Практическое по микробиологии. Практическое занятие № 2. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам
 Скачать 0.79 Mb.
|
|
Инструкционная карта № 2. на выполнение практического занятия по дисциплине ОП.03. Основы микробиологии для обучающихся специальности 36.02.01 Ветеринария Тема: Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Цель: ознакомиться с методикой определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Норма времени: 2 ак.часа. Оснащение рабочего места: инструкционные карты, микроскопы. Информационное обеспечение обучения: ОИ 2. Основы микробиологии. Леонова И.Б. –М.: Издательство Юрайт, 2017. с. 85-102. ДИ 1. Маградзе Е.И. Лабораторный практикум по микробиологии: учебно-методическое пособие. – Ижевск: Издательский центр «Удмуртский университет», 2016. с. 45-64. Компетенции, знания, умения и навыки, которыми должны овладеть обучающиеся: У1 – обеспечивать асептические условия работы с биоматериалами; У2 – проводить микробиологические исследования и давать оценку полученным результатам; У3 – пользоваться микроскопической и оптической техникой. З1 – основные группы микроорганизмов, их классификацию; З3 – микроскопические и культуральные и биохимические методы исследования; З7 – чувствительность микроорганизмов к антибиотикам. ОК 1 - ОК 9, ПК 1.1 - 1.6. Вопросы для актуализации опорных знаний: Что такое антибиотики? Какие особенности отличают антибиотики от других химических веществ с антимикробным действием? В чем сущность метода бумажных дисков для определения чувствительности бактерий к антибиотикам? Каков спектр и механизм действия антибиотиков? Отличаются ли грамположительные и грамотрицательные бактерии по чувствительности к антибиотикам пенициллинового ряда? Теоретические сведения Антибиотики – продукты жизнедеятельности живых организмов, способные избирательно убивать микроорганизмы или подавлять их рост. Выработка антибиотиков микроорганизмами является одним из важнейших проявлений микробного антагонизма. Антибиотики оказывают на микроорганизмы бактериостатическое, когда происходит подавление или задержка их репродукции и бактерицидное, вызывающее гибель микробов. Действие антибиотиков на патогенных микробов используют в борьбе с ними. При любом лабораторном исследовании критерием чувствительности микробов к антибиотикам является минимальная концентрация антибиотика, ингибирующая рост возбудителя заболевания при стандартных условиях постановки опыта. Для определения лекарственной чувствительности оптимальным является использование чистой культуры возбудителя.  Характеристика основных антибиотиков
Ход работы. Задание №1. Выберите один правильный ответ из 4-х заданных вариантов. 1. Метод дисков расценивают как: а) количественный метод; б) для определения широкого спектра действия; в) качественный метод; г) для определения узкого спектра действия. 2. Одну чашку Петри при методе дисков можно использовать для изучения чувствительности одного штамма к: а) 10-12 антибиотикам; б) 4-5 антибиотикам; в) 1-2 антибиотикам; г) 7-9 антибиотикам. 3. При методе дисков микробы являются чувствительными к антибиотику, если: а) диаметр роста меньше 10мм.; б) диаметр роста меньше 20мм; в) диаметр роста больше10мм; г) диаметр роста больше20мм. 4. При методе серийных разведений в жидкой питательной среде учет результатов проводят при: а) при наличии роста в контроле культуры и отсутствии роста в КС. б) при наличии роста в КС и отсутствии роста в контроле культуры. в) при наличии роста в контроле культуры и КС. г) при отсутствии роста в КС контроле культуры. 5. Оптический стандарт мутности №10 соответствует: а) 0,5 млд. микробов в 1мл.; б) 1 млд. микробов в 1мл; в) 30 млд. микробов в 1мл; г) 100млн. микробов в 1мл. 6. Активность антибиотиков выражают в: а) ЕД/мл; б) кг/мл; в) г/мл; г) мг/мл. 7. Для определения спектра действия антибиотика применяют: а) метод дисков; б) метод серийных разведений в жидкой питательной среде; в) метод серийных разведений на плотной питательной среде; г) метод дорожки по Флемингу. 8. К химиотерапевтическим препаратам биологического происхождения относятся: а) антибиотики; б) антитела; в) гаптены; г) токсины. 9.Первые попытки практического использования микробного антагонизма принадлежат: а) Л. Пастеру и И.И. Мечникову; б) А. Флемингу и И.И. Мечникову; в) Э. Чейн и Г. Флори; г) Р. Эммерих и О. Лев. 10. Фитонциды выделены из: а) травы зверобоя; б) почвенных бацилл; в) тканей рыб; г) актиномицетов. 1. При методе дисков взвесь изучаемой культуры засевают____________. 2. Засеянные чашки с нанесенными на них ________ помещают в термостат при t 37оС на ________часа. 3. Действие антибиотиков оценивают по феномену ________ роста вокруг диска. 4. Метод серийных разведений является точным ________ методом, его применяют в ________ работе. 5. Активность антибиотиках выражают ________ или ________. 6. Учет результатов производят при ________ роста в контроле культуры и ________ роста в контроле среды. 7. ________ применяют для определения спектра действия антибиотика. 8. ________ препараты культуры начинают расти лишь на некотором расстоянии от дорожки, ________ растут до самого края. Задание №2. Ознакомиться с антибактериальными препаратами, их действием на бактерии, заполнить в тетради в виде таблицы по образцу:
Задание №3. Проведите учет результатов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам диско-диффузионным методом. 1. Возьмите чашки Петри с готовой пробой чувствительности стафилококка к антибиотикам; 2. Рассмотрите результат пробы. Бактерицидное действие различных антибиотиков на микробы определяют по зоне задержки их роста вокруг бумажных дисков с антибиотиками; 3. Измерьте линейкой диаметр зоны просветления; 4. Запишите и зарисуйте результат исследования; 5. Сделайте вывод, учитывая, что диаметр зоны просветления: • 25 – 30 мл. – означает хорошую чувствительность микроорганизмов (+ + +), • 20 – 25 мл. – микроорганизмы чувствительны (+ +), • 10 – 20 мл. – малочувствительны (+), • Меньше 10 мл. – не чувствительны.
Контрольные вопросы: Что является критерием чувствительности микроорганизмов к антибиотикам? Перечислите методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Какую питательную среду применяют для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам? Укажите температуру и время инкубации посевов в термостате при проведении теста на чувствительность микроорганизмов к антибиотикам с применением бумажных дисков. Какими способами получают антибиотики? Каковы генетические и биохимические механизмы лекарственной резистентности бактерий к антибиотикам? В чем выражается побочное действие антибиотиков? Какие мероприятия рекомендуются для ограничения распространения антибиотикоустойчивых штаммов бактерий? |
