микробиология. герцик. Стерилизация и пастеризация Объекты стерилизации
Скачать 1.42 Mb.
|
Стерилизация и пастеризацияОбъекты стерилизацииМикробиологическая посуда (пробирки, чашки Петри, колбы и т.д.) Среды для выращивания микроогранизмов Боксы и помещения, в которых ведут работу с микробиологическими объектами Отработанные материалы (наконечники, чашки Петри, мазки и т.д.) Виды стерилизации:насыщенный высокотемпературный водяной пар (стерилизация паром), сухой горячий воздух (стерилизация жаром) газ (стерилизация газовая), (например этиленоксид – бесцветный газ) химические вещества (стерилизация химическая), 2 %-ного щелочного водного раствора глютаральдегида и 20 %-ного раствора формальдегида в 70 %-ном этаноле. радиационный метод (лучевая стерилизация), фильтрование через мелкопористые фильтры (механическая стерилизация), многократное прогревание жидкостей на водяной бане при 1000С (дробная стерилизация) или 560С (тиндализация), . Термическое – обжигание и кипячение, однократное прогревание при 1000С облучение УФЛ не относятся к методам стерилизации, так как не обеспечивают полного уничтожения микроорганизмов, особенно спор. Стерилизация паром (автоклав)Воздействие – температура, давление пара Температура стерилизации 100–145°C Давление пара 0,4-2,5 атмосферы Упаковка: биксы, крафт-пакеты, бумага-ламинат, бязь. Материалы: полимеры, стекло, латекс, ткань, коррозийностойкие металлы. Достоинства: высокая проницаемость пара, большой выбор упаковки, дольше сохраняется стерильность, дешевый и простой в использовании метод. Недостатки: увлажнение изделий, вызывает коррозию металлов. Стерилизация жаромУсловия стерилизации: при 180 0С – 1/2 ч, при 170 0С – 1 ч, при 160 0С – 2 ч, при 150 0С – 2,5 ч, при 140 0С – 3 ч, при 120 0С – 6 ч. Упаковка: крафт-пакеты, бязь. Материалы: металл, текстильные изделия. Достоинства: дешевый, простой метод, не вызывает коррозии металла, не происходит увлажнения упаковки и изделий. Недостатки: ограниченный выбор упаковки, медленное и неравномерное прогревание изделий, необходимость использования более высоких температур, невозможность использовать материалы из резины, полимеров. Газовая стерилизацияСтерилизующий агент – формальдегид или этилен-оксид. Упаковка: бумага-ламинат, пергамент, крафт-бумага. Материалы: полимеры, стекло, металл. Достоинства: невысокая температура, использование любых материалов. Недостатки: токсичность для персонала и взрывоопасность при несоблюдении техники безопасности, продолжительный цикл стерилизации. Радиационный методнеобходим для стерилизации изделий из термолабильных материалов.Стерилизующий агент – ионизирующие γ и β излучения.Упаковка: помимо бумажных используют пакеты из полиэтилена. Достоинства: надолго сохраняется стерильность в упаковке. Недостатки: дороговизна метода. Радиационный – основной метод промышленной стерилизации. Используется предприятиями, выпускающими стерильные изделия однократного применения. Бактериальная фильтрацияМетод состоит в отделении микроорганизмов от жидкости с помощью стерильных микропористых фильтров. Механизм фильтрации объясняется главным образом адсорбцией микробов, происходящей в порах фильтрующих материалов, которые в большинстве случаев заряжены отрицательно. В качестве микропористого фильтрующего материала используют каолин, фарфор, бумажно-асбестовую массу, инфузорную землю, коллодий и другие пористые материалы, а также стекло. Широкое применение находят микропористые фильтры на химико- фармацевтических заводах и при производстве вакцин и сывороток. КипячениеОднократное нагревание до температуры 1000С.Тиндализация —способ стерилизации, предложенный Дж. Тиндалем. Он заключается в дробном нагревании жидкостей (как правило, в течение 1 часа) от трёх до пяти раз с промежутками в 24 ч. За это время споры бактерий, выжившие при 100 °С, прорастают, и вышедшие из них вегетативные клетки бактерий погибают при последующем нагревании. ПастеризацияТепловая обработка:при температуре 65 0С в течение 30 минут, 75 0С 15-40 секунд, 85 0С 8-10 секунд. При пастеризации молока погибают практически все болезнетворные микроорганизмы, но остаются термостойкие молочнокислые УльтрапастеризацияДля молока - сначала подвергают кратковременному воздействию высокой температуры — 135 0С в течение 3-4 секунд, а затем медленно охлаждают до 4-5 0С и разливают в стерильную упаковку. Такое молоко практически не теряет своих полезных качеств, может храниться до 2 месяцев (разумеется, в упаковке). Контроль стерилизации:1. Физический контроль, состоящий в визуальном и инструментальном контроле за всеми параметрами стерилизации. Измерительная аппаратура должна периодически контролироваться в государственном метрологическом учреждении. 2. Химический контроль, проводимый с помощью индикаторов, изменяющих цвет или плавящихся при достижении определенного уровня температуры, влажности, концентрации стерилизанта. Существуют наружные индикаторы в виде стерилизационной ленты (окрашенной или нет) и внутренние химические индикаторы. 3. Биологический контроль непосредственно указывает, произошло уничтожение микроорганизмов в процессе стерилизации или нет, то есть стерилен или нестерилен объект. Для паровой стерилизации в качестве биологического индикатора используют споры В. stearothermophilus, для стерилизации этиленоксидом – В. subtilis. Химический контрольИндикаторы 1-го класса являются индикаторами («свидетелями») процесса. Примером такого индикатора является термоиндикаторная лента Химический контроль2-й класс индикаторов предназначен для использования в специальных тестовых процедурах, например, при проведении теста Бовье-Дика (Bowie-Dick test). Этот тест не контролирует параметры стерилизации, он оценивает эффективность удаления воздуха из камеры парового стерилизатора. Химический контрольИндикаторы 3-го класса являются индикаторами одного параметра. Они оценивают максимальную температуру, но не дают представления о времени ее воздействия. Химический контроль4-й класс - это многопараметровые индикаторы. Они содержат красители, изменяющие свой цвет при сочетанном воздействии нескольких параметров стерилизации, чаще всего — температуры и времени. Примером таких индикаторов служат термовременные индикаторы для контроля воздушной стерилизации. |