартного образца соответственно;

С – концентрация раствора стандартного образца, г/мл;

а – точная масса лекарственного вещества, г;

V – разведение, согласно НД,мл.

• 
  В твердых лек.формах
  

г де Х – содержание индивидуального вещества, г;

MЛФ – средняя масса таблеток, драже и др.;

а – точная масса порошка растертых таблеток, драже и др., г.
г де Х – содержание индивидуального вещества, г;

а – аликвота лекарственной формы;

VЛФ – объем лекарственной формы по прописи.

Расчет количественного содержания индивидуального вещества (Х) с учетом величины удельного коэффициента светопоглощения ( ): см Е 1% 1

• 
  В субстанциях
  

г де, Х – содержание индивидуального вещества, %;см

Е1 1% - величина удельногокоэффициентасветопоглощения.

• 
  
  
• 
  В твердых лек.формах
  

где Х – содержание индивидуального вещества, г;

MЛФ – средняя масса

таблеток, драже и др.

• 
  В жидких лекарственных формах:
  

где Х – содержание индивидуального вещества, г;

а – аликвота лекарственной формы;

VЛФ – объем лекарственной формы по прописи .
Спектральные методы.

Название метода: Фотоэлектрокалориметрия

Фотоэлектроколориметр

1 – источник излучения (лампа накаливания); 2 – светофильтр; 3 – кюветы с исследуемым раствором и растворителем; 4 – детектор (фотоэлемент); 5 – электронная схема; 6 – цифровой индикатор.

Метод основан на измерении степени поглощения немонохроматического света веществом с помощью фотолектрокалориметра

Условия определения анализа: Видимая область спектра (360-780 нм).

Определяемые вещества: Поглощают окрашенные вещества вещества: за счёт собственной окраски (рибофлавин) или за счёт окрашенных продуктов реакции определяемых веществ с реагентами (диазосоединения, гидроксаматы меди и пр.).

Область применения: Определение количественного содержания ЛВ.

Измеряемая величина: Оптическая плотность

Расчеты: Расчет количественного содержания индивидуального вещества (Х):

г де Х – содержание индивидуального вещества, %;

A и AСО - оптическая плотность растворов исследуемого и стандартного образца соответственно;

С – концентрация раствора стандартного образца, г/мл;

а – точная масса лекарственного вещества, г;

V – разведение, согласно НД,мл.

• 
  В твердых лек.формах
  

г де Х – содержание индивидуального вещества, г;

MЛФ – средняя масса таблеток, драже и др.;

а – точная масса порошка растертых таблеток, драже и др., г.
г де Х – содержание индивидуального вещества, г;

а – аликвота лекарственной формы;

VЛФ – объем лекарственной формы по прописи.

Расчет количественного содержания индивидуального вещества (Х) с учетом величины удельного коэффициента светопоглощения ( ): см Е 1% 1

• 
  В субстанциях
  

г де, Х – содержание индивидуального вещества, %;см

Е1 1% - величина удельногокоэффициентасветопоглощения.

• 
  
  
• 
  В твердых лек.формах
  

где Х – содержание индивидуального вещества, г;

MЛФ – средняя масса

таблеток, драже и др.

• 
  В жидких лекарственных формах:
  

где Х – содержание индивидуального вещества, г;

а – аликвота лекарственной формы;

VЛФ – объем лекарственной формы по прописи .
Спектральные методы.

Название метода: Флуориметрия

1 – источник излучения (лампа накаливания); 2 – светофильтр; 3 – кюветы с исследуемым раствором и растворителем; 4 – детектор (фотоэлемент); 5 – электронная схема; 6 – цифровой индикатор.

Метод основан на измерении флуоресценции - испускание света хим веществом

Приборы 2х типов : 1) фильтрационный флуориметр. 2) спектрофлуориметр
Условия определения анализа: Спектральная область от 250 до 800 нм, т.е. области: УФ (частично), видимую и начало ближнего ИК.

Определяемые вещества: Органические ЛВ, имеющее собственное свечение или приобретающие его в результате химических реакций: адреналин, метилтио-урацил, папаверина гидрохлорид, прогестерон, производные α-бензопирона и др.

Область применения: Установление подлинности ЛВ; определение количественного содержания ЛВ.

Измеряемая величина: Интенсивность испускаемого излучения

Расчеты: Расчетные формулы как в спектрофотометрии.

Расчеты: Расчет количественного содержания индивидуального вещества (Х):

г де Х – содержание индивидуального вещества, %;

A и AСО - оптическая плотность растворов исследуемого и стандартного образца соответственно;

С – концентрация раствора стандартного образца, г/мл;

а – точная масса лекарственного вещества, г;

V – разведение, согласно НД,мл.

• 
  В твердых лек.формах
  

г де Х – содержание индивидуального вещества, г;

MЛФ – средняя масса таблеток, драже и др.;

а – точная масса порошка растертых таблеток, драже и др., г.
г де Х – содержание индивидуального вещества, г;

а – аликвота лекарственной формы;

VЛФ – объем лекарственной формы по прописи.

Расчет количественного содержания индивидуального вещества (Х) с учетом величины удельного коэффициента светопоглощения ( ): см Е 1% 1

• 
  В субстанциях
  

г де, Х – содержание индивидуального вещества, %;см

Е1 1% - величина удельногокоэффициентасветопоглощения.

• 
  
  
• 
  В твердых лек.формах
  

где Х – содержание индивидуального вещества, г;

MЛФ – средняя масса

таблеток, драже и др.

• 
  В жидких лекарственных формах:
  

где Х – содержание индивидуального вещества, г;

а – аликвота лекарственной формы;

VЛФ – объем лекарственной формы по прописи .
Хроматографические методы

Название метода: Бумажная хроматография

1 – хроматографическая камера; 2 – резервуар с растворителем; 3 – хроматографическая бумага; 4 – стартовые точки; 5 – разделенные компоненты; 6 – фронт растворителя.

А – расстояние старт – пятно определяемого вещества;

В – расстояние старт – фронт.

Метод основан на разделении веществ

Условия определения анализа: 1. Пробы наносят специальной микропипеткой, диаметр пятна 3-4 мм; 2. использовать смесь нескольких растворителей с разной полярностью;

3. хроматографирование проводят в камерах с герметично закрытой крышкой и насыщенных парами растворителей; 4. хроматографирование заканчивается, когда фронт растворителя почти достигнет края бумаги.
Определяемые вещества: Неорганические и органические ЛВ, биологически активные вещества растений (флавоноиды, сахара и др.)
Область применения: Установление подлинности ЛВ; оценка чистоты ЛВ;

определение количественного содержания ЛВ.
Измеряемая величина: Величина Rf (Rate fraction – скорость фракции), Rs.
Расчеты: Качественный анализ:



где A – расстояния от центра пятна на пластинке до линии старта;

B – расстояние, пройденное растворителем от линии старта до финиша.



Количественный анализ:

1. Непрямое определение: вещество сначала элюируют из бумаги, а затем определяют спектрофотометрическим, люминесцентным, полярографическим м др. методами анализа.

2. Прямое определение: 2.1. сравнивают площадь пятен анализируемых веществ со стандартом (полуколичественный анализ);

2.2. используют денситометрию, основанную на измерении оптической плотности разделенных зон.
Хроматографические методы

Название метода: Хроматография в тонком слое сорбента

1 – хроматографическая камера; 2 – резервуар с растворителем; 3 – хроматографическая пластина; 4 – стартовые точки; 5 – разделенные компоненты; 6 – фронт растворителя. А – расстояние старт – пятно определяемого вещества; В – расстояние старт – фронт.

Условия определения анализа: Как в бумажной хроматографии.

Определяемые вещества: Неорганические и органические ЛВ, биологически активные вещества растений.

Область применения: Установление подлинности ЛВ; оценка чистоты ЛВ;

определение количественного содержания ЛВ.

Измеряемая величина: Величина Rf (Rate fraction – скорость фракции), Rs

Расчеты: Качественный анализ:



где A – расстояния от центра пятна на пластинке до линии старта;

B – расстояние, пройденное растворителем от линии старта до финиша.



Количественный анализ:

1. Непрямое определение: вещество сначала элюируют из бумаги, а затем определяют спектрофотометрическим, люминесцентным, полярографическим м др. методами анализа.

2. Прямое определение: 2.1. сравнивают площадь пятен анализируемых веществ со стандартом (полуколичественный анализ);

2.2. используют денситометрию, основанную на измерении оптической плотности разделенных зон.
Хроматографические методы

Название метода: Газожидкостная хроматография
1 – баллон с сжатым газом; 2 – блок подготовки газа- носителя (регулятор, измеритель, фильтр); 3 – микрошприц для введения пробы; 4 – испаритель; 5 – хроматографическая колонка; 6 – термостат; 7 – детектор; 8 – регистратор.

Условия определения анализа: 1. Неподвижная фаза – высококипящая жидкость, нанесенная в виде тонкой пленки на твердый носитель, подвижная фаза – газ; 2. газ-носитель должен быть инертным, чистым, иметь как можно меньшую вязкость, обеспечивать высокую чувствительность детектора, взрывобезопасным, доступным (гелий, азот, аргон);

3. летучесть компонентов анализируемой смеси и их устойчивость при повышенной температуре разделительной колонки.

Определяемые вещества: Лекарственные средства, биологически активные вещества растений, пищевые продукты, белки и др.

Область применения: Установление подлинности ЛВ; оценка чистоты ЛВ; определение количественного содержания ЛВ.

Измеряемая величина: Время удерживания (tR)

Расчеты: Качественный анализ:

г де tR – время удерживания;

tR0 – время пребывания вещества в подвижной фазе;

tRs – время пребывания вещества в неподвижной фазе.

Количественный анализ:

1. Метод абсолютной градуировки используют при определении не всех компонентов анализируемой смеси, а только одного или двух, (анализ примесей).

г де Wi – массовая доля определяемого компонента, %;

qi – величина пробы, мкл или мкг;

Ki – градуировочный множитель;

hi(Si) – высота (площадь) пика, мм (мм2).

2. Метод внутренней нормализации основан на том предположении, что вещества, взятые в одинаковом количестве, дают одну и ту же площадь пика, независимо от их строения. Это приближенно выполняется, если вещества химически сходны.

г де Ki – градуировочный коэффициент i-го компонента, который определяют экспериментально или используют литературные данные.
3. Метод внутреннего стандарта используют, если при анализе многокомпонентной смеси необходимо определить содержание одного или двух компонентов.

о тношение массы внутреннего стандарта в смеси к массе анализируемого вещества;

Кi, Kст, Si, Sст – градуировочные коэффициенты, площади анализируемого компонента и стандартного вещества.
Хроматографические методы

Название метода: Высокоэффективная жидкостная хроматография
1 – сосуд для элюента; 2 – насос высокого давления; 3 – устройство для ввода пробы; 4 – хроматографическая колонка; 5 – детектор;

6 – система обработки результатов, самописец; 7 – слив.
Метод основан на разделении веществ

Условия определения анализа: 1.Подвижная фаза (ПФ) – жидкость, неподвижная фаза (НФ) – тонко измельченная твердая основа, либо жидкость, нанесенная на твердую

подложку; 2. исследуемые вещества должны растворяться в ПФ, удерживаться НФ.

3. выполняется под повышенным давлением.

Определяемые вещества: Неорганические и органические ЛВ, смесь аминокислот

и белков, биологически активные вещества растений и др

Область применения: Установление подлинности ЛВ; оценка чистоты ЛВ;

определение количественного содержания ЛВ.

Измеряемая величина: Время удерживания (tR)

Расчеты: Качественный анализ:

г де tR – время удерживания;

tR0 – время пребывания вещества в подвижной фазе;

tRs – время пребывания вещества в неподвижной фазе.

Количественный анализ:

1. Метод абсолютной градуировки используют при определении не всех компонентов анализируемой смеси, а только одного или двух, (анализ примесей).

г де Wi – массовая доля определяемого компонента, %;

qi – величина пробы, мкл или мкг;

Ki – градуировочный множитель;

hi(Si) – высота (площадь) пика, мм (мм2).

2. Метод внутренней нормализации основан на том предположении, что вещества, взятые в одинаковом количестве, дают одну и ту же площадь пика, независимо от их строения. Это приближенно выполняется, если вещества химически сходны.

г де Ki – градуировочный коэффициент i-го компонента, который определяют экспериментально или используют литературные данные.
3. Метод внутреннего стандарта используют, если при анализе многокомпонентной смеси необходимо определить содержание одного или двух компонентов.

о тношение массы внутреннего стандарта в смеси к массе анализируемого вещества;

Кi, Kст, Si, Sст – градуировочные коэффициенты, площади анализируемого компонента и стандартного вещества
Хроматографические методы

Название метода: Ионообменная хроматография

1 – элюент; 2 – исследуемый раствор; 3 – катионобменник; 4 – хроматографическая колонка; 5 – коллектор для сбора фракций.

Условия определения анализа: 1. Подвижная фаза – ионные растворы (соли, кислоты и основания, буферы);

2. Неподвижная фаза – аниониты, которые имеют на поверхности положительно заряженные группы; катиониты содержат группы с отрицательным зарядом.

Метод основан на разделении веществ

Определяемые вещества: Соли органических и минеральных кислот, соли алкалоидов и азотистых оснований.
Область применения: Разделение и выделение ЛВ с последующим количественным определением продуктов ионного обмена физическим, физико-химическим или химическим методом анализа.
Измеряемая величина: Объем титранта, который пойдет на титрование продуктов ионного обмена.
Расчеты: Количественное содержание ЛВ вычисляют по формуле прямого титрования (в случае определения продуктов ионного обмена химическим методом).
Электрохимические методы

Название метода: Потенциометрия
1 – блок потенциометрической ячейки; 2 – блок автоматического титрования; 3 – бюретка с титрованным раствором; 4 – потенциометр (рН- метр, иономер); 5 – самописец; 6 – мешалка.

Метод основан на разделении веществ

Условия определения анализа: 1. Электрохимическая ячейка с индикаторным электродом и электродом сравнения, 2. Потенциал индикаторного электрода должен зависеть от концентрации определяемых ионов. 3. Потенциал электрода сравнения должен быть постоянным.
Определяемые вещества: Неорганические и органические кислоты, основания и соли (галогениды, роданиды, сульфиды), соли Mg2+, Сa2+, Al3+ , Bi3+.
Область применения: Определение рН; установление концентрации отдельных ионов
Измеряемая величина: Электродвижущая сила (ЭДС) электродной пары в точке эквисалентности.
Расчеты: Строится интегральная кривая потенциометрического титрования в координатах: потенциал индикаторного электрода (Е) - объем титранта (V). Точка перегиба на кривой отвечает точке эквивалентности. Концентрацию определяемого иона рассчитывают по формуле:



где W – концентрация определяемого иона, %;

Vаликвоты – объем аликвоты для анализа.
Электрохимические методы

Название метода: Полярография
Полярографическая установка

1 - электролизёр; 2 - сосуд с ртутью; 3 - гальванометр; 4 - передвижной контакт; 5 - реохорд; 6 - аккумулятор.
Метод основан на получении вольтамперных кривых, проводят электролиз раствора получают зависимость силы тока от приложенного к электролитической ячейке ( напряжение)
Условия определения анализа: В исследуемый раствор погружаются 2 электрода: поляризующий – капельный ртутный электрод, не поляризующийся ртутный электрод.
Определяемые вещества: Соли Cd, Pb, Cu, Zn, Sn, Hg, As, Ni, Co, Cr, Fe, Se, Mn, Mo
Область применения: Установление подлинности ЛВ; определение количественного содержания ЛВ
Измеряемая величина: Сила диффузионного тока (высота волны)
Расчеты: 1. Метод стандартных растворов:

где Сст – концентрация раствора стандартного образца; Hx – высота волны исследуемого раствора;

Hст – высота волны стандартного образца.

2. Метод добавок:

где Сст – концентрация раствора добавляемого стандартного образца; Hx – высота волны исследуемого раствора; Hст – высота волны, полученная после прибавления стандартно- го раствора. Vx – объем исследуемого раствора; Vст – объем прибавлен-ного стандартного раствора.