ВИЧ СПИД. ЧМБ Лек.14 ВГВ,ВГС,ВИЧ.. Возбудители парентеральных вирусных гепатитов В, С, D
 Скачать 2.9 Mb.
|
Кыргызская государственная медицинская академияЛекция 14 Тема: Возбудители парентеральных вирусных гепатитов В, С, D. ВИЧ. Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии Лектор Умуралиева А.М. к.м.н., и.о. доцента Вирусные гепатиты – это наиболее распространенные инфекционные заболевания, которые по своей медицинской значимости и размеру социально-экономического ущерба занимают одно из ведущих мест в инфекционной патологии. Характеризуются преимущественно поражением клеток печени развитием острого воспаления, в результате которого нарушается функция печени. В настоящее время известно более семи видов вируса, которые обозначают как вирусы гепатитов A, B, C, D, E, F, G….TTV. В зависимости от основных путей заражения выделяют наиболее изученные: энтеральные вирусные гепатиты (А и Е) или инфекционные – фекально- оральный механизм заражения ; парэнтеральные вирусные гепатиты (В, С, D) – кровяно-контактный механизм заражения. Семейство HepadnaviridaeГепадновирусы – ДНК-геномные оболочечные вирусы. Представлены 2 родами: – Ortohepadnavirus – Avihepadnavirus. Род Ortohepadnavirus включает возбудителя гепатита В – ВГВ/ HBV. Вирус гепатита В (HBV) инфицирует только человека и шимпанзе, поражая печень, в меньшей мере – почки и поджелудочную железу. Вирус гепатита В характеризуется парентеральным (инъекционный, гемотрансфузионный) и половым путем передачи. Возможна вертикальная передача вируса – от матери к плоду (ребенку). ВИРУСНЫЙ ГЕПАТИТ В Антропонозная вирусная инфекция, с парентеральным механизмом передачи, характеризующаяся клинически и морфологически поражением печени с развитием острого и хронического воспаления. Источник инфекции – инфицированный человек (больной или вирусоноситель). Механизм передачи – кровяно-контактный. ВИРУСНЫЙ ГЕПАТИТ В Ежегодно заражается 50 млн. человек Ежегодно погибает 1,5 млн. человек 9-е место среди причин смертности Частота носительства в РФ: От 1% в Центральных районах до 10% на Северном Кавказе ВИРУС ГЕПАТИТА В Семейство Hepadnaviridae Род Orthohepadnavirus Открыт в 1970г. Дейном. Сферическая форма (диаметр 42-47нм). Геном– двунитевая ДНК кольцевой формы (+) цепь на 1/3 короче (-) цепи. (-) цепь связана с ДНК-полимеразой. Белки кодируются (-) цепью. Структура HBV мелкий вирус с геномом в виде кольцевой неполной двунитевой ДНК, образованной минус-нитью и более короткой неполной плюс-нитью. Каждая нить имеет разрывы. Геном кодирует обратную транскриптазу и реплицируется через промежуточное звено РНК. ВИРУС ГЕПАТИТА В HBs –антиген (HBsAg) НВс – антиген (HBcAg) HВe – антиген (НBeAg) HBx – антиген (HBxAg) Вирион, называемый частицей Дейна, имеет диаметр 42 нм. Он включает ДНК-полимеразу и протеин Р, прикрепленные к геному, который окружен сердцевинным (core) антигеном HBc Ag. Снаружи вирион имеет оболочку с гликопротеиновым поверхностным австралийским антигеном – HBs Ag , имеет 2 фрагмента : pre S1, pre S2. Впервые был выделен в 1965 г. из крови австралийского аборигена Б. Блюмбергом. Антиген HBeAg находится в сердцевине вириона и вместе с НВсAg представлен в основном общим полипептидом. НВеAg в отличие от НВсAg выделяются в кровь из гепатоцитов при репликации НВV. Наименее изучен НВхAg, который возможно, в результате нарушения механизма деления приводит к развитию первичного рака печени. Кроме частиц Дейна, в кровь инфицированных людей попадает НВsAg-содержащие частицы (неполные вирионы). Эти частицы могут быть сферическими или нитевидными, НВsAg включает три гликопротеина (L, M, S), содержащие группоспецифические детерминанты HBV. Комбинации этих антигенов создают 8 подтипов HBV, используемые как эпидемиологические маркеры. HBV обладает строгим тропизмом к печени. Инактивируеся при автоклавировании (120°С в течении 45 мин), при стерилизации сухим жаром (180º в течение часа). Характеристика вируса гепатита В
Схема строения вируса гепатита ВРепродукция Прикрепление HBV к гепатоцитам определяется HBsAg, который связывается с человеческим сывороточными белками, что облегчает взаимодействие вируса и мишени в печени. После проникновения сердцевины вируса в гепатоцит , неполная нить ДНК-генома достраивается; формируется полная двунитевая циркулярная ДНК, созревший геном попадает в ядро клетки. Нуклеокапсид сердцевины содержит РНК-зависимую ДНК-полимеразу, имеющую активность обратной транскриптазы и рибонуклеазы Н. В результате синтезируется минус (-) ДНК, → далее синтезируется плюс (+) ДНК на матрице минус (-) ДНК. Оболочка вириона образуется на НВs-содержащих мембранах эндоплазматической сети или аппарата Гольджи → сформировавшийся вирион выходит из клетки экзоцитозом. Схема репродукции гепатита ВЭПИДЕМИОЛОГИЯ ГЕПАТИТА В Основные пути передачи – инъекционный, гемотрансфузии, половой. Возможен вертикальный путь передачи – от матери к плоду. Основные группы риска – медицинские работники : хирурги, стоматологи, урологи, акушеры-гинекологи, врачи-лаборанты; инвазивные медицинские манипуляции : переливание крови и кровезаменителей, нестерильные инъекции, эндоскопические исследования, ЭКО; Группа риска : хронические больные ( парентеральные манипуляции): диабетики, с ХПН на гемодиализе, с болезнями крови; новорожденные дети от матерей, члены семей при контакте; через кожу и слизистые: татуаж, маникюр, педикюр, пирсинг, бритье, чистка зубов; наркоманы, гомосексуалисты, проститутки. ПАТОГЕНЕЗ И КЛИНИКА ГЕПАТИТА В ВГВ заносится гематогенно → размножается в гепатоцитах. Во II половине инкубационого периода (40-180 сут.) вирус выделяется из крови, мочи, спермы, фекалий и секрета носоглотки. Важна роль аутоиммунных гуморальных и клеточных реакций → воспаление печени (увеличение печени, селезенки, боли в правом подреберье), сопровождающееся нарушениями функций печени (желтуха), симптомы общей интоксикации. Инкубационный период – 2-6 мес. Заболевание начинается постепенно, с симптомов общей интоксикации: слабость, недомогание, диспепсические расстройства → появляются ведущие симптомы: тяжесть и боли в правом подреберье, увеличение печени, моча темнеет, кал обесцвечивается, появляется желтуха. Осложнения хронической формы обусловлены хроническим воспалением и некротическими процессами в паренхиме печени → цирроз и первичная карцинома печени. Возможны и внепеченочные поражения : артриты, узелковые периартерииты, гломерулонефриты.
Неспецифическая – печеночные тесты (показатель нарушения функции печени) – содержание ферментов печени, тимоловая проба; – содержание биллирубина. Серологический метод – в сыворотке, плазме крови с помощью ИФА, РНГА определяют АГ вируса и противовирусные АТ: поверхностный антиген (НВsAg), АТ к поверхностному антигену (анти-НВsAg); АТ к сердцевинному антигену (анти- НВсAg IgM, анти-НВсAg IgG); « АГ инфекционности» (НВеAg); АТ к « АГ инфекционности» (анти- НВеAg); АТ к антигену Х (НВхAg). Молекулярно-генетический метод: с помощью ПЦР или метода гибридизации определяют ДНК вируса (HBV DNA) в крови и биопатах печени. ЛЕЧЕНИЕ Средства специфической терапии отсутствуют, лечение симптоматическое. Перспективно применение α-ИФН и его индукторов, а также ингибиторов ДНК-полимеразы (ламивудин). Специфическая профилактика осуществляется рекомбинантной генно-инженерной вакциной, содержащей HBsAg (субъединичная вакцина – ВГВ ). Прививаются новорожденные в первые сутки жизни – в роддоме, и через 1-2 мес. до года → ревакцинация. Также прививаются взрослые из группы риска – медработники. Неспецифическая профилактика – исключить заражение вирусом при парент-ых манипуляциях (стерильность). Вирус гепатита СВирус гепатита С (НСV) – РНК-геномный семейство Flaviviridae рода Hepacivirus Гепатит С – антропонозная инфекция с парентеральным механизмом передачи возбудителя , преимущественным поражением печени – развитием хронических форм, с исходом в цирроз и первичную карциному печени. Возможен половой путь инфицирования. ВИРУС ГЕПАТИТА С (ВГС) Семейство – Flaviviridae Род - Hepacivirus Вирион – сферической формы - 55-65 нм. Геном - однонитчатая (+) РНК Известно 14 генотипов: Отсутствие животных моделей. СТРУКТУРА ВГС Вирион НСV окружен суперкапсидом, имеет сферическую форму (размер 55-65 нм). Геном – линейная однонитевая плюс РНК, связана с белком С (core –капсидным белком). Гликопротеины оболочки – Е1, Е2, белок М, неструктурные белки с ферментативной активностью – NS1-NS5, регулирующие репродукцию вируса. Вирус обладает выраженной изменчивостью: имеет 6 сероваров, выявлено более 10 генотипов и более 80 субтипов НСV. ВИРУС ГЕПАТИТА С (ВГС) Антигенная структура Гликопротеины оболочки Е1 и Е2 Антиген сердцевины (Cor) – НСс-антиген Неструктурные белки: NS1, NS2, NS3, NS4, NS5. ВИРУС ГЕПАТИТА С (ВГС) Репродукция: Гепатоциты Мононуклеарные клетки Прямое цитопатическое действие с цитолизом. В геном не встраивается Характеристика вируса гепатита С
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА С (ВГС) В мире инфицировано более 500 млн. человек (1%). Основные пути передачи: Гемотрансфузии Половой путь В/в введение наркотиков Медицинские манипуляции Вертикальный путь передачи КЛИНИКА И ПАТОГЕНЕЗ ВГСИнкубационный период – до 6 мес., чаще 1,5-2 мес. Больной выделяет вирус за несколько недель до появления клинических признаков и в течение 10 нед после начала проявлений. ВГС подвержен высокой степени мутации и постоянно меняет свою АГ структуру → АТ не могут распознавать АГ → эффект иммунного ускользания → переход в хроническую форму : бессимптомную латентную → « ласковый убийца» Частым исходом хронического течения являются фиброз, цирроз, рак печени. На течение ВГС оказывают факторы: пожилой возраст, мужской пол, алкоголизм, курение, наличие других вирусных инфекций, осложнения др. заболеваний. В анамнезе – частые парентеральные манипуляции (переливания, инъекции, диализ), наркоманы, проститутки. Микробиологическая диагностика. В сыворотке, плазме крови определяют: РНК вируса (HCV RNA) – с помощью гибридизации; ПЦР; антитела к вирусу (anti-НСV RNA) – с помощью гибридизации, ПЦР; антитела к вирусу ( анти-HCV IgM, анти-HCV IgG) – в ИФА, иммуноблотингах ЛЕЧЕНИЕ симптоматическое и противовирусное → препараты интерферона α-ИНФ. Средства специфической профилактики не разработаны. Это социальная проблема. Вирус гепатита DВирус гепатита D (HDV) – дефектный РНК-содержащий вирус один из возбудителей парентеральных вирусных гепатитов (ВГD, или дельта-вирус). Вирус передается парентерально. Резервуар возбудителя – инфицированный вирусом гепатита В человек (наличие HBsAg ). ВГД – дефектный вирус, т.е. полностью зависит от передачи, репродукции и наличия ВГВ. Моноинфекция ВГД абсолютно невозможна. Структура HDV имеет сферическую форму (35-40 нм) и маленький РНК-геном, с минус однонитевой кольцевой РНК – HDV напоминает вироиды. Геном заключен в дельта-антигенную сердцевину, снаружи которой имеется HBsAg-содержащая оболочка, кодируемая вирусом гепатита В (HВV), РНК-геном реплицируется и транскрибируется в ядре клеточными ферментами. Вирионы HDV образуются с помощью HBsAg. Сердцевинный дельта-антиген представлен малой (24 кД) или большой (27 кД) формой: преобладает малая форма. Различают три генотипа и несколько субтипов HDV. Чаще встречаются вирусы 1-го генотипа. ВИРУС ГЕПАТИТА D Не имеет оболочки. Вирион – сфера 36 нм. Состоит из однонитчатой РНК и сердцевинного HDc- антигена (дельта-антиген). HDc-антиген состоит из 2-х белков, регуляторов репликации генома 3 генотипа. Схема строения вируса гепатита DХарактеристика вируса гепатита D
ВИРУС ГЕПАТИТА D Не классифицирован. Идентифицирован в 1977г. Ризетто. Не вызывает самостоятельной инфекции. Только вместе с гепатитом В. Не имеет оболочки. Усугубляет течение инфекции вызванной вирусом гепатита В. ПАТОГЕНЕЗ И КЛИНИКАПАТОГЕНЕЗ И КЛИНИКА Аналогично гепатиту В, возможно течение в 2 вариантах: - коинфекция (Со-инф.) – одновременное заражение ВГВ и ВГД; течение как при гепатите В; - суперинфекция – заражение ВГД инфицированного человека ВГВ; очень короткий инкубационный период, максимальная интоксикация, тяжелое течение, переход в хрон-ую форму. Микробиологическая диагностика. В сыворотке плазме крови определяют РНК и антигены вируса, антитела к вирусу РНК вируса (HDV RHA) выявляют с помощью молекулярной гибридизации, ПЦР. Антиген вируса (HDV Ag) выявляют в ИФА, РИА, иммуноблотинге. Антитела к вирусу (анти-HDV IgM, анти- HDV IgG) выявляют в ИФА. Дифференциация проводится с учетом маркеров других возбудителей вирусных гепатитов. Средства специфической химиотерапии и профилактики отсутствуют. Специфическая профилактика. Вакцина против гепатита В защищает против дельта- вируса из-за общности HBsAg. ВИЧ-инфекцияКафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии и.о. доцента Умуралиева А.М. Семейство ретровирусы Retroviridae Подсемейство лентивирусы Lentivirinae (“медленные” вирусы). ВИЧ 1и ВИЧ2 (HIV1, HIV2) вирус висны овец кошачий вирус иммунодефицита кошек вирус артрита коз вирус инфекционной анемиии лошадей. Кроме сходства по своему строению эти вирусы вызывают однотипные патологии. Возбудитель ВИЧ-инфекции – лимфотропный вирус, относящийся к семейству Retroviridae роду Lentivirus. Вирус открыт в 1983 г. одновременно французским вирусологом Л.Монтанье и американским ученым Р.Галло. Вирус иммунодефицита человека Вирус иммунодефицита человека – ВИЧ-1, ВИЧ-2 (human immunodifliency virus – HIV-1, HIV-2). Вызывает у человека ВИЧ-инфекцию терминальной стадией которой является СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита). ВИЧ-инфекция характеризуется преимущественным поражением иммунной системы, длительным течением, полиморфными клинические проявления и высокой летальностью. Пути передачи – половой, через кровь, грудное молоко трансплантариоз. Структура. Вирион имеет сферическую форму, размером 100 нм, снаружи покрыт оболочкой, сформированной при почковании через плазматическую мембрану. Оболочка содержит белки: поверхностные, групповые гликопротеины gp120* и gp41* (продукты расщепления белка предшественника gp160). Сердцевина ВИЧ похожа на усеченный цилиндр. Под оболочкой находится матриксный протеин р17, капсидный протеин р 24, нуклеокапсидные протеины (р7, р9 и др.), Капсид заключает две идентичные колонии плюс-нити РНК-генома, содержащие структурные гены. Геном ВИЧ-2 отличается от генома ВИЧ-1 структурой гена. Схема строения вируса иммунодефицита человекаГликопротеин gp120 имеет константные участки, которые формируют 9 антигенных эпитопов. ВИЧ-1 делят на три группы М, N, О. Большинство изолятов относят к группе Na в которой различают 10 подтипов ВИЧ (А, В, C, D, F-1, G, II, L, K). Высокая изменчивость ВИЧ связана с генетическими ошибками, возникающими при сложной многоступенчатой репродукции вирусов. ВИЧ2 – основные отличия от ВИЧ1: Ген vpx вместо гена vpu. Вместо белков gp120, gp41, gp160, gp24 у ВИЧ2 белки gp140, gp105, gp36 Мишень для ВИЧ1 и ВИЧ2 Клетки содержащие CD4-рецептор (55кд) 4 иммуноглобулинподобных домена, цитоплазматический участок. Т-лимфоциты, (Т-хелперы-75% популяции) В-лимфоциты. ВИЧ поражает не только Т-лимфоциты-хелперы. CD4-рецепторы существуют и на поверхности макрофагов, эозинофилов, тимоцитов, мегакариоцитов, альвеолярных макрофагов легких, клетках Лангерганса, фолликулярныых дендритных клетках лимфатических узлов, клетках олигодендроглии и астроцитов мозга, эпителиальных клетках кишечника, эпителиальных клетках шейки матки. Основные корецепторы для ВИЧ CCR5 и СXCR4. В нормальных клетках они служат полноценными рецепторами для специфических клеточных белков регуляторов – хемокинов. А для взаимодействия клеток с ВИЧ они играют всего лишь роль помощников для основного рецептора CD4. Однако без этих белков-корецепторов, также как без CD4-рецептора, вирус проникнуть в клетку не может. Репродукция. Вирус (1) связывается гликопротеином CD4 Т-хелперов и клеток макрофагального происхождения (макрофаги, дендритные и микроглиельные клетки). ВИЧ входит в клетку путем слияния оболочки с плазматической мембраной клетки. Проникший в цитоплазму клетки вирион высвобождает геномную РНК. С помощью обратной транскриптазы на матрице РНК происходит синтез комплементарной ДНК (кДНК), которая (2, 3), затем интегрирует синтез с ядерной ДНК клетки. Рекомбинантная ДНК – провирус (4) служит основой синтеза геномной РНК вируса и иРНК, которые обеспечивают синтез компонентов вируса и сборку вирионов. Вирионы выходят из клетки путем почкования (5): сердцевина вируса «одевается» в измененную плазматическую мембрану клетки. Схема репродукции ВИЧЖизненный цикл ВИЧ(1-2 суток): 1.Адсорбция и проникновение в клетку. 2.Высвобождение вирусной РНК, синтез провирусной ДНК и ее интеграция в геном. 3.Синтез РНК вируса, трансляция и формирование вирусных белков. 4.Сборка созревание и высвобождение образованных вирионов. 1 жизненный цикл – до 1 000 000 000 частиц. Сегодня на нашей планете ежедневно вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) заражаются около 15000-17000 человек, т.е. 1 человек каждые 6-7 секунд.
Более 80% ВИЧ-положительных составляют люди, употребляющие наркотики. По некоторым оценкам, только в РФ число потребителей инъекционных наркотиков 3 млн. В Украине - более 600 000 Казахстане - до 200 000. Большая часть из них неизбежно будет инфицирована ВИЧ в ближайшем будущем. Причины быстрого распространения ВИЧ Высокая восприимчивость Многообразие естественных путей передачи Высокая инфекционность вируса Длительный период заразности инфицированных Отсутствие эффективных средств лечения и специфической профилактики Английский исследователь Д. Спил сказал: “Чтобы оценить клинику СПИДА, необходимо знать всю медицину”. СТАДИИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ Инкубационный период (2-4 недели) Стадия первичных проявлений (годы) Стадия вторичных заболеваний Терминальная стадия (СПИД) Средняя продолжительность жизни 12 лет
Поздняя ВИЧ-инфекция проявляется развитием оппортунистических инфекций, развивающихся вследствие прогрессирующего снижения количества CD4-клеток (<50 /мм3) → кандидоз, токсоплазмоз, пневмоцистная пневмония, герпетические инфекции. СПИД развивается в терминальной стадии ВИЧ-инфекции → синдром истощения у взрослых и задержки развития у подростков, неоплазии (саркома Капоши, лимфома), психич. расстройства. Наиболее характерными симптомами нового заболевания были и остается редкая и нетипичная форма пневмонии. Примерно у 10% больных возникает рак, причем преимущественно две его формы: рак лимфоидной системы – лимфома и обезображивающая форма рака, известная как саркома Капоши. Микробиологическая диагностика. Серологический метод: иммуноферментный анализ (ИФА) – тест первого уровня для выявления ВИЧ-инфицированных ( диагностикум – из зараженных клеточных культур или рекомбинантные ДНК). В сыворотке крови определяют: антитела к белкам gp120, p24 и другим анатигенам ВИЧ. Положительный результат ИФА подтверждается постановкой иммуноблотинга (вестернблотинга). Результаты считают положительными после обнаружения АТ к р24, р31, gp41 либо к gp120. На начальных стадиях заражения эффективно определение АГ р24 в крови. Молекулярно-генетический метод: ПЦР и метод гибридизации нуклеиновых кислот. Важным показателем ВИЧ-инфекции является определение содержание CD-лимфоцитов и соотношение CD4/CD8. Специфическая профилактика. Надежной и безопасной вакцины не существует. ЛЕЧЕНИЕЛЕЧЕНИЕ Препараты , подавляющие активность обратной транскриптазы – зидовудин, азилотимидин, ставудин. Комбинированное применение антивирусных препаратов, иммунокоррегирующих средств – ИНФ, имуномодуляторы. Профилактика развития угрожающих оппортунистических инфекций (особенно бактериальных) – ко-тримазол. Пять миллионов долларов, выделяется в России ежегодно на борьбу со СПИДом. В США на подобные цели ежегодно выделяется 5 миллиардов долларов. В Бразилии — стране, которая сопоставима по размерам и по уровню жизни с Россией, государство тратит на борьбу со СПИДом 1 млрд. 780 млн. долларов в год. Эта цифра составляет две трети всего бюджета здравоохранения России. ИММУНОПРОФИЛАКТИКАИММУНОПРОФИЛАКТИКА Надежной и безопасной вакцины против ВИЧ не существует. Испытываются различные виды вакцины. Общие методы профилактики: -выявление ВИЧ-инфицированных и больных со СПИДом (группы риска); - контроль препаратов крови, стерильности, использование разового мед. инструмен., индивидуальных средств защиты; - профилактика БППП(сан.-просвет. работа) 1 декабря – Всемирный день борьбы со СПИДом. 15 мая – Всемирный день памяти жертв, умерших от СПИДа. Спасибо за внимание. |