Существует несколько способов ПОЛУЧЕНИЯ ЦЕРЕБРОСПИНАЛЬНОЙ ЖИДКОС. Субокципитальный прокол мозжечковомедуллярной цистерны

• Название: Субокципитальный прокол мозжечковомедуллярной цистерны
• Дата: 12.06.2020
• Размер: 32.55 Kb.
• Имя файла: Существует несколько способов ПОЛУЧЕНИЯ ЦЕРЕБРОСПИНАЛЬНОЙ ЖИДКОС.docx
• Тип: Документы; #129759

Существует несколько способов ПОЛУЧЕНИЯ ЦЕРЕБРОСПИНАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ. Наиболее безопасным из них является люмбальная пункция или поясничный прокол конечной цистерны.

Субокципитальный прокол мозжечково-медуллярной цистерны производится под остистым отростком второго шейного позвонка; имеет большее количество противопоказаний и возможных осложнений.

Вентрикулярная пункция переднего рога бокового желудочка – это скорее лечебный метод (применяется с целью уменьшения внутричерепной гипертензии), чем диагностический. У детей до 1 года пункцию производят через большой родничок.

Люмбальная пункция– наиболее безопасный метод получения ликвора. Производится в положении больного лежа на боку с согнутыми в тазобедренных и коленных суставах ногами, голова пригнута до соприкосновения подбородка с грудиной. Такое положение применяется для того, чтобы выступали остистые отростки поясничных позвонков, и увеличивалось расстояние между ними.

Для определения места прокола проводится воображаемая линия Якоби (соединяет наиболее возвышающиеся точки гребней подвздошных костей). Она проходит в промежутке между остистыми отростками позвонков L_III - L_IV. Здесь нет спинного мозга, а в конечной цистерне плавают корешки спинномозговых нервов (конский хвост). Специальной иглой с мандреном после обработки кожи и местного обезболивания прокалывают кожу, связки, твердую мозговую оболочку, после которой ощущается «провал» иглы, и начинает выделяться ликвор (у взрослых прокол производится на глубине 4-7 см, у детей до 3 см.).

Манометрической трубкой измеряют давление ликвора. В норме в положении лежа оно составляет от 100-180 мм. вод. ст.

При подозрении на блок субарахноидального пространства проводятся ликвородинамические пробы, которые основаны на взаимосвязи между венозным и ликворным давлением.

Проба Квеккенштедта производится следующим образом: надавливают на яремные вены в нижней части шеи в течение 5 сек., при этом повышается венозное давление в полости черепа, что приводит к повышению давления ликвора до 300 мм. вод. ст. После прекращения сдавления вен в течение 2 секунд ликворное давление возвращается к норме. При полном блоке субарахноидального пространства давление не повышается, при частичном блоке повышение ликворного давления незначительное.

При проведении пробы Пуссепа максимально сгибают голову, что приводит к сдавлению яремных вен. Результаты пробы расшифровываются также как и при пробе Квеккенштедта. Ликворное давление в норме повышается на 30 - 60 мм вод. ст.

Проба Стукея производится следующим образом: сдавливают брюшные вены в области эпигастральной области. Ликворное давление в норме повышается в 1,5-2 раза. Данная проба не информативна при блоках субарахноидального пространства ниже грудного уровня.
При ПУНКЦИИ СУСТАВА СЖ собирают в стерильные центрифужные пробирки (2-3 или более, в зависимости от количества полученной СЖ) и немедленно передают в клинико-диагностическую лабораторию. Одну из пробирок (или более, в зависимости от числа полученных пробирок) направляют в микробиологическую лабораторию (отдел) для проведения микробиологических исследований, а остальные используют для проведения клинического лабораторного исследования СЖ (определения физико-химических свойств и микроскопического исследования нативных и окрашенных азур-эозином препаратов с подсчетом синовиоцитограммы, подсчета клеточных элементов в 1мкл (цитоз), а также выполнения биохимических и иммунологических исследований. Биохимические и иммунологические исследования проводят в супернатанте после центрифугирования СЖ, а осадок используют для поиска кристаллов в нативном препарате с применением поляризационного микроскопа, а также для подсчета синовиоцитограммы в окрашенном мазке. Для подсчета клеток можно собирать СЖ в пробирку, содержащую антикоагулянт (двунатриевую или двукалиевую соль ЭДТА), выпускаются специальные вакуумные пробирки с К2ЭДТА, которые могут быть использованы для взятия СЖ.

При наличии соответствующих показаний (подозрение на наличие клеток новообразований) окрашенный мазок направляется в цитологическую лабораторию.

Исследование плевральной жидкости

Пункцию плевральной полости производят обычно в восьмом или девятом межреберье между задней подмышечной и лопаточной линиями (соответственно области наибольшей тупости) в положении больного сидя со скрещенными впереди руками. Пробную пункцию осуществляют с помощью толстой иглы, на которую насажен 10- или 20-граммовый шприц; при лечебной пункции удобнее пользоваться аппаратом Потена.

К исследованию ПЕРИКАРДИАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ прибегают у пациентов со скоплением чрезмерного количества жидкости в перикардиальной сумке в результате воспалительного процесса (перикардит), разрыва сердца или проникающего ранения. Для получения материала для исследования прибегают к аспирации перикардиальной жидкости (перикардиоцентез). Эта процедура требует особой осторожности из-за риска смертельных осложнений, в частности разрыва миокарда или коронарной артерии, фибрилляции желудочков, остановки сердца (вазовагальный рефлекс), а также инфицирования плевральной полости, случайного повреждения легкого, печени или желудка. Для уменьшения риска осложнений перед выполнением перикардиоцентеза желательно уточнить характер скопления жидкости с помощью ЭхоКГ.

Соскоб из уретры: зонд ввести в уретру (у мужчин - на глубину 2-4 см) и несколькими вращательными движениямисобрать материал. Накануне перед взятием материала допускается провокация (острая пища, алкоголь и др.). Рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1-2-х часов перед взятием пробы. При наличии обильных гнойных выделений соскоб надо брать не позже, чем через 15 минут после мочеиспускания.

Последовательность сбора макроты

1. 
   Объяснить пациенту (члену семьи) смысл и необходимость предстоящего исследования и получить его согласие на исследование.
   
2. 
   А) в стационарных условиях:
   

• 
  инструктаж и обеспечение лабораторной посудой провести накануне вечером;
  

Б) в амбулаторных и стационарных условияхобъяснить пациенту особенности подготовки:

• 
  накануне вечером тщательно почистить зубы ;
  
• 
  утром после сна тщательно прополоскать рот кипячёной водой
  

3. 
   Проинструктировать пациента о правилах обращения со стерильной лабораторной посудой и о сборе мокроты:
   

• 
  Откашляться, открыть крышку банки (плевательницы) и сплюнуть мокроту, не касаясь краёв банки;
  
• 
  Сразу же закрыть крышку.
  

4. 
   Попросить пациента повторить всю информацию, задать вопросы по технике подготовки и сбора мокроты.
   
5. 
   Указать, к каким последствиям приведёт нарушение рекомендаций медсестры.
   
6. 
   А) в амбулаторных условиях:
   

• 
  Дать направление на исследование, заполнив его по форме;
  
• 
  Объяснить пациенту, куда и какое время он (семья) должны принести банку и направление.
  

Б) в условиях стационара:

• 
  Указать место и время, куда принести банку (плевательницу);
  
• 
  Доставить собранный материал в бактериологическую лабораторию не позднее 1,5 – 2,0 часов после сбора материала.
  

Для получения БРОНХОАЛЬВЕОЛЯРНОГО СМЫВА катетер продвигают на 6—7 см в глубь сегментарного бронха и дробно вводят 4 порции по 50 мл изотонического раствора натрия хлорида, каждую порцию которого поочередно полностью аспирируют. Эти смешанные между собой порции носят название бронхоальвеолярного смыва.

Полученный материал аспирируют в стерильные пластиковые кон­тейнеры, которые маркируют и направляют на клнническое, цитологи­ческое, бактериологическое или иммунологическое исследования.
ВЗЯТИЕ И СБОР БИОМАТЕРИАЛА НА БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Правильное взятие и сбор биоматериала на бактериологические исследо­вания имеет важное значение. Это обусловлено тем,¹¹ то получение результа­тов бактериологического исследования подвержено влиянию многих факто­ров преаналитичеекого этапа.

Важнейшими из них являются:

* место взятия биоматериала;

• правильность способа и времени взятия биоматериала;

• используемые системы для транспортировки проб биоматериала;

* продолжительность транспортировки проб биоматериала.

При взятии проб для бактериологических исследований медицин­ские сестры должны уделять особое внимание предотвращению кон­таминации (попаданию в образец биоматериала бактерий с кожных покровов и слизистых оболочек). Для этого необходимо выполнять следующие основные правила.

1. Перед взятием пробы из подкожных очагов кожу следует тщатель­но продезинфицировать. Если возможно, образцы гнойного материала лучше забирать путем аспирации через кожу, так как ее дезинфицировать легче, чем слизистые оболочки. Аспираты доставляют в лаборатории) в шприце, предварительно удалив иглу и прочно закупорив канюлю.

2. При взятии образца с открытой раны следует предварительно механически удалить с помощью стерильного тампона поверхност­ный секрет, который содержит вторичные микроорганизмы. Затем с краев раны собирают материал для исследования.

3. Тампон с образцом следует предохранять от высыхания во время транспортировки. Для этого тампон помещают в емкость с жидким бульоном или транспортной средой.

4. При небольшом количестве микроорганизмов объем пробы дол­жен быть максимально возможным.

5. При назначении исследования на гемокультуру пробы крови лучше брать в период повышения температуры тела у больного, При подозрении на септический эндокардит следует брать не менее 10 проб крови для гемокультивирования.

6. Пои взятии проб биоматериала на бактериологические иссле­дования важное значение имеет правильный выбор контейнера для сбора и транспортировки образца в лабораторию. Основные требова­ния к контейнерам для транспортировки проб ал и бактериологичес­ких исследований:

• стерильность:

• устойчивость к коррозии;

• достаточные размеры;

• прочность закупоривания;

• небьющинся контейнер;

■наличие транспортной или питательной среды для определенных микроорганизмов,

7. Быстрая транспортировка проб в лабораторию и соблюдение при атом температурного режима. Эти требования обусловлены целым рядом особенностей самих микроорганизмов:

■охлаждение и снижение pH биологического материала, а также воздействие кислорода снижают выживаемость таких бактерий, как менингокок: и, гонококки, пневмококки, холерный вибрион, анаэробные микроорганизмы, гемофильная палочка, сальмонел­лы, Helicobacter pylori;

• слишком длительная транспор i ировка приводит к тому, что жиз­неспособность исходных,, чувствительных к воздействию окружа­ющей среды микроорганизмов в пробе снижается, но при этом в биоматериале начинают размножаться другие бактерии.

8. Оптимальным для бактериологических исследований является доставка проб любого биологического материла в течение 1,5 ч после взятия образца.

Если соблюдение этого требования не может быть обеспечено, рекомендуется использовать различные приспособления со специальной транспортной средой. Основные требования к транс­портировке и хранению проб для бактериологических исследований приведены в табл. 1-8.

19. Медицинская сестра должна тать, что даже наиболее совершен­ная транспортная система (среда) не может заменить быструю достав­ку проб биологического материала в лабораторию для получения достоверных результатов исследования.

10. При назначении исследований по выявлению вирусов в биологи­ческом материале (кровь, отделяемое органов) серологическими мето­дами решающее значение имеет время взятия проб. Обычно материал собирают немедленно после выявления симптомов заболевания (если во шожно, в первые 3 дня). Общим правилом должна быть доставка взято­го биоматериала в лабораторию как можно быстрее при температуре 4 °С в отдельном контейнере. В этих условиях ьирусы осают(;я стабильными в течение 2—3 дней. Для анали за используются кровь, образцы на тампо­нах (глаза, нос. горло, уретра), смывы из носоглотки, везикулярная жид­кость при кожных поражениях, кал, моча и спинномозговая жидкость.

Приготовление прижизненных (нативных) препаратов.

Для исследования живых клеток микроорганизмов применяют методы «раздавленной и висячей капли». В обоих случаях возможно окрашивание объекта “прижизненными” красителями – “витальная” окраска.

Метод раздавленной капли.

На чистое предметное стекло наносят каплю воды. В каплю вносят культуру и смешивают с водой. Накрывают каплю покровным стеклом так, чтобы не образовались пузырьки воздуха. Стеклянной палочкой прижимают покровное стекло к предметному. Капля должна быть небольшой, не выходящей за края покровного стекла, но если суспензия попала за край - удаляют фильтровальной бумагой. Микроскопируют препарат с объективом 40Х. Метод удобен для исследования подвижности бактериальных клеток, а также просмотра крупных объектов - плесневых грибов, дрожжей. Применяют при изучении запасных веществ клетки. Метод “висячей” капли – используются для длительных наблюдений за клетками микроорганизмов. Препарат готовят на покровном стекле, в центр которого наносят одну каплю бактериальной культуры. Затем предметное стекло с лункой, края которой предварительно смазывают вазелином, прижимают к покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки. Быстрым движением переворачивают препарат покровным стеклом вверх. В правильно приготовленном препарате капля должна свободно висеть над лункой, не касаясь её дна или края. Для микроскопии вначале используют малый сухой объектив 8Х, под увеличением которого находят край капли, а затем устанавливают иммерсионный объектив.

Прижизненная (витальная) окраска. Взвесь микроорганизмов вносят в каплю раствора метиленового синего или нейтрального красного в концентрациях от 0,001 до 0,00001%. Затем готовят препарат по одному из выше указанных методов и микроскопируют. После микроскопии препараты, «раздавленной» или «висячей» капли опускают в дезинфицирующий раствор.

ФИКСАЦИЯ МАЗКОВ

Тепловая фиксация. Предметное стекло с нанесенным материалом проводят трижды над пламенем горелки, держа мазком вверх. Время фиксации не должно превышать 5-6 секунд. Спорообразующие бактерии при этом не погибают, и в этом случае мазки следует считать инфекционными.

Высушивание и нагревание, особенно перегревание вызывают сжатие и деформацию бактерий, нарушают связь между клетками. Таким образом, этот метод фиксации является быстрым, но грубым, его не следует применять для фиксации мазков-отпечатков из органов, крови, а также для изучения структуры бактериальной клетки.

Химическая фиксация. Эти методы требуют больше времени, но дают более достоверные данные по морфологии клеток. Известно много способов химической фиксации.

- Фиксация этиловым 95° спиртом, экспозиция 10-15 минут.

- Фиксация спирт-эфиром (по Никифорову) — смесь равных объемов абсолютного спирта и эфира, экспозиция 10-15 минут.

- Фиксация метиловым спиртом, экспозиция 2-3 минуты.

- Фиксация ацетоном, экспозиция 5 минут.

- Фиксация сулемой (1%-ный раствор), экспозиция 10-15 минут, промывание раствором NaCl и водой.

- Фиксация азотнокислым серебром (10%-ный раствор), экспозиция 10 минут.

- Фиксация по Шаудину. Фиксатор (насыщенный водный раствор НgС1₂ — 2 части и абсолютный этанол 1 часть) нагревают до 45-50° С, экспозиция 1-2 минуты. Срок хранения фиксатора неограниченный.

- Фиксация жидкостью Карнуа. Фиксатор: спирт 96° — 60 мл, хлороформ — 30 мл, ледяная уксусная кислота — 10 мл. Экспозиция 10-15 минут. Метод удобен при изучении структур клетки. Из-за лизиса эритроцитов нельзя использовать для фиксации мазков-отпечатков и мазков крови.

При фиксации мазков из костного мозга, молока, яиц, где содержится жир, или других препаратов подобного типа их после фиксации предварительно помещают на 2 минуты в эфир или хлороформ и затем окрашивают.

Методика окраски по Граму. Особенностью окраски по Грамму является неодинаковое отношение различных микробов к красителям. Микробы, входящие в группу грамположительных, например стафилококки, стрептококки, дают прочное соединение с красителями и йодом. Окрашенные микробы не обесцвечиваются при воздействии на них спиртом, вследствие чего при дополнительной окраске фуксином грамположительные микробы не изменяют первоначально принятый фиолетовый цвет. Это объясняется строением клеточной стенки грамположительных бактерий. Основным компонентом толстой клеточной стенки этих бактерий является многослойный пептидогликан, с которым ковалентно связаны тейхоевые кислоты. Грамотрицательные бактерии (гонококки, менингококки, возбудители кишечных заболеваний) образуют с генциановым фиололетовым и йодом легко разрушающееся под действием спирта соединение, в результате чего они обесцвечиваются и затем окрашиваются фуксином в красный цвет. Клеточная стенка таких бактерий представлена тонким слоем пептидогликана.

1. 
   На фиксированный мазок наносят раствор генцианового фиолетового на 2мин.
   
2. 
   Затем сливают краситель и, не промывая мазок, наливают раствор Люголя на 1мин.
   
3. 
   Сливают раствор Люголя и наносят на 30сек 96 град спирт, пока не перестанет отходить краситель.
   
4. 
   Мазок промывают дистиллированной водой и окрашивают в течении 2 мин раствором фуксина.
   
5. 
   После чего сливают краситель, мазок промывают водой и высушивают. Грамположительные бактерии окрашиваются в синий (фиолетовый) цвет, а грамотрицательные бактерии – в красный.
   

Методика окраски по Бурри-Гинсу. Некоторые виды бактерий продуцируют слизистое вещество, которое концентрируясь вокруг тела микробной клетки, образует капсулу.Данная окраска служит для выявления у бактерий капсул.

1. 
   На середину предметного стекла наносят капельку туши и смешивают ее петлей с каплей культуры.
   
2. 
   Делают мазок ребром покровного стекла, дают высохнуть и фиксируют над пламенем горелки.
   
3. 
   Затем промывают дистиллированной водой и красят 5-10 мин фуксином.
   
4. 
   Затем вновь мазок промывают водой и высушивают. При микроскопии бактерии окрашиваются в красный цвет, фон черный, а капсулы неокрашенные.
   

Методика окраски по Ожешко. Этот метод служит для выявления у бактерий спор. Споры имеют вид круглых или овальной формы образований, находящихся в теле микробной клетки. Различают три вида расположения спор по отношению к длинной оси палочки: центральное – спора находится в центре тела микроба, субтерминальное – спора расположена ближе к одному из ее концов, терминальное – спора располагается на конце палочки.

1. 
   На высушенный нефиксированный мазок наливают 0,5% раствор хлористоводородной кислоты и подогревают 1-2мин над пламенем горелки до закипания.
   
2. 
   Остывший препарат промывают водой, высушивают и фиксируют над пламенем спиртовки.
   
3. 
   Затем на мазок наносят раствор фуксина Циля и нагревают над пламенем спиртовки до отхождения паров.
   
4. 
   После того как препарат остынет, обесцвечивают его 5% раствором серной кислоты, промывают водой и докрашивают метиленовым синим в течении 3-5 мин, затем промывают водой и подсушивают. Споры, окрашенные фуксином имеют красный цвет, тело микробной клетки – синий цвет.
   

Методика окраски по Цилю-Нильсену для кислотоустойчивых бактерий (возбудители туберкулеза и проказы). Особенностью микробов этой группы является то, что они плохо воспринимают окраску. Для того чтобы окрасить кислотоустойчивые микроорганизмы, приходится применять более концентрированные растворы красителя в подогретом состоянии с протравами и удлиненным сроком окраски.

1. 
   Фиксированный над пламенем спиртовки мазок окрашивают в течение 3-5мин фуксином Циля с подогреванием до появления паров.
   
2. 
   Дают препарату остыть, промывают водой.
   
3. 
   Обесцвечивают в течение 3-5 с в 5% растворе серной кислоты.
   
4. 
   Препарат промывают водой.
   
5. 
   окрашивают метиленовым синим в течение 3-5 мин.
   
6. 
   Промывают водой, подсушивают и микроскопируют.
   

При окраске препаратов по методу Циля-Нильсена кислотоустойчивые бактерии окрашиваются фуксином в рубиново- красный цвет и не обесцвечиваются кислотой. Некислотоустойчивые бактерии, а также элементы ткани и лейкоциты под действием кислоты становятся бесцветными и приобретают цвет дополнительного красителя (синий).