сит задачи по микробиологии. Общая микробиология Сит задачи. Тест на сахаролитические ферменты предназначен для дифференциальной диагностики энтеробактерий и других микроорганизмов

• Название: Тест на сахаролитические ферменты предназначен для дифференциальной диагностики энтеробактерий и других микроорганизмов
• Анкор: сит задачи по микробиологии
• Дата: 03.09.2022
• Размер: 81 Kb.
• Имя файла: Общая микробиология Сит задачи.doc
• Тип: Документы; #660768

1. При посеве бактериальной культуры на среды Гисса через сутки инкубирования изменился цвет среды в пробирках с глюкозой, в поплавке газ. О чем свидетельствуют эти изменения?
Тест на сахаролитические ферменты предназначен для диф­ференциальной диагностики энтеробактерий и других микро­организмов.

Принцип теста. Тест основан на способности микробов при утилизации углеводов с образованием кислоты и газа изменять цвет индикатора среды.

Проведение теста. Для обнаружения сахаролитических фер­ментов исследуемую культуру микроорганизма засевают в про­бирки с жидкими или полужидкими (0,2–0,5 % агара) средами Гисса ("пестрый ряд"), которые содержат 3–5 мл среды с определенным углеводом и индикатор, реагирующий измене­нием цвета при изменении величины рН при кислотообразовании. В средах Гисса (рецепт 45) наиболее часто используют моно- и олигосахариды: глюкозу, лактозу, мальтозу, сахарозу, галактозу, арабинозу, ксилозу, рамнозу, рафинозу, маннозу, трегалёзу, целлобиозу, фруктозу; полисахариды: крахмал, ину­лин; многоатомные спирты: сорбит, дульцит, маннит, глицерин, адонит, инозит (не карбогидрат); гликозиды: эскулин, салицин, эритритол.

Среды засевают 18-часовой агаровой микробной культурой (петлей диаметром 2–4 мм), а также 0,5–1 млрд суспензией в количестве не более 0,1 мл для исключения мгновенных лож­ных реакций индикатора. При необходимости изучения спо­собности ферментировать углевод в анаэробных условиях по­сле засева микроорганизма в свежепрокипяченную среду наслаивается стерильное вазелиновое масло. Например, таким способом изучают ферментацию глюкозы, маннита и др.
Контролем в "пестром ряду" служат пробирки с посевами эталонных штаммов (положительный и отрицательный кон­троль) и с незасеянными средами Гисса. Такие контроли по­зволяют избежать ложных реакций не только вследствие слу­чайной контаминации среды, но и вследствие редуцирующей активности у cахаров или у примесей в ингредиентах среды. Если изучаемый микроб (помещенный в термостат с оптималь­ной температурой) быстро растет в углеводной среде, то ре­зультаты биохимической реакции можно регистрировать через 24–48 ч. Для медленно растущих микроорганизмов срок на­блюдения продлевается до 96 ч, а иногда до 7–10 сут.

Использование в средах Гисса агар-агара (0,2–0,5%) позво­ляет наблюдать в глубине среды или на ее поверхности пузырь­ки газов. Кроме того, для обнаружения газов в пробирки с 3мл жидкой среды Гисса опускают "поплавки" (трубки Дюрхема), микропробирки длиной 35–45 мм, диаметром 5–7 мм, запаянные с одного конца. При стерилизации из "поплавка", помещенного в среду Гисса дном кверху, воздух вытесняется питательной средой. В случае образования микробом газооб­разных продуктов в "поплавке" появляется пузырек газа.

Если микроорганизм синтезирует сахаролитический фер­мент, утилизируя соответствующий углевод с образованием органических кислот, то цвет среды меняется в зависимости от типа индикатора.

Микроорганизмы, осуществляющие аэробное окисление суб­страта, изменяют цвет только в пробирке без масла. Микроор­ганизмы, осуществляющие брожение (ферментацию), изменя­ют цвет в обеих пробирках (с маслом и без масла). Отсутствие роста в пробирке и сохранение исходного цвета среды указы­вает на неспособность микроба утилизировать углевод.
2. При посеве культуры на "пестрый" ряд через 24 часа в пробирке с пептонной водой наблюдается помутнение среды – индикаторные бумажки одна порозовела, другая почернела. Почему?
Культура выделяет протеолитический формент, расщепляющий белки до конечных продуктов - индола исероводорода. Индол - бумажка розовеет, сероводород - чернеет.


3. Питательная среда до посева культуры клеток и после инкубации не изменила окраску индикатора. Обоснуйте цветную пробу.

4. При культивировании вирусов в однослойной клеточной культуре, покрытой тонким слоем агара, обнаружены участки разрушенных вирусами клеток. Обоснуйте изменения.
Цитопатический эффект (ЦПЭ) – видимые под микроскопом морфологические изменения клеток вплоть до их гибели, возникающие в результате повреждающего действия вирусов. Характер ЦПЭ, вызванного разными вирусами, неодинаков. Включения представляют собой скопления вирусных частий, вирусных белков или клеточного материала, которые можно обнаружить в ядре или цитоплазме клеток при специальных методах окраски. Бляшки, или «негативные колонии» вирусов, – участки разрушенных вирусами клеток; их можно обнаружить при культивировании вирусов на однослойных клеточных культурах, покрытых тонким слоем агара. Бляшки, образуемые разными вирусами, отличаются по величине, форме, времени появления, поэтому феномен бляшко-образования используют для дифференциации вирусов.

Многие вирусы обладают гемадсорбирующими свойствами. «Цветная» реакция основана на разнице в цвете индикатора питательной среды, используемой для культур клеток. При росте клеток, не пораженных вирусом, накапливаются продукты метаболизма, что приводит к изменению цвета индикатора питательной среды. При репродукции вирусов в культуре нарушается нормальный метаболизм клеток и среда сохраняет первоначальный цвет.

5. В культуру клеток, зараженных вирусами, добавлена взвесь эритроцитов, после контакта и промывания раствором хлорида натрия на поверхности пораженных вирусами клеток остаются прилипшие эритроциты. Обоснуйте такие изменения.

ГЕМАДСОРБЦИЯ (греч. haima кровь + адсорбция) — способность клеток, зараженных нек-рыми вирусами (гл. обр. гемагглютинирующими), фиксировать на своей поверхности эритроциты.

Реакцию гемадсорбции применяют для индикации гемаг-глютинирующих вирусов. Реакция основана на способности поверхности клеток, в которых репродуцируются такие вирусы, адсорбировать эритроциты.

целью обнаружения вирусов в исследуемом материале от больных чаще всего используют при диагностике оспы и парагриппозных заболеваний.

6. Были проведены опыты по определению чувствительности культуры выделенной от больного к антибиотикам. При повторном определении чувствительности к полипептидным антибиотикам – полимиксину и ристомицину, методом диска на питательном агаре была выявлена устойчивость микроорганизмов к данным ХТП. Однако метод серийных разведений выявил у этих микроорганизмов к этим же антибиотикам чувствительность, даже к малым концентрациям. О чем можно предположить в данном случае?
7. Для контроля эффективности стерилизации питательной среды в автоклав был помещен бензонафтол с температурой плавления 110°С. После проведения стерилизации бензонафтол не расплавился. Обоснуйте качественность стерилизации питательной среды и правильность автоклавирования.

Химические вещества как температурные индикаторы. Это порошкообразные вещества со строго определенной температурой плавления: бензонафтол(110°С)

Эти вещества смешивают с небольшим количеством сухой анилиновой краски (фуксин, метиленовый синий) и помещают в запаянные стеклянные трубочки, которые укладывают между стерилизуемыми предметами. Этот метод используют для контроля режима стерилизации в автоклаве. Если температура в автоклаве была достаточной, вещество в трубочке плавится и окрашивается в цвет красителя, который растворяется в этом веществе.

Значит температура в автоклаве была не выше 110 градусов и обработка прошла не до конца

8. В учебной комнате были оставлены открытыми две чашки Петри с питательным агаром в течение 60 мин., с последующей инкубацией в термостате при 37°С. на следующий день число выросших колоний на обеих чашках составило 200 колоний. Как называется данный метод исследования воздуха? О чем свидетельствуют полученные результаты?
Определение микробного числа воздуха.Количественные ми­кробиологические методы исследования воздуха основаны на принципах осаждения (седиментации), аспирации или фильт­рации.

Результаты оценивают по суммарному числу колоний, выросших на обеих чашках: при наличии менее 250 колоний воздух считается чис­тым; 250—500 колоний свидетельствует о загрязнении средней степени, при количестве колоний более 500 — загрязненным.
9. В результате бактериологического исследования влагалищного секрета установлено: реакция среды кислая, большое количество палочек Додерлейна. О чем свидетельствуют полученные результаты?
Мазок берется стерильным шпателем, обычно со слизистой мочеиспускательного канала, влагалища и шейки матки. Затем он окрашивается особым образом и рассматривается под микроскопом. В нормальном вагинальном мазке специалист увидит множество палочек Додерлейна, проще говоря - лактобактерий, которые создают во влагалище кислую среду, предохраняя тем самым от размножения возбудителей инфекции. Кстати, в уретральном секрете и мазке с шейки матки в норме они отсутствуют.
10. Вам выданы результаты бактериологического анализа питьевой воды, общее микробное число в 1 мл – 120, коли-индекс – 4. Сделайте заключение по данным показателям, какие мероприятия необходимо провести?
Основной микробиологический показатель — число микробов — количество бактерий и др. микроорганизмов, содержащихся в 1 мл воды.

По санитарно-гигиеническим нормам, количество бактерий в 1 мл питьевой воды не должно превышать 100.

Определение всего многообразия бактерий в воде слишком трудоемко, поэтому эпидемические показатели воды по микробиологии включают в себя определение коли-титра и коли-индекса по бактериям кишечной палочки.

Коли-титр — это минимальный объем воды в мл, в котором обнаруживается одна бактерия кишечная палочка.

Санитарные нормы:

коли-индекс — до 3,

микробное число не должно быть больше 100.
11. При подозрении на острую респираторную инфекцию от больного ОРЗ приготовили мазок отпечаток из нижней носовой раковины. Зафиксировав в ацетоне, обработали противогриппозной сывороткой, затем после промывания залили люминесцирующей сывороткой. С какой целью было проведено данное исследование? Какой микроскоп используется?


12. Резус-отрицательная женщина, которая забеременела впервые от резус-положительного мужа, обратилась в женскую консультацию. Какую реакцию необходимо поставить? Каковы будут результаты в данном случае?

Шанс возникновения резус-конфликта у первородящих женщин ничтожно мал, он составляет лишь 1,5%. Но вот планировать вторую и третью беременность женщинам с отрицательным резусом крови надо заранее. Дело в том, что при каждой последующей беременности содержание в крови антител, которые уничтожают резус- положительные эритроциты, заметно увеличивается. Они ко второй и третьей беременности уже успевают вырасти до крупных размеров и намного легче проникают в кровь малыша. Любая беременность и переливание крови повышают количество антител в крови женщины с отрицательным резусом. Риск возникновения резус - конфликта во много раз увеличивается после аборта, выкидыша и внематочной беременности. Поэтому после родов, переливания крови, аборта и выкидыша женщинам с отрицательным резусом обязательно надо не позднее 3-х суток сделать внутримышечное введение антирезусного иммуноглобулина.
Резус-фактор - это особый белок, находящийся на поверхности красных кровяных тел - эритроцитов. Если этот белок есть, то кровь бывает резус-положительной, а если его нет - резус-отрицательной. Отсутствие или наличие резус-фактора никакого влияния на самочувствие человека не оказывают, однако у женщин при наступлении беременности может возникнуть резус-конфликт, который представляет серьезную опасность плоду. Возникает резус-конфликт, когда резус у матери отрицательный, а у отца - положительный. Если ребенок унаследует положительный резус-фактор отца, то организм женщины с резус-отрицательной кровью может воспринять беременность как нечто чужеродное и начнет вырабатывать антитела, которые начнут "атаковать" чужие клетки. Эти клетки проникают в кровь ребенка и начинают уничтожать резус-положительные эритроциты, функция которых доставлять кислород к тканям и органам развивающегося младенца. Нехватка кислорода для только-только начинающего формироваться плода трагична. Чаще всего такая беременность заканчивается выкидышем, рождением недоношенных детей и даже мертворождения. Даже если малыш выживает, он рискует родиться тяжелобольным. У него могут пострадать мозг, сердце, печень, почки и центральная нервная система. Поэтому при такой беременности необходимо постоянно наблюдаться у гинеколога и не отказываться от лечения.

Если у ребенка резус будет положительный, после родов новоиспеченной мамаше следует повторно сделать введение антирезусного иммуноглобулина для профилактики возникновения резус-конфликта при последующих беременностях.
13. В женскую консультацию обратилась резус-отрицательная женщина. В прошлом наблюдались одни роды, два выкидыша, один аборт. В данном случае пятая беременность от резус положительного мужа. Как можно выявить накопление неполных антирезусных антител в сыворотке крови женщины?

Шанс возникновения резус-конфликта у первородящих женщин ничтожно мал, он составляет лишь 1,5%. Но вот планировать вторую и третью беременность женщинам с отрицательным резусом крови надо заранее. Дело в том, что при каждой последующей беременности содержание в крови антител, которые уничтожают резус- положительные эритроциты, заметно увеличивается. Они ко второй и третьей беременности уже успевают вырасти до крупных размеров и намного легче проникают в кровь малыша. Любая беременность и переливание крови повышают количество антител в крови женщины с отрицательным резусом. Риск возникновения резус - конфликта во много раз увеличивается после аборта, выкидыша и внематочной беременности. Поэтому после родов, переливания крови, аборта и выкидыша женщинам с отрицательным резусом обязательно надо не позднее 3-х суток сделать внутримышечное введение антирезусного иммуноглобулина.
Резус-фактор - это особый белок, находящийся на поверхности красных кровяных тел - эритроцитов. Если этот белок есть, то кровь бывает резус-положительной, а если его нет - резус-отрицательной. Отсутствие или наличие резус-фактора никакого влияния на самочувствие человека не оказывают, однако у женщин при наступлении беременности может возникнуть резус-конфликт, который представляет серьезную опасность плоду. Возникает резус-конфликт, когда резус у матери отрицательный, а у отца - положительный. Если ребенок унаследует положительный резус-фактор отца, то организм женщины с резус-отрицательной кровью может воспринять беременность как нечто чужеродное и начнет вырабатывать антитела, которые начнут "атаковать" чужие клетки. Эти клетки проникают в кровь ребенка и начинают уничтожать резус-положительные эритроциты, функция которых доставлять кислород к тканям и органам развивающегося младенца. Нехватка кислорода для только-только начинающего формироваться плода трагична. Чаще всего такая беременность заканчивается выкидышем, рождением недоношенных детей и даже мертворождения. Даже если малыш выживает, он рискует родиться тяжелобольным. У него могут пострадать мозг, сердце, печень, почки и центральная нервная система. Поэтому при такой беременности необходимо постоянно наблюдаться у гинеколога и не отказываться от лечения.
Если у ребенка резус будет положительный, после родов новоиспеченной мамаше следует повторно сделать введение антирезусного иммуноглобулина для профилактики возникновения резус-конфликта при последующих беременностях.

14. Участковому детскому врачу поручено организовать вакцинацию против туберкулеза. Какие препараты он может использовать для специфической профилактики? Как проводится иммунизация? Кто подлежит вакцинации и ревакцинации?
Вакцина БЦЖ – это ослабленный вакцинный штамм, который не может вызывать заболевания туберкулезом, но позволяет вырабатываться иммунитету против этого заболевания. Поскольку иммунитет, направленный против туберкулеза, вырабатывается только тогда, когда в организме присутствует возбудитель или его вакцинная замена, то сделать убитую вакцину невозможно, поэтому во всех странах применяется одна и та же вакцина БЦЖ различных производителей

Согласно национальному календарю вакцинации Республики Казахстан, вакцина БЦЖ вводится детям в 1-4 день после рождения и в 6 лет.

Вакцина БЦЖ не защищает от заражения палочкой Коха, однако ее главная роль — защита детей до 5 лет от смертельно-опасных осложнений туберкулеза — туберкулезного менингита и диссеминированных форм туберкулеза, которые практически всегда у маленьких детей заканчиваются летальным исходом.

Ревакцинации подлежат дети в возрасте 7 и 14 лет, имеющие отрицательную реакцию на пробу Манту
15. У детского врача, работающего на 8 участке, был выписан из родильного дома новорожденный ребенок. Какие прививки он должен получить по календарному плану прививок?
Согласно Постановлению Правительства РК №2295 от 30.12.2009 и с изменениями и дополнениями от 12.02.2013 плановые профилактические прививки детям проводятся в соответствии с Национальным календарем прививок Республики Казахстан. 

Первыми – еще в роддоме, в 1 - 4 дни жизни – делают прививки от туберкулеза (БЦЖ) и гепатита В.

16. В травматологию поступил больной с открытым переломом, ему необходимо ввести противостолбнячную сыворотку для профилактики столбняка.


Какие аллергические реакции могут развиться у больного при введении сыворотки?


Как их предупредить?
Экстренная профилактика столбняка начинается с первичной хирургической обработки раны и одновременной специфической иммунопрофилактики. Экстренную иммунопрофилактику столбняка нужно провести как можно раньше и аж до 20 дня с момента получения травмы, учитывая длительность инкубационного периода при заболевании столбняком.

Экстренная иммунизация от столбняка. Проводят при травмах, ранениях. В зависимости от предшествующей вакцинации проводится либо пассивная иммунизация (однократное введение 3000 ME антитоксической сыворотки) либо активно-пассивная иммунизация (вводят столбнячный анатоксин и через 30 мин в другое место вводят 3000 ME антисыворотки или 950 ME иммуноглобулина). Если пострадавшему лицу провели полный курс плановой иммунизации от столбняка, то при инфицировании ему необходима лишь экстренная ревакцинация анатоксином. При неполном проведении курса или при полном отсутствии предшествующих прививок проводят активно-пассивную иммунизацию.
Перед введением сыворотки противостолбнячной ставят внутрикожную пробу с сывороткой лошадиной очищенной разведенной 1:100. Для постановки пробы используют шприцы с ценой деления 0,1 мл и тонкими иглами. Разведенную сыворотку вводят внутрикожно в сгибательную поверхность предплечья в объеме 0,1 мл. Учет реакции проводят через 20 мин.

Пробу считают отрицательной, если диаметр отека или покраснения, появляющегося на месте введения, менее 1 см. Пробу считают положительной, если отек или покраснение достигает в диаметре 1 см и более.

При отрицательной внутрикожной пробе сыворотку противостолбнячную вводят подкожно в количестве 0,1 мл (используют стерильный шприц, вскрытую ампулу закрывают стерильной салфеткой). При отсутствии реакции через 30 мин вводят, используя стерильный шприц, всю назначенную дозу сыворотки подкожно (с профилактической целью), внутривенно или в спинномозговой канал (с лечебной целью).

При положительной внутрикожной пробе или возникновении анафилактической реакции на подкожную инъекцию 0,1 мл сыворотки противостолбнячной дальнейшее ее введение противопоказано.
17. У больной Б. 30 лет после укуса пчелы через несколько минут появилась сыпь на коже (как при ожоге крапивой), зуд. Состояние стало быстро ухудшаться. На лице появился отёк, переходящий на шею. Дыхание затруднено, нарастает удушье. Артериальное давление резко падает. Больной теряет сознание. Раньше после укуса пчел такого не наблюдалось. У родителей больной отмечались реакции на антибиотики.


О каком патологическом состоянии идет речь?


Каков механизм реакции?


Какие изменения в составе и количестве иммуноглобулинов наблюдаются при этом?


Как помочь больной?
Отек Квинке, или ангионевротический отек – это острая воспалительная реакция организма, которая возникает локально в коже и подкожной клетчатке. По механизму появления схожа с крапивницей, отличие только в более глубоком поражении тканей.

Аллергические реакции – это один из вариантов ответа иммунной системы на чужеродные белки. В них принимают участие тучные клетки – один из типов лейкоцитов, которые способны соединяться с белками-иммуноглобулинами Ig E. Это приводит к каскадному выбросу биологически активных веществ – медиаторов воспаления. К ним относятся гистамин, простагландины, брадикинин и многие другие. Эти вещества увеличивают проницаемость сосудов, снижают их тонус, изменяют водно-солевой баланс.

Особенность тучных клеток в том, что они не находятся постоянно в крови, как остальные лейкоциты, а локализуются в тканях:

в коже;

подкожной клетчатке;

на слизистых оболочках;

в оболочках внутренних органов.

Поэтому отек Квинке имеет специфические проявления и наблюдается только на коже и в местах с наиболее выраженной клетчаткой.

Усиление проницаемости сосудов, которую вызывают эти вещества, приводит к выходу из сосудов жидкой части крови. Она пропитывает локальную область, что внешне проявляется распуханием мягких тканей. Потери жидкости могут быть значительными, в сосудистом русле уменьшается объем крови. От этого страдает работа сердца, появляются нарушения ритма. У взрослых с предрасположенностью к сердечным патологиям могут быть смертельные последствия.

Чтобы снизить вероятность тяжелых осложнений, до приезда скорой помощи нужно самостоятельно оказать первую помощь.

Если проявление болезни началось после укуса насекомого, животного, необходимо на это место наложить давящую повязку. Она уменьшит приток и отток крови, что позволит снизить всасывание опасного вещества в кровь. Аналогично поступают, если аллергия развивается после внутримышечной инъекции. Врачи советуют на место укола положить холод, чтобы вызвать спазм сосудов и не дать всосаться лекарству.

18. Установите правильную последовательность методики получения иммунных диагностических сывороток:

а) определение АТ в сыворотке при помощи серологических реакций с АГ, которым проводили иммунизацию,

б) взятие крови, получение сыворотки,

в) иммунизация кроликов известными АГ много раз – гипериммунизация,

г) определение титра АТ,

д) стандартизация и маркировка сыворотки.

19. Больной С. 19 лет госпитализирован в инфекционную больницу с подозрением на бруцеллез. Выделить возбудителя и изучить его свойства можно будет только через месяц. Поэтому врач назначил диагностическую серологическую реакцию агглютинации.


Какой материал нужно взять у больного?


Как поставить и учесть ориентировочную и развернутую реакцию агглютинации?

Серологический (реакция агглютинации Райта).

Сыворотку крови.

20. Больная С. 15 лет обратилась к стоматологу с острой зубной болью; в анамнезе аллергией не страдала. Врач в десну ввела 2% лидокаин. После этого через 5 минут состояние пациентки резко ухудшилось: появилась сыпь и отек на лице, шее, удушье; больная теряла сознание.


Какой это тип и механизм реакции?

Ваш предварительный диагноз.


Какая нужна неотложная помощь?


Какая ошибка допущена врачом?