Основы биологической безопасностии в лабараториях. СРО№1. Ниязбеккызы Алуа. Основы биологической безопасности, испо. Ниязбеккызы АлуаФакультет общая медицинаГруппа
 Скачать 2.03 Mb.
|
|
НАО «Медицинский университет Астана» Кафедра микробиологии и вирусологии им. Ш.И.Сарбасовой СРО: Основы биологической безопасности, используемые в лабораториях. Безопасность работы с микроорганизмами I-IV групп патогенности. Выполнила: Ниязбеккызы Алуа Факультет: общая медицина Группа: 250 Проверила: Дуйсебекова Гульбану Пралиевна 2022 г. Нур-Султан 1 Мы находимся в состоянии биологической войны, но не между группами людей, а между людьми и микробами. М.И. Перельман 2 Содержание: 1. Введение. 2. Необходимость повышения уровня биологической безопасности. 3. Оценка микробиологического риска. 4. Основы биологической безопасности в лабораториях. 5. Классификация инфекционных микроорганизмов по группам риска. 6. Безопасность работы с микроорганизмами 1 и 2 группы. 7. Безопасность работы с микроорганизмами 3 группы. 8. Безопасность работы с микроорганизмами 4 группы. 9. Заключение. 10. Список использованной литературы. 3 Введение Цель микробиологических исследований - установить факт наличия или отсутствия возбудителя в организме больного и на объектах окружающей среды. Объект изучения медицинских микробиологических лабораторий - патогенные биологические агенты. ПБА — это патогенные для человека микроорганизмами и гельминты, а также любые объекты и биологические материалы, подозрительные на их содержание. Работа в бактериологической лаборатории требует соблюдения специальных правил, так как исследования проводятся с использованием культур патогенных микроорганизмов и заразного материала от больных и экспериментальных животных. Соблюдение этих правил необходимо для обеспечения не только личной безопасности, но и безопасности окружающих. 4 Биологические лаборатории, в которых изучаются патогенные биологические агенты, являются зонами повышенного биориска. Так, за последние 70 лет зарегистрировано более 5 400 лабораторных несчастных случаев , связанных с выходом в окружающую среду патогенных биологических агентов. Введение Предотвращение распространения опасных биологических агентов обеспечивается строгим соблюдением стандартных правил работы в лаборатории и техники манипуляций в сочетании с использованием первичных (безопасное оборудование) и вторичных барьеров (специальный дизайн оснащения лаборатории). 5 Термины и определения Биологическая_опасность'>Биологическая опасность- отрицательное воздействие биологических патогенов любого уровня и происхождения, создающих опасность в медико-социальной, технологической, сельскохозяйственной и коммунальной сферах Биологическая безопасность- предотвращение ущерба и достижение защищенности личности, общества и государства от потенциальных и реальных биологических угроз. Биологическая защита- обеспечение охраны, контроля и учета биологических агентов и токсинов внутри лаборатории с целью предотвращения их утери, кражи, неправильного использования, диверсии, несанкционированного доступа или преднамеренного несанкционированного высвобождения. 6 Основные источники биологической угрозы. •Эпидемии и вспышки инфекционных заболеваний •Эпизоотии •Аварии и диверсии на биологически опасных объектах •Естественные резервуары патогенных микроорганизмов •Траснграничный перенос патогенных микроорганизмов, представителей флоры и фауны, опасных для экосистем •Биологический терроризм •Применение биологического оружия 7 Объекты, на которых используются биологические агенты. микробиологические лаборатории музейные коллекции научные центры образовательные учреждения, в задачи которых входит подготовка врачей, лаборантов, биологов, технологов Производственных объектах 8 Необходимость повышения уровня биологической безопасности обусловлена: Наличием естественных резервуаров патогенных микроорганизмов в природных очагах крупных государственных и учрежденческих коллекций возбудителей Возрастанием угрозы завоза и распространения возбудителей в связи с развитием современных скоростных видов транспорта и увеличением всех видов миграции и торговли животными. Появлением новых малоизученных инфекций. Получением и применением в различных сферах деятельности микроорганизмов с искусственно измененными геномом, что может приводить к появлению неизвестных свойств у таких биологических агентов Возможностью преднамеренного использования патогенов находящихся в лабораториях, для деструктивных целей 9 Оценка микробиологического риска. В основе практики биобезопасности лежит оценка рисков. Несмотря на то, что для проведения оценки риска, связанного с установленной процедурой или экспериментом, существует целый ряд инструментов, все же самой важной составляющей остается заключение специалистов. Оценка рисков должна проводиться специалистами, которые лучше всех знают специфические характеристики организмов, на которых предполагается проводить эксперименты, применяемое оборудование и процедуры, подопытных животных, которые могут быть использованы, и изолирующее оборудование и средства. 10 Одним из самых полезных инструментов, доступных для проведения оценки микробиологического риска, является перечень групп риска , связанного с микробиологическими агентами. Патогенность агента и инфекционную дозу Потенциальные последствия инфицирования Другие пути инфицирования, вызванные манипуляциями в лабораторных условиях Стабильность агента в окружающей среде Концентрация агента и объем материалов, которые предполагается использовать в работе Доступная информация, полученная при опытах на животных, отчеты о лабораторном инфицировании или клинические отчеты Наличие подходящего «хозяина» агента Плановая лабораторная деятельность Наличие на местах эффективных профилактических и терапевтических мер вмешательства Любые генетические манипуляции с организмом, которые могут расширить ряд «хозяев» агента или изменить чувствительность агента к известными и эффективным схемам лечения 11 . выбираются соответствующие индивидуальные средства защиты. разрабатывается стандартный порядок действий (СПД). вмешательства, которые имеют целью обеспечить наиболее безопасное проведение работ. ограничить потенциальное распространение ПБА. 12 Объект изучения- патогенные биологические агенты (пба)- вирусы, простейшие, генно инженерно модифицированные организмы, яды химического происхождения (токсины), материал (кровь, биологические жидкости), эксперименты организма человека Микробиологические лаборатории В зависимости от выполняемых исследований делятся на: • Диагностические • Производственные • Научно-исследовательские В соответствии изучаемых микроорганизмов: • Бактериологические • Вирусологические • Протозоологические С возбудителями инфекционных заболеваний работают только в специализированных лабораториях, обеспечивают безопасность его персонала и невозможность «утечки» патогенных микроорганизмов за пределы лаборатории. 13 Прямой контакт с культурами микробов Манипуляции с живыми микробами Контакт с зараженными животными/людьми Загрязненное оборудование (обращаются как с «чистым»), уборка (производится персоналом который не работает в ПБА) Наиболее распространенные источники заражения в лаборатории 14 Основы биологической безопасности в лабораториях. Принцип биологической безопасности это- ограничение распространения или предотвращение утечки инфекционного материала из лабораторной среды, где с ними производят различные манипуляции или поддерживают в культуре. Целью ограничения распространения является сокращение или полное исключение воздействия потенциально опасных возбудителей на персонал лабораторий, третьих лиц и внешнюю среду. Ограничить распространение ПБА Исключить воздействие потенциально опасных возбудителей 15 Выделяют первичное и вторичное ограничение распространения ПБА: Первичное ограничение распространения - защита персонала лаборатории и непосредственно среды лаборатории от воздействия инфекционных агентов, обеспечивается использованием микробиологических методов и специального оборудования, которое гарантирует безопасную работу. Вторичное ограничение распространения - защита окружающей среды от воздействия инфекционного материала, обеспечивается комбинацией технологической конструкции лаборатории и рабочими операциями. 16 Помещения в лабораториях «Заразная зона» «Чистая зона» •Помещение для приема и регистрации материала •Боксированные помещения с предбоксами или помещения, оснащенные боксами биологической безопасности •Помещения для проведения бактериологических исследований •Помещения для проведения иммунологических исследований •Помещения для люминесцентной микроскопии •Помещения для паразитологических исследований •Помещение для паразитологических исследований •Помещение для ПЦР-диагностики •Термостатная комната •Помещение для обеззараживания материала •Моечная •Стерилизационная •Помещения для приготовления, разлива, хранения питательных сред и диагностических препаратов •Помещения для работы с документами и литературой •Кабинет заведующего •Помещения для отдыха и приема пищи •Гардероб для персонала •Туалет •Подсобные помещения 17 1-я – возбудители особо опасных инфекций, например, чумы, натуральной оспы, желтой лихорадки. 2-я – возбудители высококонтагиозных эпидемических заболеваний человека, например, сибирской язвы, бруцеллеза, малярии, сыпного тифа 3-я – возбудители инфекционных болезней, выделяемых в самостоятельные нозологические группы, например, брюшного тифа, шигеллеза, дифтерии. 4-я – условно-патогенные микроорганизмы, возбудители оппортунистических инфекций, например, клебсиеллы, протей. По степени биологической опасности все микроорганизмы делятся на 4 группы : 18 Оснащение базовой микробиологической лаборатории Микробиологическая лаборатория располагается в отдельно стоящем здании или в изолированной части здания. На окнах цокольного и первого этажей должны быть установлены металлические решетки. Также в лаборатории должна быть установлена охранная сигнализация. Лаборатория должна иметь 2 входа: один – для сотрудников, другой – для доставки материала на исследование (допускается получение материала через передаточное окно) Микробиологические лаборатории должны иметь необходимый набор помещений в соответствии с производственной мощностью и номенклатурой выполняемых исследований. В лабораториях должны быть проведены водопровод, электричество, отопление и вентиляция. В системе водоснабжения должны быть предусмотрены раздельные сети подачи воды для лабораторных исследований и бытовых нужд (сеть питьевой воды). 19 Правила работы в микробиологической лаборатории. 1. Работу в лаборатории осуществляют только в халате и шапочке 2. Не допускаются излишние разговоры и перемещения по лаборатории 3. Каждый сотрудник имеет постоянное рабочее место, где выполняет основную работу. 4. Запрещаются прием пищи и курение. 5. При работе с заразным материалом необходимо пользоваться инструментарием (бактериальные петлями, пинцетами, шпателями и т.д..) 6. Весь контаминированный материал, посуда, инструменты должны быть обязательно обеззаражены 20 7. При работе с пипетками необходимо пользоваться резиновыми грушами. 8. Работа с микроорганизмами производят только вблизи зажженной горелки, при этом обязательно обжигают края пробирок, петли, шпатели и т.д.. 9. Зажигают горелку спичкой или зажигалкой, гасят – накрывая колпачком горелки. 10. Нельзя переносить зажженную горелку с места на место, необходимо сначала потушить горелку, а на новом месте зажечь ее вновь. 11. Если вдруг заразный материал попал на окружающие предметы, необходимо провести обработку этого участка дезинфицирующим раствором. 12. После работы необходимо протереть иммерсионный объектив, привести микроскоп в нерабочее положение и обязательно вымыть руки с мылом. 21 Уровни биобезопасности Для различных групп лабораторных инфекций разработаны практические руководства, в которых описывается соответствующее оборудование для безопасного хранения биологического материала, необходимое оснащение и мероприятия, которые должен выполнять персонал лабораторий. Эти руководства называют уровнями биологической безопасности. Существует четыре уровня биобезопасности BSL-1, BSL-2, BSL-3, BSL- 4 ,которые представляют собой комбинации указаний по проведению работ в лаборатории и соответствующих методов, оборудования, обеспечивающих безопасную работу, и конструктивных особенностей лабораторных помещений. Каждая из таких комбинаций специально предназначена для проведения определенных процедур, с учетом установленного или предполагаемого пути передачи инфекционных агентов, с которыми проводится работа, и задачами лаборатории. Уровни биологической безопасности для работы с конкретными микроорганизмами, при соблюдении всех правил, обеспечивают безопасность манипуляций с инфекционным агентом Все четыре уровня биологической безопасности применяются и к манипуляциям с экспериментальными животными при изучении инфекционных заболеваний. 22 Классификация уровней биологической безопасности. В зависимости от уровня риска помещения разделены на четыре категории. BSL-4 - помещения, в которых проводят работы с микроорганизмами I группы патогенности. BSL-3 - помещения лабораторий, где проводят работы с возбудителями II группы патогенности. BSL-2 - помещения, где проводят работы с микроорганизмами IIIIV групп патогенности. BSL-1 - помещения, где проводят работы с микроорганизмами IV группы патогенности 23 Классификация инфекционных микроорганизмов по группам риска Группа риска 1 (отсутствие или низкая индивидуальная и общественная опасность) Микроорганизм, который потенциально не является возбудителем болезней человека или животных. Группа риска 2 (умеренная индивидуальная опасность, низкая общественная опасность) Патогенный микроорганизм, который может вызвать заболевание у человека или животных, но не представляет серьезного риска для лабораторного персонала, населения, домашнего скота или окружающей среды. Неосторожность в лаборатории может вызвать серьезную инфекцию, однако существуют доступные лечебные и профилактические меры и риск ее распространения ограничен. Группа риска 3 (высокий индивидуальный и низкий общественный риск) Патогенный агент, который обычно вызывает серьезное заболевание человека или животных, однако, как правило, не распространяется от больного к здоровому. Существуют эффективные лечебные и профилактические меры. Группа риска 4 (высокий индивидуальный и общественный риск) Патогенный агент, который обычно вызывает серьезные заболевания у человека или животных и легко распространяется от больного к здоровому прямо или опосредованно. Эффективных лечебных и профилактических мер в большинстве случаев нет. 24 Безопасность работы с микроорганизмами 1 и 2 группы. Принципы наблюдения сотрудников, работающих с микроорганизмами на 1-ом уровне биологической безопасности. Как показывает опыт, работа с микроорганизмами на данном уровне не вызывает заболеваний человека или инфекции лабораторных животных ветеринарного значения. Однако в идеале до принятия на работу всем работникам лаборатории следует проходить медицинское обследование с регистрацией истории болезни. Также желательно обеспечить получение оперативной информации о заболеваниях и происшествиях; в этих целях до сведения всех сотрудников лаборатории необходимо довести важность соблюдения НТМ. 25 Доступ 1. На дверях комнат, где проводятся работы с микроорганизмами группы риска 2, должен быть изображен международный знак биологической опасности. 2. В рабочую зону лаборатории должны допускаться лишь лица, имеющие соответственное разрешение. 3. Двери лаборатории следует держать закрытыми. 4. В рабочих зонах лаборатории недопустимо пребывание детей. 5. Допуск в виварий разрешается только специальному персоналу. 6. Животных, с которыми не проводится непосредственная работа, следует держать вне лаборатории. 26 Защита персонала 1. Для работы в лаборатории всегда следует носить специальную одежду или халаты. 2. При всех процедурах, которые могут сопровождаться прямыми или случайными контактами с кровью, жидкостями организма и другими потенциальными инфекционными материалами или зараженными животными, следует надевать специальные перчатки. После их использования перчатки следует снимать асептически и мыть руки. 3. Работники лаборатории должны мыть руки каждый раз после манипуляций с инфицированными материалами и животными, а также в конце рабочего дня. 4. При необходимости предохранить глаза и лицо от брызг, попадания инфицированного материала и источников искусственной и ультрафиолетовой радиации следует надевать защитные очки, лицевые щитки или другие защитные средства. 5. Носить защитную одежду вне лабораторных помещений, а именно в столовой,буфете, служебных помещениях, библиотеках, комнатах персонала и туалетахзапрещается. 6. В лабораториях нельзя носить обувь с открытыми носками. 7. В лабораторной зоне не разрешается принимать пищу и пить, курить, применять косметические средства и использовать контактные линзы. 8. В рабочей зоне лаборатории хранение пищи и напитков запрещено.9. Защитная лабораторная одежда не должна храниться в тех же шкафчиках или ящиках, что и личная. 27 Процедуры: 1. Пипетирование ртом должно быть строго запрещено. 2. Материалы нельзя брать в рот, наклейки нельзя лизать. 3. Все технические процедуры следует проводить таким образом, чтобы свести к минимуму возможность образования аэрозолей. 4. Использование шприцев и игл должно быть ограничено. Их использование для забора содержимого из емкостей или в других целях (помимо использования для парентеральных инъекций и аспирации жидкости у лабораторных животных) должно быть запрещено. 5. О всех случаях разлития инфекционного материала, ситуациях, чреватых неопределенными последствиями, подозрениях о наличии контакта с инфекционными материалами следует немедленно докладывать руководителю лаборатории. Необходимо подготовить письменный отчет о происшествии. 6. Необходимо разработать и соблюдать письменную процедуру очистки после разлития любых инфекционных материалов. 7. Инфицированные жидкости должны быть обеззаражены (химическим или физическим путем) до их сброса в систему канализации. В зависимости от оценки риска, проведенной для используемых патогенных агентов, может потребоваться соответствующая система очистки сточных вод. 8. Письменные документы, которые, как ожидается, будут использоваться вне лаборатории, должны быть защищены от инфекции на территории самой лаборатории. 28 Основные оборудования по биобезопасности: 1. Приспособления для пипетирования – для исключения пипетирования ртом. Существует множество различных конструкций. 2. Боксы для обеспечения биологической безопасности 3. Одноразовые пластиковые петли для пересева. В качестве варианта, с целью снизить возможность образования аэрозолей в биобезопасных боксах можно использовать электрические мусоросжигатели для уничтожения петель для пересева. 4. Сосуды и пробирки с завинчивающимися крышками. 5. Автоклавы или соответствующие средства для деконтаминации зараженных материалов. 6. Одноразовые пластиковые пастеровские пипетки, используемые, по возможности, вместо стеклянных. 7. Такое оборудование, как автоклавы и боксы биологической безопасности, должно быть, до введения в эксплуатацию, сертифицировано с помощью соответствующих методов. 29 Безопасность работы с микроорганизмами 3 группы. Руководящие принципы, приведенные в этой главе, представлены в форме дополнения к правилам для базовых лабораторий 1-го и 2-го уровня биологической безопасности. Таким образом, необходимо в первую очередь руководствоваться этими правилами и лишь затем правилами для уровня биологической безопасности 3. Применим кодекс практики для базовой лаборатории 1-го и 2-го уровня биологической безопасности со следующими изменениями: 1. На дверях рабочих помещений лаборатории вывешивают международные знаки и символы, предупреждающие о биологической опасности с указанием уровня биологической безопасности и фамилии руководителя лаборатории, осуществляющего контроль за доступом, а также особых условий входа в лабораторию (иммунизация и т.д.). 2. В лаборатории необходимо носить специальную одежду типа закрытых спереди халатов, рабочие костюмы, спецодежду, шапочки, при необходимости, бахилы или специально предназначенную обувь. Стандартные застегивающиеся спереди халаты нежелательны, в том числе с короткими рукавами. Лабораторную одежду запрещается носить вне лаборатории, перед стиркой она подлежит деконтаминации. Снятие личной одежды и переодевание в специально предназначенную лабораторную одежду вполне оправдано при работе с некоторыми патогенными агентами (например, с сельскохозяйственными и зоонозными агентами). 3. Открытая манипуляция со всеми потенциально инфекционными материалами должна проводиться в биологически безопасных боксах или других первичных изоляционных приспособлениях 4. При необходимости, в помещениях, где содержатся животные, инфицированные некоторыми патогенными агентами, следует надевать защитные респираторные приспособления 30 Лабораторное оборудование Принципы выбора оборудования, включая боксы биологической безопасности те же, что и в случае базовой лаборатории 2-го уровня биологической безопасности. Тем не менее, на 3-м уровне биологической безопасности манипуляции со всеми потенциально инфекционными материалами должны проводиться в боксах биологической безопасности или других первичных изоляционных устройствах. Особое внимание следует уделять такому оборудованию, как центрифуги , для которых требуются дополнительные изоляционные приспособления, например, защитные кожухи или изоляционные роторы. Для некоторых центрифуг или другого оборудования, например, для инструментов, используемых для сортировки инфицированных клеток, может понадобиться дополнительная система вентиляции, обеспечивающая отток воздуха и оснащенная HEPA-фильтрами и другими эффективными средствами изоляции. 31 Медицинский контроль и наблюдение за здоровьем. Программы медицинского контроля и наблюдения за здоровьем персонала для базовой лаборатории 1-го и 2-го уровня биологической безопасности также применимы для изолированных лабораторий 3-го уровня биологической безопасности, за некоторыми изложенными ниже исключениями: 1.Медицинское обследование всего персонала, работающего в изолированной лаборатории 3-го уровня биологической безопасности, является обязательным. Это обследование включает регистрацию данных, относящихся к истории болезни, и медицинский осмотр. 2.После получения удовлетворительных результатов медицинского обследования обследуемый должен получить карточку экстренной консультации, удостоверяющую, что он работает в изолированно лаборатории 3-го уровня биологической безопасности. Карточка (с фотографией ее владельца) изготавливается в формате бумажника. Владелец карточки должен постоянно иметь ее при себе. Перечень вносимых в карточку лиц, с которыми можно связаться, устанавливается в рабочем порядке и может включать заведующего лабораторией, консультирующего врача и ответственного за технику безопасности. 32 Безопасность работы с микроорганизмами 4 группы. Максимально изолированная лаборатория 4-го уровня биологической безопасности предназначена для работы с микроорганизмами группы риска 4. Строительству максимально изолированных лабораторий и их вводу в эксплуатацию должны предшествовать тщательные консультации с учреждениями, имеющими опыт работы с такими лабораториями. Деятельность максимально изолированных лабораторий находится под контролем национальных и других органов здравоохранения, имеющих отношение к данному вопросу. Кодекс практики для уровня биологической безопасности 4 соответствует кодексу практики для уровня биологической безопасности 3 со следующими дополнениями: 1. Необходимо применять правило «работы в парах», согласно которому в лаборатории не допускается работа в одиночку. Это особенно важно при работе в лаборатории 4-го уровня биологической безопасности с использованием изолирующих средств индивидуальной защиты. 2. Перед тем как войти в лабораторию или выйти из нее сотрудники должны полностью переодеться и переобуться. 3. Сотрудники должны быть обучены мерам аварийной эвакуации в случае индивидуальных травм или болезни. 4. Для повседневной работы необходимо установить систему связи между персоналом, работающим в максимально изолированной лаборатории 4-го уровня биологической безопасности, и вспомогательным персоналом вне лаборатории. 33 Заключение Высокий уровень профессиональной подготовки персонала микробиологических лабораторий, знание потенциальных источников и причин возможного заражения позволят снизить профессиональный риск для сотрудников при осуществлении деятельности, связанной с изучением свойств микроорганизмов возбудителей инфекционных заболеваний бактериальной природы. К видам аварий в лаборатории относятся: несчастный случай (проливания, разбрызгивания, порезы и бой посуды, укусы и царапины, аспирация пипеткой и др.); разбрызгивания при обслуживании животных; контакт с загрязненными клиническими образцами; контакт с отработанной посудой; вскрытие лабораторных животных; преднамеренное инфицирование; выделение вредных аэрозолей. В зависимости от масштаба распространения возбудителя аварии подразделяются на местные и корпусные. Правила работы в микробиологических лабораториях включают обязательную работу в медицинских халатах, шапочках и сменной обуви, в необходимых случаях – в масках из марли, запрет курения и приема пищи, отсутствие личных вещей и порядок на рабочем месте, обработка дезраствором при случайном попадании заразного материала на поверхности, выполнение инструкций по хранению, наблюдению за культурами и их уничтожению. Выделяют 4 уровня защиты (биологической безопасности), каждый из которых состоит из первичных и вторичных барьеров и особенностей микробиологических процедур. Первый уровень соответствует минимальному риску инфицирования; работа с микроорганизмами 4 класса патогенности требует соблюдения максимальных мер предосторожности. 34 Список использованной литературы: Основы биологической безопасности: принципы и практика: учебно- методическое пособие / Р.В. Боровик, Г.А. Дмитриев, Л.В. Коломбет, Д.Д. Победимская, Ю.В. Ремнев, Е.А. Тюрин, Н.А. Федоров. – М.: Медицина для вас, 2008. – 303 с. Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях. ВОЗ, 2004 г. – 201 с. Тюрин Е.А. Профессиональный риск сотрудников микробиологических лабораторий и меры по его снижению. / Е.А. Тюрин, Л.В. Чекан, Л.И. Маринин, И.А. Дятлов // Анализ риска здоровью. – 2014. – С. 44-49. СП 1.3.2322-08. Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней. Санитарно-эпидемиологические правила СП 1.3.2322-08 (с изменениями на 29 июня 2011 года). Современные принципы биологической безопасности в лабораторных условиях. http://biotech.sfu-kras.ru/files/205_Biosafety-lecture-Netesov- 2012-02.pdf. С. 2-12. 12.03.2020 35 |