Микробиология. 1 занятие. Занятие Патогенные кокки. Стафилококки. Стрептококки
 Скачать 1.45 Mb.
|
|
Дополнение к темам: Занятие 1. «Патогенные кокки. Стафилококки. Стрептококки» Стафилоккоки     3)…Биохимические свойства: • Каталаза+ (отличие от стрептококков); • Сахаролитические свойства: расщепляют углеводы (глюкоза, лактоза, мальтоза, сахароза, глицерин) в аэробных и анаэробных (S.aureus) условиях до кислоты; • Протеолитические свойства: растворяют казеин, разжижают желатин, свертывают молоко, образуют не индол, аммиак, сероводород, восстанавливают нитраты в нитриты; • Образуют ферменты: гиалуронидазу, ДНК-азу, плазмокоагулазу (S.aureus), лецитиназу, фосфатазу, уреазу, β-лактамазы, фибринолизин; • Образуют токсины: гемолизины (мембранотоксины), лейкоцидин (разрушает нейтрофилы), некротоксин (некроз кожи), эксфолиатины (поражают кожные покровы у детей), токсин синдрома токсического шока, энтеротоксины (пищевые отравления), летальный токсин 4) Токсины и ферменты патогенных стафилококков. Среди токсинов наибольшее значение имеют: эксфолиатины А и В (обуславливающие развитие синдрома «ошпаренной кожи») токсин синдрома токсического шока (TSST-1) (ответственный за развитие специфического симптомокомплекса) лейкоцидин (ингибируюший всасывание воды и активирующий образование цАМФ (что имеет значение при стафилококковых диареях), а также цитотоксическое действие на полиморфно-ядерные лейкоциты) энтеротоксины A-F (ответственные за развитие пищевых интоксикаций; энтеротоксины В и С также приводят к развитию синдрома токсического шока в случаях, не связанных с менструациями). Ферменты агрессии: (проявляют различное действие: каталаза защищает бактерии от действия О2- зависимых микробицидных механизмов фагоцитов; (в-лактамаза разрушает молекулы в-лактамовых антибиотиков; липазы облегчают адгезию и проникновение в ткани. Коагулаза, существующая в трех антигенных формах, вызывает свертывание сыворотки; сам фермент не взаимодействует с фибриногеном, а образует тромбиноподобное вещество, предположительно взаимодействующее с протромбином) Антигенная структура Сложная, как у всех грамположительных бактерий. Антигенными свойствами обладают пептидогликан и тейхоевые кислоты клеточной стенки, типоспецифические АГ, хлопьеобразующий фактор и капсула. Видоспецифичными АГ являются тейхоевые кислоты: для S. aureus - рибиттейхоевая, для S. epidermidis - глицеринтейхоевая У S. saprophyticus выявляют оба типа кислот. 6) Микробиологическая диагностика: Основные методы исследования: Микроскопический (мазок и окраска по Граму), микробиологический (изучение комплекса биологических свойств), биологический (чувствительность экспериментальных животных) •1 день 1. Ориентировочная бактериоскопия (окраска по Граму: гроздьевидные скопления грам(+) кокков) 2. Посев на желточно-солевой агар и кровяной агар с целью получения изолированных колоний •2 день 1. Изучение культуральных свойств (мутные круглые ровные колонии средних размеров кремового, желтого или оранжевого цвета) • ЖСА: при наличии лецитиназы вокруг колоний образуются зоны помутнения с перламутровым оттенком (опалесценция); • Кровяной агар: при наличии гемолизина вокруг колоний образуются зоны α- и ß-гемолиза; 2. Приготовление мазка, окраска по Граму и изучение морфологических и тинкториальных свойств: гроздьевидные скопления грам(+) кокков 3. Пересев на скошенный агар с целью получения чистой культуры • 3 - 4 день 1. Определение чистоты выделенной чистой культуры макроскопически и микроскопически 2. Идентификация выделенной чистой культуры по • морфологическим и тинкториальным свойствам: гроздьевидные скопления грам(+) кокков • культуральным свойствам: мутные круглые ровные колонии средних размеров кремового, желтого или оранжевого цвета (признаком патогенности стафилококков является образование золотистого или желто-лимонного пигмента • биохимическим свойствам • факторам патогенности (наличие плазмокоагулазы, лецитиназы, гемолизина и др.) • фаготипу (фагоидентификация) 3. Определение чувствительности выделенной чистой культуры к антибактериальным препаратам. Особое значение для идентификации стафилококков с высокими вирулентными свойствами и множественной устойчивостью к антибиотикам имеет оценка резистентности к метициллину (MRSA-стафилококки) Стрептококки 9)…Биохимические свойства: • Каталаза - (отличие от стрептококков); • Сахаролитические свойства: расщепляют углеводы (глюкоза, лактоза, мальтоза, сахароза, глицерин) до кислоты; • Протеолитические свойства слабо выражены: не разжижают желатин, свертывают молоко; • Образуют ферменты: гиалуронидаза, стрептокиназа (фибринолизин), стрептодорназа; • Образуют токсины: гемолизины (стрептолизин О, разрушает эритроциты), лейкоцидин (разрушает лейкоциты), эритрогенный токсин (скарлатинозный), цитотоксины (вызывает гломерулонефрит) Антигенные свойства • Типовые протеиновые антигены - на поверхности клеточной стенки • Групповой полисахаридный антиген – в клеточной стенке (классификация Лэнсфилда: по составу полисахаридных фракций все стрептококки делятся на группы А, В,С,D и др.) • Видовой нуклеопротеидный антиген – в цитоплазме • Антигены: по антигенной специфичности продуцируемыхтоксинов выделяют 5 серотипов C. perfringens от А до Е; тип А чаще вызывает газовую гангрену, А,С, Д,Е вызывают пищевые токсикоинфекции 11) Микробиологическая диагностика: Основные методы исследования: Микроскопический (мазок и окраска по Граму), микробиологический (изучение комплекса биологических свойств) • 1 день 1. Ориентировочная бактериоскопия (окраска по Граму: пары или цепочки грам(+) кокков) 2. Посев на кровяной агар Колумбиа с целью получения изолированных колоний • 2 день 1. Изучение культуральных свойств (мелкие бесцветные колонии с зонами α-, ß- и γ-гемолиза); 2. Приготовление мазка, окраска по Граму и изучение морфологических и тинкториальных свойств: пары и цепочки грам(+) кокков 3. Пересев на скошенный кровяной агар или сахарный бульон с целью получения чистой культуры • 3-4 день 1. Определение чистоты выделенной чистой культуры макроскопически и микроскопически 2. Идентификация выделенной чистой культуры по • морфологическим и тинкториальным свойствам: пары и цепочки грам(+) кокков • культуральным свойствам: мелкие бесцветные колонии с зонами α-, ß- и γ-гемолиза на кровяном агаре; придоннопристеночный рост с образованием зерен и хлопьев на сахарном бульоне, среда остается прозрачной; • биохимическим свойствам*: для полной оценки биохимических свойств используют идентификационные тест-системы API 20 Strep • антигенным свойствам: реакция преципитации с полисахаридным преципитиногеном С, выделенным из чистой культуры и сыворотками серогрупп А, В, С и др.; затем определяют серовар в реакции латекс- или коагглютинации. 3. Определение чувствительности выделенной чистой культуры к антибактериальным препаратам |