Тема. Анализ лекарственного растительного сырья, содер жащего флавоноиды
 Скачать 60.35 Kb.
|
|
ТЕМА. АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ, СОДЕРЖАЩЕГО ФЛАВОНОИДЫ Химический анализ лекарственного растительного сырья, содержащего флавоноиды Цель занятия __________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________ Задание 1.Проведите выделение флавоноидов из лекарственного растительного сырья. Методика, 3-5 г измельченного растительного сырья заливают 30-50 мл 70 % спирта в колбе с обратным холодильником и проводят экстракцию на водяной бане в течение 20-30 минут. Извлечение охлаждают, фильтруют через 4 слоя марли или фильтровальную бумагу. Полученный фильтрат наносят на колонку диаметром 1 см, заполненную 1,0 г полиамидного сорбента, промывают 50 мл воды и элюируют флавоноиды с колонки 70 % этанолом, отбирая фракцию, окрашенную в желтый цвет. Полученный фильтрат упаривают до 1/2 объема и используют для проведения качественных реакций и хроматографического обнаружения флавоноидов. Задание 2.Проведите качественные реакции на флавоноиды. В качестве образца сравнения используйте 0,1 % спиртовый раствор рутина. Запишите результаты реакций в таблицу и сделайте выводы. Цианидиновая реакция. К 1 мл извлечения прибавляют 2-3 капли концентрированной хло- ристоводородной кислоты и 1-2 стружки металлического магния. Наблюдают образующуюся ок- раску. Реакция со щелочью. К 1 мл извлечения прибавляют 1-2 капли 10 % спиртоводного раствора калия или натрия гидроксида. Реакция с алюминия хлоридом. К 1 мл извлечения прибавляют 1 мл 2 % спиртового рас- твора алюминия хлорида. Реакция с железа (III) хлоридом. К 1 мл извлечения прибавляют 2-3 капли 1 % спиртового раствора железа хлорида. Реакция Вильсона. К 2 мл извлечения прибавляют 1 мл 2 % раствора кислоты борной и 1 мл 2 % спиртового раствора кислоты лимонной (или щавелевой). Реакция с ванилином в концентрированной хлористоводородной кислоте. К 1 мл прибавляют несколько капель 1 % раствора ванилина в кислоте хлористоводородной концентри- рованной. Результаты качественных реакций на флавоноиды
Выводы: _______________________________________________________________________ Задание 3. Проведите качественную реакцию идентификации корней стальника, основанную на флюоресценции изофлавоноидов в УФ-свете. Запишите наблюдения и сделайте выводы. Методика. Около 0,2 г порошка корней стальника помещают в колбу со шлифом вместимо стью 25 мл, прибавляют 5 мл 70 % спирта и нагревают с обратным холодильником на кипяще! водяной бане при слабом кипении в течение 20 минут. После охлавдения раствор фильтруют че рез бумажный фильтр. На полоску фильтровальной бумаги наносят микропипеткой 0,05 мл извлечения и просматривают в УФ-свете. Наблюдения: Выводы:________________________________________________________________________________________________________________________________________ Задание 4. Определите количественное содержание флавоноидов в траве зверобоя по ГФ. Сделайте заключение о соответствии образца сырья требованиям АНД (не менее 1,5 %). Методика. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 150 мл, прибавляют 30 мл 50 % спирта. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 минут, периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок. Горячее извлечение фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл так, чтобы частицы сырья не попадали на фильтр. Вату помещают в колбу для экстрагирования и прибавляют 30 мл 50 % спирта. Экстракцию повторяют еще дважды в описанных выше условиях, фильтруя извлечение в ту же мерную колбу. После охлаждения объем извлечения доводят 50 % спиртом до метки и перемешивают (раствор А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 3 мл раствора А, 1 мл раствора алюминия хлорида в 95 % спирте и доводят объем раствора 95 % спиртом до метки. Через 40 минут измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 415 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1 мл извлечения, 1 капли кислоты уксусной разведенной и доведенный 95 % спиртом до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца (ФСО) рутина, приготовленного аналогично испытуемому раствору. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье X, %? вычисляют по формуле: Х=D• m0• 100 • 100• 100/D0•m•l00• (100-W)= где D - оптическая плотность испытуемого раствора; Do - оптическая плотность раствора ФСО рутина; m - масса сырья, г; то - масса ФСО рутина, г; W - потеря в массе при высушивании сырья, %. Примечание. Приготовление раствора Государственного стандартного образца (ГСО) рутина. Около 0,05 г (точная навеска) ГСО рутина, предварительно высушенного при температуре 130-135иС в течение 3 ч, растворяют в 85 мл 95 % спирта в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают. Выводы:________________________________________________________________ _______________________________________________________________________ Макро- и микроскопический анализ лекарственного растительного сырья, содержащего флавоноиды Цель занятия __________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________ Объекты для лабораторного исследования: бутоны и плоды софоры японской, цветки василька синего, плоды аронии черноплодной, трава пустырника, трава горца перечного, трава горца почечуйного, трава горца птичьего (спорыша), трава сушеницы топяной, цветки бессмертника песчаного, цветки пижмы, цветки боярышника, плоды боярышника, трава череды, цветки бузины черной, трава эрвы шерстистой, трава хвоща, корни солодки, корни стальника. Объекты для самостоятельного изучения: трава фиалки, цветки гибискуса, цветки ноготков, трава зверобоя, корни шлемника байкальского, листья гинкго, трава астрагала шерстистоцветкового, трава астрагала серпоплодного, трава десмодиума канадского, цветки липы, виды леспедецы, трава датиски коноплевой, трава золотарника канадского, трава мелколепестника канадского, створки и трава фасоли. Лекарственное растительное сырье, обладающее Р-витаминной активностью Объект 1. Бутоны софоры японской
Внешние признаки: товарный вид _________________________________________________ форма длина
Объект 2. Плоды софоры японской
Внешние признаки: товарный вид
Объект 3. Плоды аронии черноплодной свежие
Внешние признаки: товарный вид__________________________________________________  форма цвет
____________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ Объект 4. Кожура лимона
Укажите применение кожуры лимона__________________________________ ___________________________________________________________________ Объект 4. Трава гречихи посевной
Укажите применение травы гречихи посевной_________________________________ _________________________________________________________________________ Объект 6. Лист (флеши) чая
Укажите применение листьев чая____________________________________________ ________________________________________________________________________ Лекарственное растительное сырье, содержащее разные группы флавоноидов Объект 7. Цветки василька синего
Внешние признаки: товарный вид ________________________________________________ краевые цветки: форма длина
Объект 8. Трава пустырника
Внешние признаки: товарный вид стебель: длина толщина
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||