методы скрининга бс. Тест на гликолипиды
 Скачать 1.41 Mb.
|
|
ТЕСТ НА ГЛИКОЛИПИДЫ Фенол H2SO4 Метод  Рисунок, изображающий тест фенол-серной кислоты для обнаружения образования гликолипидов. Этот метод был разработан Дюбуа и соавт. (1956) для обнаружения гликолипидов. В этом методе 1 мл фенола (5%) добавляют к сырому биосурфактанту (небольшое количество) вместе с концентрированной H2SO4 (4 мл) по каплям. Появление цвета от желтого до оранжевого указывает на присутствие биосурфактанта, принадлежащего к группе гликолипидов. Анализ распространения нефти (Oil Spreading Assay) Этот анализ представляет собой простой и быстрый метод обнаружения продукции биосурфактанта. Морикава и др. (2000) разработали этот анализ. В этом анализе 10 мкл сырой нефти добавляют к поверхности воды в чашке Петри. После этого в центр масляного слоя осторожно добавляют культуральный супернатант (10 мкл). Если масло растекается, образуя прозрачную зону, то это свидетельствует о наличии биосурфактанта в культуральном супернатанте (рис. 2.3). Диаметр этой чистой зоны коррелирует с активностью биосурфактанта, также называемой активностью вытеснения нефти.  Рисунок, изображающий тест на растекание масла для обнаружения биосурфактантов [A] Капля масла, [B] Вытеснение масла Способ с углеводородным агаром Это качественный анализ для обнаружения продуцентов биосурфактанта. В этом методе чашки с агаром Луриа-Бертани, покрытые углеводородом, инокулируют микробной культурой и инкубируют в течение 72 ч при 37 °C. Колонии, окруженные эмульгированными ореолами, считаются положительными.  Рисунок, изображающий скрининг производства биосурфактанта с использованием метода наложения углеводородного агара. Тест с наклонным предметным стеклом Тест с наклонным предметным стеклом — недорогой метод, разработанный Перссоном и Молином (1987). Этот тест является модификацией теста на схлопывание капли (Satpute et al. 2010). В этом тесте выращенные в течение 24 часов изоляты смешивают с каплей 0,9% NaCl на одном конце предметного стекла. Стекло наклоняется, и наблюдается падение. Если капля схлопывается, то она считается положительной. |