микра 2. Исследование испражнения больного с диагнозом острое кишечное заболевание
 Скачать 88.5 Kb.
|
|
ЗАДАЧА. В бактериологическую лабораторию направлены на исследование испражнения больного с диагнозом «острое кишечное заболевание». На какие питательные среды необходимо посеять материал для выделения возбудителя и уточнения диагноза Какие свойства микроорганизма необходимо изучить Все патогенные энтеробактерии могут вызывать у человека острые кишечные инфекции, условно-патогенные – гнойно-воспалительные заболевания и пищевые токсикоинфекции. Энтеробактерии – грамотрицательные палочки средней величины с закругленными концами, располагающиеся беспорядочно. Одни из них подвижны за счет жгутиков, другие неподвижны. Являются факультативными анаэробами. Они нетребовательны к питательным средам. На мясопептонном агаре образуют однотипные колонии. Средней величины, круглые, гладкие, выпуклые, блестящие, бесцветные. В мясопептонном бульоне растут, давая равномерное помутнение. Необходимо изучить биологические, биохимические, Морфологические и серологические свойства св-ва микроорганизмов. ЗАДАЧА. Во время практических занятий по микробиологии студент А. разбил пробирку, вследствие чего на его руки попала взвесь микробных клеток содержащая S. aureus. Какие мероприятия должен провести студент для обеззараживания рук Как провести обеззараживание рук и стола, на которые попал патогенный материал Необходимо провести дезинфекцию рук, обеззараживание ее антисептическими ср-вами этиловый спирт, хлорамин, пав, промывание перманганатом калия стола ЗАДАЧА Для проведения ряда медицинских исследований были необходимы стерильные халаты, стерильные пробирки, стерильные колбы, резиновые пробки и питательные белковые среды. Какие способы Вы изберёте для стерилизации указанных предметов Укажите режим стерилизации. Чем обусловлен выбор того или иного метода стерилизации Для стерильных халатов- 2атм. 138градусов на 25мин., питательных сред- 1атм. 120 градусов 20 мин. – автоклавирование, для пробирок, колбочек- Стерилизация сухим жаром или суховоздушная стерилизация в сушильном шкафу ЗАДАЧА Из хирургического отделения гор. Больницы № 5 в бак. Лабораторию поступил кетгут с направлением, в котором указывалось на необходимость проверить его на стерильность. После проведённых исследований было установлено, что кетгут загрязнён клостридиями. Как провести проверку стерильности кетгута Какие дифференциальные признаки при микроскопии выявлены у микроорганизмов, обнаруженных в кетгуте Стерилизация шовного материала достигается разными способами: термическим, химическим, гамма-облучением. Способ стерилизации нитей кетгута спиртовым люголев ским раствором (по Губареву).. Хранят кетгут в люголевском растворе, этиловом спирте меняя его каждые 7-10 суток. Каждую порцию кетгута подвергают обязательному бактериологическому контролю. Дифференциальные признаки микроскопии –образование колоний с типа Клостридии анаэробы, метод опред-ия чистой среды – Цейсслера, ЗАДАЧА В детском саду отмечена вспышка дизентерии. Один из работников пищеблока детсада полгода тому назад переболел дизентерией. Мог ли он явиться источником заражения ? Почему? Какие пути передачи инфекции здесь имели место? Какие методы исследования здесь необходимо провести ЗАДАЧА В лабораторию КНИИТО доставлена отёчная жидкость из раны больного с подозрением на газовую гангрену. Укажите в какую группу по типу дыхания относятся возбудители газовой гангрены. Какие методы культивирования применяются для выращивания данных микробов Возбудителями газовой гангрены являются Cl. perfringens, Gl. novyi, Cl. septicum, Cl. histolyticum, Cl. sordclli, относящиеся к семейству Bacillaceae. По типу дыхания- анаэробы. Выделение чистых культур анаэробных бактерий В практических лабораториях обычно для. выделения чистых культур анаэробов используются методы Цейселера или Вейнберга. Процесс выделения чистой культуры можно разделить на несколько этапов. Метод Вейнберга.Первый этап:из исследуемого материала готовят мазок,окрашивают по Граму и микроскопируют.При обнаружении подозрительных на анаэробы микробов исследуемый материал засевают на среду Китта-ТароцциПробирки заливают вазелиновым маслом или парафином и ставят в термостат на 18-24 часа при температуре 37 гр.Далее разводят в пробирках с расплавленным и остуженным сахарным МПА.Засеянные пробирки охлаждают,агар застывает и фиксирует микробы в глубине столбика.Пробирки помещают в термостат на 18-24 часа при температуре 37 гр.Второй этап:при обнаружении подозрительных колоний в столбике ,делают распил пробирки,колонию отбирают и делают пересев на среду Китта-Тароцци.после чего чего пробирки помещают в термостат на 18-24 часа при температуре 37 гр. Третий этап:через сутки проверяют на чистоту выделенной культуры. Метод Вейнберга Первый этап проводят гак же, как и при методе Цейсслера. Затем исследуемый материал, подращенный на среде Китга-Гаронци, последовательно разводят в пробирках с расплавленным и остуженным сахарным МПА. После чего его переносят в 3-5 пастеровских пипетки (трубки Виньяла). Засеянные пробирки быстро охлаждают холодной водой, при этом агар застывает и фиксирует разобщенное положение отдельных микробных клеток в глубине столбика агара Пробирки термостатируют при температуре 37 "С 18-24 ч. Второй этап. Выросшие в узких пробирках колонии изучают с помощью лупы. На месте отобранной подозрительной колонии делают распил оробирки. колонию отбирают и пересевают на среду Китта-Тароцци. 5 (робиркн культивируют в термостате 18-24 ч при температуре 37 "С Третий этап. Через сутки проверяют чистоту выделенной культуры. Методы культивирования анаэробов. Для культивирования анаэробов необходимо понизить окислительно-восстановительный потенциал среды, создать условия анаэробиоза, т. е. пониженного содержания кислорода в среде и окружающем ее пространстве. Это достигается применением физических, химических и биологических методов. Механические методы: 1. Посев уколом в столбик сахарного агара. 2. Метод Виньял-Вейона: в расплавленный и остуженный до 50° С агар вносят исследуемую анаэробную культуру, перемешивают и засасывают в пастеровскую пипетку, конец которой запаивают. Через 24 — 48 часов столбике агара вырастают ясно видимые колонии микробов — анаэробов. 3. Метод Перетца. Исследуемый материал вносят в 3 пробирки с физиологическим раствором, а затем в 3 пробирки с остуженным до 50° С МПА. Содержимое пробирок перемешивают и выливают в 3 стерильные чашки Петри, на дно которых предварительно кладут стерильное предметное стекло, через 18-20 часов инкубации в термостате под пластинками стекла вырастают анаэробы. Физические методы: 1. Анаэростат — создание вакуумных условий. 2. Аппарат Киппа — замена воздуха индифферентным газом (водородом). 3. Среда Китт-Тароцци — содержит кусочки печени, обладающие высокой адсорбционной способностью, 0.5% глюкозы. Перед посевом среду кипятят на водяной бане не менее 15 минут, сверху заливают слоем вазелиного масла, чтобы предохранить посев от проникновения кислорода, Химические методы 1. Прибор Омелянского — для поглощения кислорода используется пирогаллол. 2. Среда Вильсон — Блера. Биологический метод Фортнера Чашку Петри с толстым слоем агара делят на 2 половины на одну половину засевают облигатный аэроб — «чудесную» палочку, на другую половину чашки засевают исследуемую анаэробную культуру. Чашку заливают растопленным парафином. Через 24 — 48 часов в чашке вырастают аэробы, затем, когда запас кислорода исчерпывается, начинают размножаться анаэробы. ЗАДАЧА В туб. Диспансер был направлен больной с подозрением на туберкулёз лёгких. Из мокроты больного была выделена чистая культура микобактерий туберкулёза. Каковы этапы исследования. Как проверить чистоту выделенной культуры Выделение чистой культуры микобактерии туберкулеза осуществляют посевом исследуемого материала на питательные среды. Следует при этом иметь в виду, что мокрота, кал и т. п., наряду с туберкулезными микобактериями, содержат множество других микробов, способных быстро размножаться и подавлять рост возбудителя туберкулеза проверка чистоты выделенной культуры: Чистота выделенной культуры микроорганизмов должна быть тщательно проверена. Это осуществляется обычно несколькими способами: визуальным, микроскопическим контролем и высевом на ряд питательных сред. При визуальном контроле просматривается рост микроорганизмов по штриху на поверхности скошенной агаризованной среды. Если рост по штриху неоднороден, культура загрязнена. Такой контроль возможен только для культур, способных расти на поверхности плотных сред. Чистоту культур микроорганизмов обязательно нужно контролировать под микроскопом. Для этого следует приготовить препарат фиксированных окрашенных клеток и просмотреть его с иммерсионной системой или препарат живых клеток и просмотреть его, используя фазово-контрастное устройство. ЗАДАЧА В инфекционную больницу поступил больной, у которого отмечалось повышение температуры и частый жидкий стул с примесью крови и слизи. Скажите, какие методы забора материала от больного с острыми кишечными заболеваниями Вы знаете Какие методы используются для стерилизации стеклянной лабораторной посуды Какие мероприятия нужно провести в очаге кишечного заболевания после госпитализации больного в стационар. Забор материала – кал на капрологию(слизь), кал на бакпосев, Для стерилизации лаб-ой посуды исп-т: Прокаливание в пламени спиртовки или газовой горелки( применяется для стерилизации бактериологических петель, пинцетов, препаровальных игл) Стерилизация кипячением(шприцы, мелкие хирургические инструменты, предметы и покровные стекла) Стерилизация сухим жаром или суховоздушная стерилизация в сушильном шкафу (печи Пастера). (стерилизуют стеклянную посуду: чашки Петри, пробирки, пипетки и др.) Стерилизация паром под давлением в автоклаве. Стерилизация текучим паром в аппарате хоха или автоклаве. (применяется в тех случаях, когда стерилизуемый материал не выдерживает высокой температуры, например питательные среды с витаминами, углеводами. Тиндализация (применяется для стерилизации легко разрушающихся при высокой температуре в-в (сыворотка крови, витамины и др.) Пастерилизация (пастеризуют напитки и пищевые продукты (вино, пиво, соки, молоко и др.) Стерилизация УФ-лучами Мероприятия: заключительная дезинфекция очага (проведение генеральной уборки дома у больного, приемного покоя больницы) Заключительная дезинфекция проводится в очаге после удаления из него источника инфекции (в инфекционном отделении — после выписки или смерти больного) с целью уничтожения возбудителей заболевания, которые, возможно, остались в помещении, где находился больной. В отличие от текущей дезинфекции, проводится однократно. ЗАДАЧА У больного пневмонией в мокроте обнаружены грамположительные кокки скоплениями в виде виноградной грозди. Какой микроорганизм вызвал пневмонию. Какие питательные среды необходимо использовать для выделения чистой культуры этого микроба. Какую группу по типу питания относится данный микроорганизм Каковы этапы выделения чистой культуры. Стафилококки. В большинстве же случаев для точного установления патогенности обнаруженных стафилококков требуется выделить эти микроорганизмы в чистой культуре путем посева исследуемого материала на плотные питательные среды. Стрептококки плохо растут на простых питательных средах. Обычно используют среды с кровью или сывороткой крови. Чаще применяют сахарный бульон и кровяной агар, содержащий 5% дефибринированной крови. На плотных средах чаще образуют очень мелкие колонии. На плотных средах стрептококки группы А образуют колонии трех типов:- мукоидные (напоминают капельку воды) - характерны для вирулентных штаммов, имеющих капсулу;- шероховатые - плоские, с неровной поверхностью и фестончатыми краями - характерны для вирулентных штаммов, имеющих М- антигены;- гладкие - характерны для маловирулентных штаммов .Предпочитают газовую смесь с 5% СО2. Способны образовывать L- формы. Для выделения чистой культуры микробов, с трудом культивируемых на питательных средах, в частности, пневмококков, используют биологический метод- заражение наиболее восприимчивых к данному виду возбудителя животных. После гибели или появления признаков заболевания животных забивают и производят посев крови и органов на питательные среды и микроскопическое исследование мазков-отпечатков из органов. Далее исслед-е проводят как в методе Дригальского. Метод Дригальского включает три этапа.Первый этап:из исследуемого материала готовят мазок,окрашивают его по Граму и др. методом и микроскопируют.Материал наносят петлей на всю поверхность питательной среды.После посева петлю стерилизуют,чашку подписывают на донышке и ставят вверх дном в термостат при температуре 37 на 18-24 часа.Второй этап:на следующий день посевы изучают на изолированные колонии и описывают характер роста.Изучают морфологию бактерий путем приготовления мазка,окрашенного поГраму.Далее для выделения чистой культуры производят пересев колонии в пробирку со скошенным МПА.Пробирки помещают термостат при температуре 37 на 18-24 часа.Третий этап:отмечаюют рост выделенной чистой культуры.При микроскопическом исследовании мазка из чистой культуры в нем обнаруживаются морфологически и тинкториально однородные клетки. По типу питания- анаэробы ЗАДАЧА В инфекционную больницу поступил больной с подозрением на дизентерию. При посеве испражнений больного на среду Плоскирева были получены колонии, имеющие различную окраску: одни колонии были крупные, розового цвета, другие-мелкие, бесцветные. Из этих колоний были получены чистые культуры. К какой группе сред относится среда Плоскирева и каково её назначение Какие дополнительные исследования необходимо провести для дифференциации возбудителя дизентерии от других палочковидных бактерий, находящихся в испражнениях больного. Агар Плоскирева — селективная среда для выделения шигелл и сальмонелл. Готовая средапрозрачна, имеет розовато-желтоватый цвет. Среда Плоскирева относится к плотным средам для выделения чистых культур. В состав среды Плоскирева входят ингибирующие вещества (желчные соли, бриллиантовый зеленый, йод) серологическое исследование — постановка реакции агглютинации с сывороткой больного и различными диагностикумами из дизентерийных микробо, внутрикожная аллергическая проба с дизентерином. ЗАДАЧА В бак. Лабораторию доставлена мокрота от больного туберкулёзом. Какие методы выделения чистых культур кислотоустойчивых бактерий вы знаете Каковы этапы выделения чистой культуры Как проверить частоту выделенной культуры. Метод Коха, метод Дригальского, метод Шукевича. Метод Дригальского: Первый этап. Из исследуемого материала готовят мазок, окрашивают по Граму или другим методом и микроскопируют. В случае необходимости исследуемый материал для посева разводят стерильным раствором 0,9% NaCl. Материал захватывают петлей и наносят на поверхность питательной среды. Движения петли должны производиться последовательно по всей поверхности среды, при этом крышку чашки Петри приоткрывают левой рукой ограниченно так, чтобы могла пройти только петля. Послепосева петлю прожигают в пламени спиртовки. Чашки подписывают на донышке и ставят вверх дном в термостат при температуре 37 °С на 18-24 часа. Второй этап. На следующий день посевы просматривают и изучают изолированные колонии, описывая характер роста. Изучают морфологию бактерий исследуемых колоний путем приготовления мазка, окрашенного по методу Грама. Далее для выделения и накопления чистой культуры производят пересев колонии в пробирку со скошенным МПА. Пробирки подписывают и помещают в термостат при температуре 37 °С на 18-24 часа. Третий этап. На следующий день отмечают характер роста выделенной чистой культуры. Визуально чистая культуры характеризуется однородным ростом. При микроскопическом исследовании мазка, приготовленного из чистой культуры, в нем обнаруживаются морфологически и тинкториально однородные клетки. Для получения чистой культуры кислотоупорных бактерий (микобактерии туберкулеза) исследуемый материал обрабатывают 2% серной кислотой, уничтожающей сопутствующую флору. ЗАДАЧА Семья А. Была госпитализирована в инфекционное отделение с симптомами ботулизма. Заболевание закончилось летальным исходом. При изучении причины возникновения интоксикации в бак. Лаборатории проведены исследования остатков рыбных консервов, которые употреблялись пострадавшими в пищу. В продуктах биологическим методом был выявлен ботулотоксин. Опишите свойства этого токсина. Основными свойствами ботулотоксина являются: 1) высокая устойчивость к действию протеолитических ферментов (пепсина, трипсина); 2) устойчивость к кислотам и, в частности, к кислому содержимому желудка; 3) слабая устойчивость и быстрая инактивация щелочами; 4) сравнительно небольшая устойчивость к нагреванию; 5) высокая устойчивость к низким температурам. ЗАДАЧА В посёлке Н. была зарегистрирована вспышка дифтерии. С целью профилактики был введён дифтерийный анатоксин. Какой иммунитет он создаст Из чего получают этот препарат 1) Содержит обезвреженный дифтерийный экзотоксин. Принцип приготовления: обезвреживание экзотоксина действием формалина, температуры и времени с последующей адсорбцией на гидрокси- де алюминия. Используется для профилактики дифтерийной инфекции, при этом создается искусственно-приобретенный активный антитоксический иммуни тет. ЗАДАЧА В инфекционную больницу города Москвы поступил больной, которому был поставлен диагноз «Возвратный тиф». Из анализа установлено, что год назад больной перенёс возвратный тиф. Как называется эта форма инфекции Как могла вновь эта инфекция возникнуть. ЗАДАЧА В инфекционную больницу поступил больной с симптомами характерными для сибирской язвы. В бак лаборатории данный диагноз был подтвержден. Каким методом был выделен микроб от больного Какой метод стерилизации нужно применить для обеззараживания материала от больного Каков режим стерилизации? Лабораторным подтверждением диагноза служит выделение культуры сибиреязвенной палочки и ее микробиологическая идентификация, обнаружение соответствующих антител в крови и кожно-аллергическая проба с антраксином. Перевязочный материал, мусор и малоценные предметы собирают в специальную посуду и уничтожают сжиганием. Пищевые остатки больного кипятят в течение 1 часа в закрытой посуде и затем спускают в канализацию или помойную яму. Посуду больного после каждого употребления кипятят в 2% растворе гидрокарбоната натрия в течение 1 часа или погружают в 1% активированный раствор хлорамина или 3% раствор перекиси водорода с 0,5% моющего порошка при температуре 50°С на 60 минут. Использованное нательное и постельное белье больного, халаты и верхнюю одежду окружающих и ухаживающих за больным лиц замачивают в теплом 2% растворе бельевой воды и, медленно нагревая, доводят до кипения и кипятят в течение 60 минут. При заключительной дезинфекции эти вещи обрабатывают кипячением или в пароформалиновых камерах, или погружают в один из растворов: 0,2% раствор формальдегида в смеси с 0,2% мыла при температуре 60 градусов в течение 1 часа; 1% активированный раствор хлорамина в течение 2 часов или в 3% раствор перекиси водорода с 0,5% бельевой соды при температуре 50°С в течение 60 минут из расчета 5 литров на килограмм белья. Синтетические ткани и изделия из искусственных материалов при текущей и заключительной дезинфекции погружают на 60 минут в горячий (60 градусов) 0,2% раствор формальдегида при добавлении 0,2% раствора мыла или поверхностно-активных веществ или обрабатывают в камерах по паровоздушному методу при температуре 97-98°С и экспозиции 30 минут, при норме загрузки 60 кг на квадратный метр камеры, или по пароформалиновому методу при температуре 57-59°С, расходе формалина 250 мл на кубический метр экспозиции 165 минут, при норме загрузки 18 килограмм на квадратный метр. Постельные принадлежности больного (подушки, матрацы, ватные и шерстяные одеяла, прикроватные коврики и т.п.) упаковывают в плотную тару и направляют для дезинфекции в пароформалиновую или паровую камеры. Камерным способом обеззараживают носильные вещи больного, если он ими пользовался в течение 2-3 недель до болезни и в момент заболевания. Метод стерилизации –автоклавирование, 2атм., 138 градусов. ЗАДАЧА Татьяна К. переболевшая полгода назад брюшным тифом и чувствующая себя удовлетворительно устраивается на работу в детский сад. При бактериологическом исследовании в фекалиях женщины обнаружены возбудители брюшного тифа. Чем объясняется это явление и как оно называется Какими путями может передаваться данная инфекция Можно ли допустить эту женщину для работы в детском саду. Брюшнотифозные бактерии устойчивы против факторов внешней среды. В почве сохраняются в течение 1-9 месяцев, в воде - 4 недели, в фекалиях - около года. Возбудитель этой болезни - бактерия S.typhi, очень устойчива в окружающей среде. В организме человека она вырабатывает сильный токсин, который и определяет все симптомы и тяжесть заболевания. Заразиться брюшным тифом можно только от больного человека или здорового носителя патогенной бактерии. Пути передачи брюшного тифа через воду; через пищу; через грязные руки. Допускать нельзя. ЗАДАЧА У роженицы с диагнозом «стафилококковый мастит» внезапно поднялась температура до 39-40 С. Лихорадка, озноб, потоотделение, потеря сознания. Врач поставил диагноз « сепсис». Как он мог возникнуть Иссл-ия: Посев молока, кровь на стерильность, молоко на стерильность Сепсис – это тяжёлое инфекционное заболевание человека и животных, вызываемое попаданием в кровь и ткани гноеродных микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности — токсинов. Возбудители С.: чаще стрептококки и стафилококки, реже — пневмококки, кишечная палочка и др. Обычно С. — осложнение раневого или воспалительного процесса. ЗАДАЧА У ребёнка в возрасте 1 месяца, имеющего небольшое нагноение в области пупочной ранки отмечается подъем температуры до 40 С и появление множественных гнойничковых образований на коже. Чем можно объяснить появление таких клинических проявлений Как называется данная форма инфекции Какой материал нужно взять от больного для подтверждения диагноза Нагноение операционной раны чаще всего бывает вызвано аэробной флорой, но нередко возбудителем является анаэробная неклостридиальная микрофлора. Осложнение проявляется обычно на 5—8-й день послеоперационного периода, может произойти и после выписки из стационара, но возможно и бурное развитие нагноения уже на 2—3-й день. ПРИ НАГНОЕНИИ ОПЕРАЦИОННОЙ РАНЫ ТЕМПЕРАТУРА ТЕЛА, как правило, вновь повышается и носит обычно фебрильный характер. Отмечается умеренный лейкоцитоз, при анаэробной неклостридиальной флоре — выраженная лимфопения, токсическая зернистость нейтрофилов. Диурез, как правило, не нарушен. Воспаление кожи и подкожной клетчатки в области пупка, вызываемое инфицированием пупочной ранки – омфалит. Посев гнойничков, кровь на стерильность |