Задачи и эталоны ответов по микробиологии 2010г... Задача 1 в лабораторию поступила кровь больного с подозрением на синдром приобретенного иммунодефицита (спид). Задания
Скачать 217 Kb.
|
2010 год Задачи и эталоны ответов по микробиологии ( гос.экзамен ) Задача № 1 В лабораторию поступила кровь больного с подозрением на синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД). Задания: Назовите метод диагностики, который нужно использовать для уточнения диагноза. Укажите объем крови, который направляется для исследования в лабораторию. Перечислите серологические реакции, которые можно поставить для диагностики СПИД. Назовите результат, который может явиться основанием для подтверждения диагноза. Перечислите пути заражения СПИД. Эталон ответа к задаче № 1 Методы лабораторной диагностики делятся на вирусологические, иммуновирусологические (серологические) и молекулярно-генетические. Наиболее часто используется серологический метод – выявления антител с помощью ИФА. Для проведения исследования в лабораторию направляют 5 мл венозной крови. Серологические реакции – ИФА, ИБ, РИП. Обнаружение антител к определенным белкам. Половой, через кровь и препараты крови, трансплантацию органов, трансплацентарно и др. Задача № 2В бактериологической лаборатории при посеве гемокультуры на среде Эндо выросли мелкие, бесцветные, с гладкими краями колонии. У культуры изучены морфологические, культуральные и биохимические свойства, по которым ее отнесли к S. typhi. Задания: Назовите среды, которые использовались для выделения чистой культуры и первичной идентификации. Перечислите состав среды, которая использовалась для первичной идентификации. Опишите характер изменения указанной Вами среды при росте S. typhi. Охарактеризуйте морфологические, культуральные и биохимические свойства S. typhi. Перечислите свойства, которые еще необходимо изучить для окончательной идентификации. Эталон ответа к задаче № 2 Для выделения чистой культуры сальмонелл использовалась комбинированная (трехсахарная) среда Олькеницкого, а также среда – скошенный МПА для накопления культуры. Среда Олькеницкого состоит из питательной основы – МПА, глюкозы, сахарозы, лактозы, соли Мора, мочевины, индикатора, гипосульфита. Брюшнотифозные бактерии расщепляют глюкозу с образованием кислоты без газа, не ферментируют лактозу и продуцируют сероводород, следовательно, изменяется только столбик среды (пожелтение) и происходит почернение на границе столбика агара и скошенной части. Сальмонеллы брюшного тифа – грамотрицательные с закругленными концами подвижные палочки, спор и капсулы не образуют. На средах с лактозой образуют бесцветные колонии; на висмут-сульфитном агаре –черные колонии; в "пестром ряду" ферментируют углеводы (глюкозу, мальтозу и маннит) с образованием кислоты. Для окончательной идентификации нужно определить антигенные свойства, провести фаготипирование и антибиотикочувствительность. Задача № 3Из гнойного отделяемого больного с подозрением на острую гонорею приготовлен фиксированный мазок. Задания: Назовите сложный метод окраски, который Вы используете в данном случае и реактивы для этого способа. Перечислите свойства микроорганизмов, которые можно определить при микроскопии этого мазка. Обоснуйте необходимость знаний вышеперечисленных свойств микроорганизмов. Опишите морфологию возбудителей гонореи и их расположение по отношению к лейкоцитам. Назовите процесс и его этапы, результатом которого может явиться такое расположение бактерий. Эталон ответа к задаче № 3 Используется основной сложный дифференциальный метод окраски – метод Грама. Морфология, тинкториальные свойства. Знание морфологических и тинкториальных свойств позволяет дифференцировать микроорганизмы между собой. Возбудитель гонореи – гонококки – это кокки в виде кофейных зерен, располагаются попарно вогнутыми сторонами друг к другу. В мазках наблюдается внутри- и внеклеточное расположение диплококков в лейкоцитах. Внутриклеточное расположение бактерий обусловлено фагоцитозом. Этапы фагоцитоза: хемотаксис, адгезия, эндоцитоз, внутриклеточное переваривание. Задача № 4При бактериологическом исследовании инфекционного материала выделена культура, у которой необходимо определить подвижность. Задания: Назовите методы, которые можно использовать для этого. Назовите методы микроскопии, которые можно использовать с этой целью, их достоинства и недостатки. Опишите методику приготовления препаратов для выявления подвижности микроскопическим методом. Укажите систему микроскопа, применяемую для изучения подвижности микробов Опишите группы бактерий в зависимости от расположения жгутиков. Эталон ответа к задаче № 4 Подвижность бактерий можно определить бактериологически (посев в столбик полужидкого агара) и микроскопически. Для определения подвижности микроскопически используют методы "висячей" и "раздавленной" капли. Из-за испарения жидкости препарат "раздавленная" капля годен для исследования непродолжительное время. "Висячая" капля в этом плане предпочтительнее – испарение происходит медленно. Препарат "раздавленная" капля: на предметное стекло наносят каплю бульонной культуры и раздавливают ее таким образом, чтобы не было пузырьков воздуха в ней. Для микроскопии этих препаратов обычно используется "сухая" система микроскопа, объектив 40. Подвижность бактерий обусловлена жгутиками. По расположению жгутиков бактерии делится на монотрихи, амфитрихи, лофотрихи, перитрихи. Задача № 5Для проведения бактериологического исследования получено задание на приготовление питательных сред. Задания: Назовите требования, которым должны отвечать питательные среды. Укажите требования, предъявляемые к используемой посуде. Опишите технику определения рН среды. Укажите этапы приготовления питательных сред. Перечислите методы контроля питательных сред. Эталон ответа к задаче № 5 Любая среда для культивирования бактерий должна быть питательной, иметь оптимальные влажность, вязкость, рН, быть изотоничной, стерильной, по возможности прозрачной. Посуда, используемая для приготовления питательных сред, должна быть сухой и химически чистой; лучше всего пользоваться стеклянной, эмалированной или алюминиевой посудой. Перед применением посуду необходимо тщательно вымыть, прополоскать и высушить. Посудой, предназначенной для приготовления сред, запрещается пользоваться в других целях (хранение химреактивов, дезрастворов) Определение рН среды проводят ориентировочно с помощью индикаторных бумажек, окончательное установление рН проводят потенциометрически. Этапы приготовления сред: а) варка; б) установление величины рН; в) осветление; г) фильтрация; д) розлив; е) стерилизация; ж) контроль. Готовые питательные среды подвергаются контролю на стерильность, химическому и биологическому контролю. Задача № 6На исследование в бактериологическую лабораторию поступила кровь, посеянная в среду Раппопорт, от больного с клиническим диагнозом «брюшной тиф».Задания: Укажите, с какого дня можно использовать бактериологический метод исследования и какое количество крови берут для исследования. Опишите характер роста брюшнотифозных бактерий на среде Раппопорт. Перечислите питательные среды, которые можно использовать для отсева культуры. Опишите характер роста культуры на этих средах. Укажите, какие необходимо еще провести исследования для определения видовой принадлежности выделенных микроорганизмов. Эталон ответа к задаче № 6 Выделение гемокультуры проводят на первой неделе заболевания (период бактериемии). Для исследования берется венозная кровь в объеме 10 мл. На среде Раппопорт брюшнотифозные бактерии дают диффузно-мутящий рост с изменением цвета среды и отсутствием газа в поплавке. Для отсева выросшей культуры используют дифференциально-диагностические среды (Эндо и др.) При росте брюшнотифозных бактерий на среде Эндо образуются бесцветные, бледно-розового цвета колонии с темным центром (цвета среды); на среде Олькеницкого – изменение цвета столбика без газообразования и почернение на границе скошенной части и столбика. С целью определения видовой принадлежности (идентификации) культуры нужно определить биохимические свойства, провести серологическую идентификацию, фаготипирование и изучить антибиотикочувствительность. Задача № 7В лабораторию поступил материал (гной) от больного с подозрением на гнойно-воспалительное заболевание. Вы получили задание определить морфологию микроорганизмов. Задания: Техника приготовления мазка из гноя. Укажите метод фиксации, который вы примените. Целевое направление фиксации мазка. Выберите метод окраски препарата. Назовите красители и этапы для окраски по этому способу. Эталон ответа к задаче № 7 Ближе к краю предметного стекла наносят гной, другим предметным стеклом его накрывают и плотно придавливают. Далее захватывают пальцами свободные концы стекол и разводят в разные стороны. Получают два мазка с одинаково распределенным материалом. Фиксацию мазков, приготовленных из нативного материала, проводят химическим способом. Фиксация необходима для закрепления мазка на поверхности стекла и лучшей окрашиваемости микробных клеток. Предпочтительнее всего использовать сложный дифференциальный метод окраски – метод Грама. На фиксированный мазок наносят через фильтрованную бумагу основной раствор карболового генцианового фиолетового, снимают бумагу, сливают краситель и наносят раствор Люголя, сливают раствор Люголя, обесцвечивают мазок спиртом этиловым, промывают водой и докрашивают водным раствором фуксина. Задача № 8В окрашенных мазках, приготовленных из гнойного отделяемого флегмоны, обнаружены шаровидные фиолетового цвета микроорганизмы, располагающиеся в виде цепочек. Задания: Назовите эти микроорганизмы. Укажите систему светового микроскопа, который был использован для просмотра препарата. Опишите метод окраски, применяемый в данном случае. Объясните причину расположения кокков в виде цепочек. Перечислите заболевания, которые могут вызвать данные микроорганизмы. Эталон ответа к задаче № 8 Это кокки, расположение в цепочку характерно для стрептококков. Микроскопия микропрепаратов, обычно проводится с применением иммерсионной (погружной) системы. Для окрашивания мазков применяется обычно сложный дифференциальный метод окраски по Граму, который и использован в данном случае. Расположение кокков в цепочку обусловлено их делением в одной плоскости и неполным разделением друг от друга. Стрептококки могут вызывать пиодермиты, ангину, отит, флегмону, сепсис, рожистое воспаление, скарлатину, ревматизм и др. Задача № 9В бактериологическую лабораторию поступил исследуемый материал (фекалии) от больного с подозрением на кишечную инфекцию. Задания: Правила, соблюдаемые при взятии и доставке данного материала в лабораторию. Укажите цель поступления исследуемого материала в лабораторию. Перечислите методы микробиологической диагностики, которые можно использовать. Приведите правила, которые необходимо соблюдать при работе в бактериологической лаборатории. Укажите, каким считается материал от больного с подозрением на инфекционное заболевание. Эталон ответа к задаче № 9 Материал берут в ранние сроки заболевания, до приема антибиотиков, в достаточном объеме в стерильную посуду и доставляют в лабораторию в максимально короткие сроки. Разрешается сохранение материала в холодильнике при 40˚С непродолжительное время. Материал транспортируют в специальных биксах, пеналах или контейнерах. Цель поступления материала – микробиологическое исследование Для исследования фекалий больного используется бактериологический метод. При проведении микробиологических исследований необходимо соблюдать следующие правила: все сотрудники должны работать в медицинских халатах, шапочках и сменной обуви; нельзя курить, принимать пищу в помещениях, где работают с инфицированным материалом; с инфицированным материалом работают с помощью инструментов; запрещается выходить за пределы лаборатории в халатах; тщательно проверяют целостность лабораторного оборудования; посуду при посеве материала маркируют; все посевы проводят, соблюдая правила асептики; растворы, содержащие патогенные микроорганизмы, набирают пипеткой с помощью резинового баллона; запрещается насасывать ртом и переливать растворы через край из сосуда в сосуд; при случайном попадании инфицированного материала на различные поверхности это место необходимо тщательно продезинфицировать; хранение, наблюдение за культурами микроорганизмов и их уничтожение производят согласно специальной инструкции; все культуры патогенных микробов регистрируют в специальном журнале; по окончании работы руки необходимо тщательно вымыть и при необходимости обработать дезраствором. Весь материал, поступающий в бактериологическую лабораторию на исследование, должен рассматриваться как инфицированный. Задача № 10В бактериологическую лабораторию поступил материал (кусочки некротизированной ткани, отделяемое раны) от больного с диагнозом «газовая гангрена». Задания: Назовите микробы, которые вызывают это заболевание. Перечислите экспресс- и ускоренные методы диагностики, которые можно использовать. Укажите питательные среды, которые нужно приготовить для проведения бактериологического исследования. Назовите особенности культивирования микробов. Перечислите методы создания анаэробных условий. Эталон ответа к задаче № 10 Возбудителями газовой гангрены являются C. perfringens, C. novyi, C. septicum, C. histolyticum, C. bifermentans, C. sporogenes и др. Экспресс-анализ проводят с помощью световой микроскопии, иммунофлюоресцентного метода и газовой хроматографии; ускоренную диагностику проводят посевом патологического материала на среду Вильсона-Блера и в пробирку с лакмусовым молоком. Кровяной агар с глюкозой (агар Цейслера), среда Китта-Тароцци, лакмусовое молоко, среда Вильсона-Блера, среды "пестрого ряда", желточный агар. Особенностью культивирования анаэробов является создание бескислородных условий. Применяют физические, химические и биологические способы. Задача № 11 В вирусологической лаборатории заразили куриные эмбрионы носоглоточными смывами от больных с подозрением на грипп. Необходимо продолжить исследования и провести идентификацию вирусов. Задания: Назовите полости эмбриона, в которые можно провести заражение. Опишите технику заражения куриных эмбрионов. Опишите технику вскрытия и забора вируссодержащей жидкости. Назовите метод идентификации вирусов в данном случае, и что для этого подготовить. Опишите результат реакции, который будет указывать на наличие вируса. Эталон ответа к задаче № 11 При заражении куриного эмбриона материал вводится в аллантоисную и амниотическую полости, желточный мешок, а также на хориеналлантоисную оболочку. Куриный эмбрион овоскопируют и определяют границы воздушной камеры, жизнеспособность эмбриона. Скорлупу над воздушной камерой дезинфицируют, делают прокол в скорлупе, через который вводят с помощью шприца исследуемый материал. Отверстие в скорлупе (место прокола) заливают стерильным парафином. Дезинфицируют скорлупу над воздушной камерой и срезают ее на 2-3 мм выше границы камеры, отмечают изменение оболочки, затем стерильной пастеровской пипеткой делают прокол в оболочке и отбирают вирусосодержащую жидкость. Индикацию вируса в аллантоисной или амниотической жидкости проводят в РГА, а идентификацию – в РТГА (или в РСК) с использованием специфических сывороток. В РГА гемагглютинация указывает на наличие вируса в материале, отсутствие гемагглютинации в РТГА (торможение гемагглютинации) свидетельствует об идентификации (типировании) с помощью специфической гриппозной сыворотки. Задача № 12 При лабораторном исследовании мокроты больного в микропрепарате обнаружены тонкие, длинные, окрашенные в красно-рубиновый цвет палочки, располагающиеся в виде «кос». Задания: Назовите возбудителя заболевания. Укажите метод диагностики, которым выявлен возбудитель. Опишите этот метод обнаружения возбудителя. Назовите этапы окраски по Цилю-Нильсену. Назовите фактор, который придает микроколлониям вид «кос». Эталон ответа к задаче № 12 Туберкулезная палочка – М. tuberculosis. Ускоренный метод микрокультур Прайса. Мокроту наносят на несколько стерильных предметных стекол. Подсушивают стекла, сухие мазки погружают на 15–20 мин в 2% раствор серной кислоты, затем промывают раствором хлорида натрия и помещают в кровяную среду. Инкубируют при t 37-38°С . Результаты учитывают на 1, 15 и 30-й день. Мазки окрашивают по Цилю-Нильсену. Положительными будут посевы, в которых на стекле выявляются микроскопические колонии в виде "жгутов", "кос" и "пауков". На фиксированный мазок кладут фильтровальную бумагу и наливают на нее карболовый фуксин Циля, мазок подогревают над пламенем горелки до появления паров, охлаждают, затем, добавив новую порцию красителя, опять подогревают (2-3 раза). Снимают фильтровальную бумагу. Препарат обесцвечивают путем погружения или нанесения на него 5% раствора серной кислоты и тщательно промывают водой. Докрашивают мазок водно-спиртовым раствором метиленового синего 3-5 мин., промывают водой, высушивают. Вид "кос" микроколониям придает липидная фракция микобактерий (корд-фактор – димиколат трегалозы). Задача № 13В лабораторию поступили испражнения от больного с подозрением на дизентерию.Задания: Перечислите микроорганизмы, которые могут явиться причиной данной инфекции. Перечислите питательные среды, которые следует приготовить для проведения исследования. Назовите метод лабораторной диагностики, который необходимо применить. Перечислите известные Вам элективные питательные среды для культивирования шигелл. Характер роста дизентерийных бактерий на средах, содержащих лактозу. Эталон ответа к задаче № 13 К настоящему времени известно 4 вида шигелл: S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii, S. sonnei. Для проведения исследования необходимо подготовить среды Плоскирева, Левина, Эндо. В данном случае применяют бактериологический метод исследования. Среды, содержащие желчь (среда Плоскирева, среда Левина, Эндо). На средах, содержащих лактозу, дизентерийные бактерии растут, образуя бесцветные полупрозрачные колонии (цвета среды). Задача № 14 Получено задание на определение степени загрязненности воздуха родильного дома. Задания: Цели санитарно-бактериологического контроля воздуха в ЛПУ. Назовите санитарные показатели, которые необходимо определить. Назовите санитарно-показательные микроорганизмы воздуха родильного дома. Перечислите и опишите методы забора воздуха, которые можно использовать. Перечислите питательные среды, которые необходимо использовать. Эталон ответов № 14 Проведение текущего санитарного надзора (в плановом порядке) и по эпидпоказаниям. Бактериологическое исследование воздуха предусматривает определение: общего содержания микроорганизмов в 1 м3 (исследуют пробу 100 л); содержания стафилококков в 1 м3 (исследуют пробу 150 л). Санитарно-показательные микроорганизмы – золотистые стафилококки (S. aureus). Для определения общего содержания микроорганизмов и золотистого стафилококка в 1 м3 воздуха отбор проводят аспирационным методом с помощью приборов, а также более простым, но менее точным методом Коха (естественная седиментация). Определение общей обсемененности проводят посевом на пластинку МПА, санитарно-показательных – на ЖСА. Задача № 15Работнику животноводческой фермы поставлен диагноз «бруцеллез». В местной районной больнице нет лаборатории для диагностики особо опасных инфекций. Задания: Назовите материал, который можно взять для исследования в обычной лаборатории. Перечислите реакции, используемые для ускоренной диагностики бруцеллеза. Опишите схему постановки выбранной Вами реакции. Назовите антиген, используемый в этой реакции. Опишите схему учета данной реакции. Эталон ответа к задаче № 15 В обычной лаборатории для исследования используют сыворотку крови больного. Для ускоренной диагностики бруцеллеза применяют реакцию агглютинации бенгальского розового, с кислым антигеном, Хеддльсона, РИФ. Чаще в очагах бруцеллеза используют реакцию Хеддльсона. Реакцию Хеддльсона ставят на обезжиренном стекле, расчерченном на 6 квадратов (4×4 см каждый). На первом квадрате пишут номер сыворотки, на следующие микропипеткой наносят исследуемую сыворотку: 0,04; 0,02; 0,01 мл и контроль 0,02 мл. К опытным каплям добавляют 0,03 мл диагностикума, в контроль – 0,03 мл физиологического раствора. Последовательность смешивания – от минимальной дозы сыворотки к максимальной. Неразведенный единый бруцеллезный диагностикум. Отсутствие агглютинации во всех дозах сыворотки – реакция "отрицательная"; агглютинация только в дозе 0,04 мл – "сомнительная"; в дозах 0,02-0,01 – "положительная"; во всех дозах сыворотки – "резко положительная". Задача № 16Для уточнения диагноза «острая кишечная инфекция» педиатр направил в бактериологическую лабораторию испражнения, рвотные массы и слизь из носоглотки больных новорожденных детей. Задания: Укажите, какой микробиологический метод диагностики нужно использовать для подтверждения диагноза. Перечислите бактерии, которые могли вызывать подобные заболевания у новорожденных. Перечислите питательные среды, необходимые для проведения исследования. Назовите возможный путь заражения детей. Опишите мероприятия, которые можно провести в палате с новорожденными. Эталон ответа к задаче № 16 Для подтверждения диагноза нужно использовать бактериологический метод. В первую очередь можно подумать об энтеропатогенных кишечных палочках, но могут быть и другие представители энтробактерий. Необходимо использовать для проведения исследования дифференциально-диагностические среды – Эндо, Левина. Дети могли инфицироваться через плохо обработанную посуду для кормления, контаминированную микроорганизмами от бактерионосителей (медперсонал), или через воду, т.е. алиментарный путь заражения. Больных людей необходимо изолировать, нужно обследовать медперсонал и матерей на носительство бактерий. Задача № 17 Для подтверждения диагноза «ОРЗ? Грипп?» нужно провести ряд исследований. Задания: Перечислите вирусы – возбудители ОРЗ. Перечислите методы лабораторной диагностики, которые можно использовать для подтверждения диагноза. Перечислите клинический материал, который может быть использован для исследований. Опишите технику обработки материала для выделения вирусов. Назовите биологические системы, которые используются для выделения вирусов. Эталон ответа к задаче № 17 Вирусы гриппа, парагриппа, RS-вирус, вирусы паротита и кори, коронаровирусы, реовирусы, риновирусы, вирусы Коксаки и ЕСНО, аденовирусы. Риноцитоскопия, иммунофлюоресцентный, иммуноферментный – экспресс методы (определение антигена); вирусологический и серологический методы. Материал для исследования – мазки-отпечатки, носоглоточное отделяемое (смыв), кровь, парные сыворотки. Исследуемый материал (носоглоточный смыв) обрабатывают антибиотиками, которые действуют на бактериальную и грибковую флору. Для выделения вирусов используются культуры клеток и куриные эмбрионы. Задача № 18В лабораторию поступила кровь больного с диагнозом «брюшной тиф». Болеет 10 дней. Задания: Назовите методы лабораторной диагностики, которые можно применить в данном случае. Опишите способ подготовки крови для проведения серологического исследования. Назовите образец исследуемого материала, который будет использован для дальнейшего исследования. Перечислите все необходимое для проведения исследования. Укажите, чему равен диагностический титр О-антител к сальмонеллам брюшного тифа. Эталон ответа к задаче № 18 На второй неделе заболевания можно использовать серодиагностику. Полученную кровь отводят стерильным капилляром пастерки и центрифугируют с целью осаждения сгустки крови и отбирают надосадок. Для исследования используют сыворотку крови, которую предварительно разводят. Исследуемый материал (сыворотка), бактериальные диагностикумы (О- и Н-брюшнотифозные и паратифозные А и В), пипетки, пробирки. Положительным считают титр агглютинации в разведении не ниже 1:100 при наличии клинической картины и не ниже 1:200 при отсутствии таковой. Задача № 19Чтобы подтвердить или исключить диагноз «бруцеллез», необходимо провести дополнительные лабораторные исследования. Задания: Назовите методы лабораторной диагностики, которые можно использовать в обычных микробиологических лабораториях для уточнения диагноза. Перечислите серологические реакции, которые можно применить для диагностики. Укажите время постановки реакции Райта. Назовите характерные особенности диагностикума для реакции Райта. Назовите критерии, по которым реакцию можно оценивать как положительную. Эталон ответа к задаче № 19 Бруцеллы относятся к возбудителям особо опасных инфекций, следовательно, с культурой бактерий работать в обычной лаборатории нельзя. Можно провести серодиагностику – исследовать сыворотку крови больного на наличие антител. Реакции агглютинации Хеддльсона, РНГА, Райта и др. Реакция Райта, как и все серологические реакции, ставится со второй неделе. Используется бактериальный диагностикум окрашенный в синий цвет. Диагностический титр в реакции агглютинации Райта – 1:100 – 1:200. Задача № 20 Беременной женщине (срок 2,5 месяца) поставлен диагноз «краснуха». Задания: Назовите исследуемый материал, который можно использовать для подтверждения диагноза. Назовите методы диагностики, которые можно использовать в данном случае. Что необходимо приготовить для выделения вируса из исследуемого (патологического) материала. Перечислите серологические реакции, которые используются для определения антител в парных сыворотках. Чем опасна краснуха для беременной женщины. Эталон ответа к задаче № 20 Для лабораторного подтверждения диагноза необходимо исследовать носоглоточный смыв, кровь, мочу, кал – с целью выделения вирусов; кровь – для серодиагностики с целью определения титра антител в парных сыворотках. Вирусологический, иммунофлюоресцентный, серологический методы диагностики. Выделение вируса из патологического материала проводят путем заражения тканевых культур. ИФА, ИФ, РИА, РТГА. Инфицирование вирусом краснухи в первом триместре беременности приводит к аномалиям развития плода. Вирус обладает тератогенным действием. Задача № 21В клиническую диагностическую лабораторию поступила мутная спинномозговая жидкость от больного ребенка с подозрением на менингококковую инфекцию. Задания: Перечислите методы исследования, которые можно применить для подтверждения диагноза. Перечислите этапы бактериоскопического метода исследования. Опишите характер мазка из СМЖ при менингококковой инфекции. Укажите питательные среды, которые вы приготовите для бактериологического метода исследования. Назовите метод экспресс-диагностики, который можно применить для обнаружения специфического антигена в спинномозговой жидкости. Эталон ответа к задаче № 21 Бактериоскопический и бактериологический. Бактериологический метод: 2.1. Центрифугирование спинномозговой жидкости. 2.2. Приготовление и фиксация мазка. 2.3. Окраска водным раствором метиленового синего. При наличии в СМЖ менингококков, в мазке можно увидеть диплококки бобовидной формы синего цвета, располагающиеся как внутри, так и вне цитоплазмы лейкоцитов. Можно использовать полужидкий сывороточный агар, плотный сывороточный агар. В качестве экспресс-метода определения специфического антигена можно применить реакцию встречного иммуноэлектрофореза. Задача № 22В лабораторию поступил материал из зева больного ребенка с подозрением на дифтерию, взятый двумя тампонами. Задания: Укажите цель забора материала двумя тампонами. Укажите методы окраски применяемые Вами. Назовите характерные морфологические признаки, на которые необходимо обратить внимание при микроскопии окрашенного мазка. Перечислите питательные среды, которые следует подготовить для первичного посева. Опишите характер роста возбудителя дифтерии на этих средах. Эталон ответа к задаче № 22 Одним тампоном производят посев на питательные среды, а другим – готовят мазки. Окраску мазков проводят методами Леффлера, Нейссера и Грама. Коринебактерии дифтерии грамположительные, располагаются в виде скоплений под острым или прямым углом, попарно в виде римской буквы «V»; при окраске щелочным метиленовым синим (по Леффлеру) микробная клетка имеет бледный цвет в отличие от интенсивно синих зерен волютина на полюсах клеток бактерий; при окраске по Нейссеру зерна волютина окрашиваются в сине-черный цвет, а сама микробная клетка имеет желто-коричневую окраску. Для первичного посева материала используют кровяной теллуритовый агар, среду Клауберга II, хинозольную среду Бучина. На кровянотеллуритовых средах колонии дифтерийных палочек имеют серовато-черный и черный цвет. Колонии биовара gravis образуют R-формы колонии, биовара mitis – S-формы. Задача № 23 В школе проводилось медицинское обследование с целью отбора учащихся для ревакцинации и для эпидемиологического исследования инфицированности туберкулезом. Задания: Назовите пробу, которую необходимо поставить. Перечислите препараты, которые используют для постановки этой пробы. Укажите критерии учета данной пробы. Укажите, свидетельством чего являются положительная и отрицательная реакции. Тактика поведения с детьми, имеющими отрицательный результат. Эталон ответа к задаче № 23 С целью отбора учащихся необходимо поставить пробу Манту. Туберкулины (РРД, ППД-Л). Туберкулин – очищенный белок, приготовленный из фильтратов культур микобактерий, выращенных на синтетической среде. Учитывается результат через 48-72 ч. Если диаметр инфильтрата менее 1 мм – реакция отрицательная; 2-4 мм – сомнительная; инфильтрат более 5 мм – положительная. Положительный результат свидетельствует об инфицированности организма микобактериями или об аллергизации после вакцинации. Отрицательная реакция указывает на неинфицированность организма микобактериями. Лица, имеющие отрицательную пробу Манту, подлежат вакцинации. Задача № 24В бактериологическую лабораторию больницы поступили промывные воды и испражнения больного с подозрением на острый гастроэнтерит, а также остатки мяса, которое употреблял накануне больной. Задания: Назовите инфекционное заболевание, о котором можно подумать в данном случае. Перечислите дифференциальные среды, на которые можно сделать посевы всех образцов исследуемого материала. Опишите характер роста, который будут иметь микроорганизмы на этих средах. Укажите, краткую схему дальнейшего выделения и идентификации культуры бактерий. Перечислите биохимические свойства, характерные для возбудителей сальмонеллезов. Эталон ответа к задаче № 24 В данном случае можно подумать о сальмонеллезе. Исследуемые образцы можно посеять на среде Эндо, Плоскирева и висмут-сульфитный агар. На среде Эндо сальмонеллы растут с образованием полупрозрачных, бледно-розовых, бесцветных колоний; на среде Плоскирева также образуют полупрозрачные цвета среды колонии; на висмут-сульфитном агаре – колонии черного цвета. С дифференциально-диагностических сред подозрительные колонии отсевают на комбинированную среду (Олькеницкого и др.) и на скошенный агар, далее определяют антигенную структуру, чувствительность к фагу и биохимические свойства. Возбудители сальмонеллезов разлагают углеводы с образованием кислоты и газа, образуют сероводород. Задача № 25В инфекционное отделение ЦРБ в течение суток поступили 3 члена одной семьи с диагнозом «острый гастроэнтерит», которые накануне употребляли в пищу мясной салат, купленный в буфете общественного питания. Задания: Укажите метод диагностики, который нужно использовать. Назовите исследуемый материал, который необходимо использовать для проведения микробиологического исследования. Перечислите микроорганизмы, которые чаще всего могут вызывать это заболевание. Укажите, каким путем могли инфицироваться члены этой семьи. Перечислите питательные среды, которые вы приготовите для проведения исследования. Эталон ответа к задаче № 25 Оптимальным методом диагностики при расшифровке данного заболевания является бактериологический. Материалом для исследования могут служить испражнения, рвотные массы, промывные воды желудка, а также остатки пищи. Чаще всего острый гастроэнтерит вызывают сальмонеллы. Очевидно, что члены семьи заразились при употреблении мясного салата, т.е. алиментарно. Для проведения исследования желательно приготовить среду обогащения (селенитовый бульон и др.) и дифференциально-диагностические среды (Эндо, Плоскирева, висмут-сульфитный агар). Задача № 26 Санитарно-микробиологическое исследование питьевой воды и оценка ее качества. Задания: Назовите микробиологические показатели, определяемые в воде. Правила забора питьевой воды централизованного водоснабжения для проведения исследования. Опишите методику определения ОМЧ (питьевой воды) и что для этого необходимо подготовить. Назовите методы определения общих и термотолерантных колиформных бактерий. Перечислите питательные среды, которые используются для определения общих колиформных бактерий. Эталон ответа к задаче № 26 Микробиологические показатели: термотолерантные колиформные бактерии; общие колиформные бактерии; общее микробное число; колифаги. При взятии проб воды из кранов их предварительно пломбируют (обжигают пламенем горящего тампона, смоченного спиртом), затем полностью открывают и в течение 10 минут воду спускают. Воду наливают в бутыли с соблюдением стерильности в объеме 0,5 л. Два объема по 1 мл исследуемой пробы вносят в 2 стерильные чашки Петри и заливают 6-8 мл расплавленного и остуженного агара, перемешивают, после застывания на горизонтальной поверхности помещают в термостат вверх дном и инкубируют при 37°С 24 часа. Можно использовать: 1) метод мембранной фильтрации (предпочтительнее); 2) титрационный метод. Глюкозо-пептонная или лактозо-пептонная среды, среда Эндо. Задача № 27 У больного заподозрен туберкулез легких. Задания: Укажите материал, который необходимо взять для исследования. Назовите методы диагностики, которые можно применить в данном случае. Выделите ускоренные методы диагностики. Назовите метод окраски мазка, который вы используете для микроскопии в световом микроскопе. Опишите характер мазка приготовленного из исследуемого материала при туберкулезе. Перечислите методы обогащения материала, которые можно применить. Эталон ответа к задаче № 27 Материал для исследования при туберкулезе легких – мокрота. Микроскопический, бактериологический. К ускоренному методу диагностики относят метод микрокультур Прайса. В настоящее время в качестве ускоренных бактериологических методов выявления микобактерий стала применяться система BACTEG. Метод окраски по Цилю-Нильсену. В мазке из мокроты при окраске по Цилю-Нильсену на голубом фоне обнаруживаются рубиново-красные, тонкие палочки, располагающиеся поодиночке или неправильными группами. Для обогащения материала применяют методы гомогенизации и флотации. Задача № 28У больного ребенка с подозрением на дифтерию из зева взят исследуемый материал и направлен в бактериологическую лабораторию.Задания: Опишите технику забора исследуемого материала при дифтерии. Укажите исследования, которые необходимо провести для установления причины заболевания. Перечислите питательные среды, которые используют для первичного посева. Опишите культуральные свойства возбудителя дифтерии на этих средах. Перечислите морфологические свойства выделенной чистой культуры, которые характерны для дифтерийных палочек. Эталон ответа к задаче № 28 Материал следует брать сухим стерильным тампоном до еды. Язык фиксируют шпателем, затем тампоном, не касаясь языка, слизистой щек и зубов, извлекают слизь (пленку) со слизистой миндалин, небных дужек на границе здоровой и воспаленной ткани. В лаборатории материал исследуют бактериоскопическим и бактериологическим методами. Для первичного посева используют одну из рекомендуемых в настоящее время плотных питательных сред: кровяной теллуритовый агар, Клауберга II, хинозольную среду Бучина. На кровяном теллуритовом агаре по форме, размеру и цвету колоний различают три биотипа C diphteriae. Биотип гравис – крупные, серые R-формы колонии; митис – мелкие черные блестящие S-формы колонии; интермедиус, имеющие промежуточные признаки. Дифтерийные палочки располагаются в виде скоплений, напоминающих горсть булав, брошенных на стол, отдельные пары располагаются под углом в виде буквы «V», на полюсах – утолщения (зерна волютина). Задача № 29В лабораторию поступил материал (отделяемое карбункула) от больного с подозрением на сибирскую язву. Задания: Назовите метод окраски, который можно использовать для определения морфологии и тинкториальных свойств микробов. Опишите технику окраски данного метода Перечислите преимущества этого метода окраски. Укажите морфологию и тинкториальные свойства возбудителей сибирской язвы. Назовите этап диагностики инфекционного заболевания. Эталон ответа к задаче № 29 С целью определения морфологических и тинкториальных свойств бактерий чаще всего используется сложный метод окраски по Граму. Техника окраски: Фиксированный мазок окрашивают через фильтрованную бумагу раствором генцианового фиолетового – 1-2 мин. Снимают бумагу, сливают краситель и наливают раствор Люголя на 30-60 секунд до почернения препарата. Сливают раствор Люголя, препарат обесцвечивают спиртом. Препарат промывают водой. Докраску проводят фуксином Пфейффера. Этот метод окраски позволяет дифференцировать бактерии на грамположительные и грамотрицательные. Возбудители сибирской язвы – грамположительные палочки, располагаются в цепочки (стрептобациллы). Этап диагностики – микроскопический (бактериоскопическое исследование). Задача № 30На исследование в бактериологическую лабораторию поступила кровь от больного с клиническим диагнозом «брюшной тиф» (пациент болен 5 дней). Задания: Назовите метод диагностики, который можно использовать в данном случае. Укажите питательную среду, которую необходимо подготовить. Приведите состав питательной среды. Укажите соотношение крови и среды, которое необходимо соблюдать при посеве. Характер роста брюшнотифозных бактерий на данной среде. Эталон ответа к задаче № 30 Для ранней диагностики "брюшного тифа" используют бактериологический метод, в частности метод гемокультуры. При выделении гемокультуры используют среду Раппопорт. Среда Раппопорт состоит из желчного бульона, глюкозы и индикатора, а для определения газообразования во флакон вносят поплавок. Во избежание действия бактерицидных факторов крови соблюдают соотношение 1:10. Рост брюшнотифозных бактерий на среде Раппопорт характеризуется диффузным помутнением, изменением цвета среды и отсутствием газа в поплавке. |