Соп. СОП_ПАО_12_4_Заливка_в_парафин_операционного_биопсийного_и_ауто. Соп пао 12. 4 Заливка в парафин операционногобиопсийного и аутопсийного материала

• Название: Соп пао 12. 4 Заливка в парафин операционногобиопсийного и аутопсийного материала
• Дата: 07.04.2023
• Размер: 0.89 Mb.
• Имя файла: СОП_ПАО_12_4_Заливка_в_парафин_операционного_биопсийного_и_ауто.docx
• Тип: Документы; #1044577

Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы

«Городская клиническая больница №40

Департамента здравоохранения города Москвы»
Утверждено

Приказом Главного врача

ГБУЗ «ГКБ №40 ДЗМ»

Проценко Д.Н.

от «___» апреля 2021г. №______

СОП ПАО 12.4 Заливка в парафин операционного/биопсийного и аутопсийного материала.

Москва, 2021

4. 
   СОП ПАО–00.00. Правила заливки операционного и биопсийного биоматериала в патологоанатомическом отделении ГБУЗ ГКБ № 40 ДЗМ
   

Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы «Городская клиническая больница №40 Департамента здравоохранения города Москвы»						СТАНДАРТНАЯ ОПЕРАЦИОННАЯ ПРОЦЕДУРА		НОМЕР: 1
								ЛИСТ 1 Всего листов: 13
12.4 НАЗВАНИЕ: Правила заливки операционного и биопсийного биоматериала в патологоанатомическом отделении.								Подразделение: патологоанатомическое отделение
ДЕЙСТВУЕТ С:						ЗАМЕНЯЕТ:	ПРИЧИНА	ДАТА СЛЕДУЮЩЕГО ПЕРЕСМОТРА:
							ПЕРЕСМОТРА:
						ВВОДИТСЯ ВПЕРВЫЕ:
СОСТАВИЛ							УТВЕРДИЛ
Медицинский лабораторный техник патологоанатомического отделения							Заведующий патологоанатомическим отделением
							Авдалян А.М.
Юнусов Т.Ю.
							«»20г.
«»20г.

1. 
   Область применения.
   

Относится к области патологоанатомических исследований и применима для внутреннего контроля качества при заливке в парафин операционного/биопсийного и аутопсийного материала в патологоанатомическом отделении.

2. 
   Нормативные и методические ссылки.
   

1) Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 6 июня 2013 г. N 354н.

2) Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 24 марта 2016 г. N 179н.

3) М. А. Пальцев, П. Г. Мальков, Г. А. Франк Стандартные технологические процедуры при морфологическом исследовании биопсийного и операционного материала: Руководство // Архив патологии. – 2011. – Т.73. – Приложение. – 114 с.

2. 
   Определения и сокращения.
   

Объект – тканевой образец, иссеченный фрагмент органа (ткани).

Заливка – технология изготовления парафиновых блоков с помещением фиксированного образца ткани в парафин для его дальнейшей микротомии.

Парафин – специализированный расходуемый материал для гистологии, представляет собой высокоочищенную, гомогенизированную смесь тугоплавких парафинов и пластификаторов, предназначен для гистологической проводки и заливки тканевых образцов.

Парафиновый блок – фрагмент застывшего парафина, смонтированный на гистологической кассете или заливочной форме и содержащий тканевой образец.

2. 
   Специалисты, выполняющие процедуру.
   

1. 
   Требования к специалистам и вспомогательному персоналу.
   

Специалисты, осуществляющие процедуру, должны иметь среднее профессиональное образование по специальности "Гистология", без предъявления требований к стажу работы.

Специалисты лаборатории осуществляют технологический процесс заливки в парафин гистологического материала (тканевых фрагментов), строго следуя правилам и алгоритмам, изложенным в настоящей СОП, информируют ответственного за контроль качества, старшего лаборанта, заведующего патологоанатомическим отделением о любом несоответствии и препятствиям в реализации алгоритма процедуры заливки.

2. 
   Перечень специальностей/кто участвует в выполнении процедуры.
   

Медицинский лабораторный техник, медицинский технолог.

2. 
   Требования к обеспечению безопасности труда медицинского и сопутствующего персонала.
   

Регулируются следующими нормативными актами:

1. Трудовой кодекс Российской Федерации от 30.12.2001 N 197-ФЗ (ред. от 31.07.2020) (с изм. и доп., вступ. в силу с 13.08.2020)

2. Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 18.05.2010 N 58 (ред. от 10.06.2016) "Об утверждении СанПиН 2.1.3.2630-10 "Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность" (вместе с "СанПиН 2.1.3.2630-10. Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы...") 

1. 
   Внутренние приказы ЛПУ о проведении инструктажей по безопасности и охране труда.
   

2. 
   Функциональное назначение процедуры.
   

Изготовление парафиновых блоков с помещением фиксированого образца ткани в парафин с присвоением каждому блоку своего уникального номера (маркировкой блока).

2. 
   Материальные ресурсы.
   

7.1. Приборы, инструменты, изделия медицинского назначения.

1. 
   Заливочная станция Thermo Histo Star
   
2. 
   Пинцет, бранш-щипцы
   
3. 
   Металлические заливочные формы следующих размеров (в мм): 15х15, 18х18, 24х24, 24х30, 24х35.
   
4. 
   Перчатки медицинские, халаты медицинские
   
5. 
   Лоток для отходов.
   

2. 
   Реактивы
   

1. 
   Парафин, готовый к употреблению, с температурой плавления 56-58°С.
   

2. 
   Учётная медицинская документация
   

1. 
   Бланки направлений на прижизненное патологоанатомическое исследование биопсийного (операционного) материала (форма №014/у).
   
2. 
   Протокол макроскопического описания биологического материала с маркировкой тканевых образцов.
   
3. 
   Журнал замены химических реактивов
   

2. 
   Описание методики выполнения процедуры
   

Рис. 1. Схема заливочной станции Thermo Histo Star: I – бак для парафина, II – отсек для хранения заливочных форм, III – резервуар для кассет, IV – лоток для хранения прессов, V - горячая точка, VI – пинцетный блок , VII – регулятор расхода парафина, VIII - горячий тример для отчистки кассет от парафина, IX – холодная точка, X – плата охлаждения парафиновых блоков, XI – сенсорный экран, XII – стол для залитых парафиновых блоков.

1. 
   Подготовить заливочную станцию к работе (заливочная станция настроена таким образом, что каждое утро она автоматически включается в 7:00):
   

1. 
   Убедиться, что заливочный аппарат включен: на центральном дисплее должен гореть индикатор «ВК» (см. рис. 1 (XI))
   
2. 
   Проверить рабочую температуру, необходимую для заливки: на центральном дисплее в левом нижнем углу необходимо нажать поле «Статус», после чего на дисплее отобразится температура бака и резервуара. Температура должна быть на 2-3°С больше, чем температура плавления используемого парафина (58-63°С).
   
3. 
   Проверить уровень парафина в баке для парафина (рис. 1(I)).
   
4. 
   Проверить уровень парафина в резервуаре для кассет (рис. 1(III)).
   
5. 
   Проверить резервуар для кассет на отсутствие загрязнений (фрагменты тканей, свободно плавающие в парафине, инородные частицы).
   

2. 
   Подготовить образцы, требующие заливки, к работе:
   

2.1 Материал, прошедший этап «проводка», поместить в резервуар для кассет, не вскрывая крышки.

2.2 Если материал был залит в парафин ранее, и требуется его перезаливка, данный блок необходимо поместить в заливочную форму подходящего размера и аккуратно погрузить в резервуар для кассет. К заливке необходимо приступить после полного расплавления парафинового блока.

3. 
   Проверить температуру подогреваемой части заливочного комплекса и резервуара для кассет (данное действие выполняется регулярно в течение всего процесса заливки тканевых образцов) (см. выше п.п. 1.2.).
   
4. 
   Выбрать заливочную форму, соответствующую по размеру образцу ткани – от краёв тканевого фрагмента до стенок заливочной формы должно быть расстояние не менее 2 мм.
   

Для заливки следует использовать чистые, сухие заливочные формы, не содержащие остатков парафина от предыдущих заливок.

5. 
   Поместить заливочную форму на подогреваемой поверхности (горячая точка) заливочного комплекса и прогреть ее до температуры плавления парафина (рис. 1 (V)).
   
6. 
   Налить парафин в заливочную форму, чтобы заполнить только углубление для кусочка. Парафин должен оставаться расплавленным
   

Если по краям или дну формы появляются белесоватые фокусы застывания парафина – значит форма недостаточно прогрета, и ее следует оставить на горячей поверхности до тех пор, пока весь налитый в нее парафин не расплавится полностью.

7. 
   Извлечь одну кассету с материалом из резервуара для кассет и разместить ее основанием вниз на горячей поверхности.
   
8. 
   Открыть кассету, и крышку выбросить в рядом стоящий лоток для отходов.
   
9. 
   Осторожно пинцетом взять кусочек и аккуратно перенести его в заливочную форму с расплавленным парафином, стараясь как можно меньшее время держать его на открытом воздухе.
   

Предпочтительно ориентировать кусочек по центру заливочной формы. Так же важно соблюдать следующие правила ориентации тканевых фрагментов: Вытянутые фрагменты ориентируются наискосок, кожа должна оринтироваться подкожной жировой клетчаткой в сторону лезвия для микротомии, органы желудочно-кишечного тракта – серозной оболочкой в сторону лезвия для микротомии.

Если образец помещен в кассету в специальных прокладках или в биопсийных мешочках, обязательно проверить внутреннюю сторону прокладок на наличие остатков материала. Если к прокладке прилипли мелкие фрагменты ткани, необходимо аккуратно снять их и поместить в кассету с образцом. Отработанную прокладку необходимо выбросить в лоток для отходов.

10. 
    Подготовить основание для блока и проверить его маркировку. В один блок следует заливать только один тканевой фрагмент (исключением может быть фрагментированный материл трансуретральных резекций и материал соскобов из полости матки/шейки матки).
    

Перед монтажом блока основание также следует держать нижней поверхностью на подогреваемой поверхности прибора.

11. 
    Все манипуляции с кусочком в заливочной форме следует производить горячим пинцетом, не допуская даже частичного застывания парафина. Если кусочек имеет малые размеры и может быть сдвинут струей парафина при заполнении блока – его можно зафиксировать к дну заливочной формы легким «подмораживанием», для чего форму на одну (не более!) секунду можно переместить на охлаждающую поверхность заливочной станции (рис. 1д).
    
12. 
    Установить основание блока сверху заливочной формы так, чтобы верхняя кромка залитого в него парафина покрывала пластиковую решетку основания.
    
13. 
    Зафиксировать основание блока в заливочной форме можно переместив форму на одну (не более!) секунду на охлаждающую поверхность заливочной станции.
    

Это также позволит «подморозить» края прилегания основания к металлической заливочной форме и предотвратить вытекание парафина из блока до его застывания.

14. 
    Заполнить расплавленным парафином основание блока до 3/4 объема внутренней полости и переместить блок на охлаждающую поверхность заливочной станции.
    
15. 
    Дождаться полного застывания парафина. Заливочные формы должны отделяться от застывшего блока легко, без усилий.
    
16. 
    Отметить в лабораторной информационной системе LabForce. Сравнить нумерацию и фамилии на блоках с количеством, указанным в программе. Выделить все блоки и нажать кнопку «залить». Рис.2.
    

2. 
   Требования к сроку выполнения процедуры
   

Процедура заливки материала в парафин должна производиться сразу после окончания этапа проводки данного материала.

Процедура заливки, ввиду высокого уровня рабочего напряжения на данном этапе, должна ограничиваться 4 часами от момента начала процедуры для каждого исполнителя, с последующей сменой состава исполнителей по производственной необходимости.

Процедура должна начинаться не позднее, чем в 8:30, для сохранения этапности организации трудового процесса в лаборатории.

2. 
   Промежуточные результаты и их оценка
   

Парафиновый блок с залитым в центре объектом, сохраняющим форму, с полностью застывшим парафином, однородного вида, без воздушных полостей.

2. 
   Параметры оценки и контроля качества
   

1. 
   Парафиновый блок должен иметь гладкую, ровную поверхность без дефектов.
   
2. 
   Кусочек в блоке должен быть расположен максимально близко к поверхности реза, и возможно более точно к середине площадки.
   
   
   не правильно
   
3. 
   Застывший парафин в блоке должен иметь однородный вид, без трещин, зон уплотнений, разрежений и воздушных полостей. Особо следует обращать внимание на отсутствие трещин или белесоватых «ореолов» вокруг кусочка в блоке.
   
4. 
   Блок должен иметь достаточно много парафина в основании, чтобы не отломиться при микротомии.
   
5. 
   На блоке не должно быть посторонних потеков парафина за пределами основания или заданной формы. При наличии таких потеков их следует аккуратно срезать скальпелем/ножом.
   
6. 
   Маркировка блока должна быть четкой и хорошо различимой, не смазанной и не залитой парафином.
   

2. 
   Выявление дефектов при заливке операционного/биопсийного или аутопсийного материала в парафин
   

Дефект	Возможные причины	Способ устранения
Неправильная ориентация образца	Нет доступа к макроскопическому описанию образца Изменение ориентации образца при его извлечении из кассеты Изменение ориентации образца от сильной направленной струи парафина	Лаборант должен иметь доступ к макроскопическому описанию материала с целью уточнения характера образца. При перемещении образца в заливочную форму, необходимо сохранять его ориентацию (как в исходной кассете). Поверхность кусочка, располагавшаяся на дне кассеты, должна оказаться и на дне заливочной формы. При возникновении затруднений при ориентации материала лаборант должен обратиться за помощью к коллегам в лаборатории, старшему лаборанту, либо к врачу, производившему вырезку материала/любому другому врачу отделения.
Образец занимает всю площадь парафинового блока с участками, расположенными непосредственно в краях парафинового блока	Выбран неподходящий размер заливочной формы	Образец не должен вплотную соприкасаться с краями заливочной формы. Необходимо выбирать заливочные формы, подходящие под размер конкретного образца.
Механическое повреждение образца	Слишком сильное придавливание образца ко дну заливочной формы с его размозжением и деформацией пинцетом	Аккуратное выполнение манипуляции, использование специальных пластиковых пинцетов для прижатия образца.
Термическое повреждение образца	Не проверялась регулярно температура нагреваемой части заливочного комплекса и резервуара с парафином.	Регулярная проверка температуры нагреваемой части заливочного комплекса и резервуара с парафином.
Переливание объема парафина в кассету во время заливки	Избыточное количество парафина вызывает его затекание между кассетой и формой. Потеки парафина на наружних стенках кассеты приводят к том, что кассеты с потёками парафина не плотно фиксируются в держателе для кассет микротома. Это в свою очередь приводит к нестабильности блока, низкому качеству срезов и возможности повреждения образца при микротомии.	При заливке в кассету следует наливать ровно столько парафина чтобы заполнить ее до краев. Если потёки на наружних сторонах гистологической кассеты всё же образовались, то их необходимо аккуратно удалить скальпелем.
Нечитаемая/ неаккуратная маркировка	Нечитаемая/неаккуратная маркировка может привести к утрате информации об образце	Маркировка должна производиться подходящими маркировочными материалами, аккуратно и четко; должны учитываться возможности применения лабораторной информационной системы и маркировка кассетным принтером.
Образование полостей в парафиновом блоке	Образование воздушных пузырей (полостей) в парафиновом блоке может привести к повреждению образца при микротомии. Полости образуются при долгом нахождении заливочной формы с образцом (более 1 секунды) на холодной поверхности заливочного комплекса с последующим добавлением горячего парафина в форму. Кроме того, возможно образование полостей при недостаточном нагреве парафина при заполнении основания блока. Недостаточно нагретый парафин не проникает через решетку основания блока, что ведет к неполному заполнению пространства внутри заливочной формы и, как следствие, образованию полостей.	Не держать образец с заливочной формой на холодной поверхности заливочного комплекса более 1 секунды. Перед заливкой необходимо убедиться, что температура парафина в баке и резервуаре соответствует рабочей, то есть на 2-3С выше, чем температура плавления используемого парафина (58-63°С).

Приложение 1

Лист регистрации дополнений и изменений

Версия документа	Описание внесенных изменений	Дата

Приложение 2

Лист ознакомления

Наименование подразделения _______________________________________

№	Должность	ФИО	Подпись	Дата

Лист ознакомления

Наименование подразделения _______________________________________

№	Должность	ФИО	Подпись	Дата

Лист ознакомления

Наименование подразделения _______________________________________

№	Должность	ФИО	Подпись	Дата