микробиология. Организация бактериологических лабораторий
 Скачать 19.36 Kb.
|
|
Организация бактериологических лабораторий Бактериологической лабораторией называют научно-практическое учреждение, которое осуществляет бактериологические, иммунологические и иные микробиологические исследования. При организации бактериологических лабораторий уделяется внимание подбору помещения. Специфика работы учреждения такова, что помещение должно быть полностью изолировано от любых других непрофильных производственных зон, жилых комнат и т.д. Планировка объекта, для организации подобного учреждения, в обязательном порядке должна предусматривать наличие: Комнаты, предназначенной для приема и регистрации материалов. Отдельного помещения для проведения бактериологических исследований. Стерилизационной или автоклавной комнаты, где выполняется обеззараживание отработанных материалов и лабораторной посуды. Моечной, в которой предусмотрено наличие раковины с ГВС и ХВС, сушильных шкафов и необходимых расходных материалов для мытья инструментов, приспособлений и посуды, используемых в бактериологической лаборатории. Бактериологической кухни, на которой осуществляется приготовление, розлив, стерилизация и безопасное хранение питательных сред. Материальной, где хранятся запасные реактивы, посуда, хозяйственный инвентарь и иные расходные материалы для бактериологической лаборатории. Обязательное оборудование бактериологической лаборатории включает: Микроскопы. Автоклавы. Термостаты. Стерилизационные и сушильные шкафы. Центрифуги. Лабораторное весовое оборудование. Моечную ванну. pH-метр. Дополнительное оборудование и приспособления Специальный застекленный бокс, то есть изолированное помещение, где проводятся работы в асептических условиях. В нем в обязательном порядке должны быть бактерицидные лампы (они располагаются над рабочей поверхностью стола). Шкафы, предназначенные для хранения стерильных материалов. Эффективная вентиляционная система, оборудованная фильтрами тонкой очистки воздушных масс. Условия работы в бактериологических лабораторияхВвиду этого: Сотрудники учреждения должны проводить работы только в специальной одежде, то есть в шапочке и халате. При проведении манипуляций в боксе, необходимо использование стерильного халата, маски, шапочки, резиновых перчаток и иных средств индивидуальной защиты. На территории бактериологической лаборатории запрещен прием пищи. Все материалы, поступающие на территорию подобного учреждения (то есть на анализ), изначально должны рассматриваться в качестве инфицированных. Для уничтожения зараженных материалов, применяются автоклавы. Стол, инструменты и иные расходные материалы, используемые при работе с зараженными материалами в условиях бактериологической лаборатории, после окончания анализа должны быть тщательно продезинфицированы. Доступ на территорию рабочей зоны открыт только для сотрудников, которые предупреждены о потенциальной опасности и соблюдают установленные требования. Капсулы бактерий.Капсула или слизистый слой окружает оболочку ряда бактерий. Выделяют микрокапсулу, выявляемую при электронной микроскопии в виде слоя микрофибрилл, и макрокапсулу, обнаруживаемую при световой микроскопии. Капсула является защитной структурой, у ряда микробов – фактором патогенности, препятствует фагоцитозу, ингибирует первые этапы защитных реакций – распознавание и поглощение. У сапрофитов капсулы образуются во внешней среде, у патогенов – чаще в организме хозяина. Существует ряд методов окраски капсул в зависимости от их химического состава. Капсула чаще состоит из полисахаридов, реже – из полипептидов. Основные свойства капсулы бактерии: различима в мазках-отпечатках и при специальных методах окраски; гидрофильна; предохраняет бактерию от фагоцитоза, бактериофагов, антибиотиков и др. неблагоприятных факторов; источник запаса питательных веществ для бактерий; препятствует высыханию бактерии. Капсулы могут быть состоять из полисахаридов (пневмококки) или белков (возбудитель сибирской язвы). Большинство бактерий, особенно патогенных, образует капсулу только в организме человека или животных. Однако существует род истинно капсульных бактерий (Klebsiella), представители которого образуют капсулу и при культивировании на искусственных питательных средах. Некоторые бактерии могут образовывать микрокапсулу (выявляется только при электронной микроскопии), например, эшерихии, микобактерии. Патогенные бактерии, образующие капсулы: капсульные бактерии – образуют капсулу постоянно (S. aureus, S. pyogenes, K. pneumoniae, K. rhinosaeromatis и др.), капсулообразующие бактерии – образуют капсулу только в организме (S. pneumoniae, B. anthracis, C. perfringens). При окраске мазков по Граму истинно капсульные бактерии имеют характерное взаиморасположение (на расстоянии друг от друга). При световой микроскопии капсулы четко не видны, в связи с чем наличие капсул у бактерий выявляется с помощью специальных методов окраски. Для выявления капсул и бактерий, образующих их в организме, используют либо микроскопию мазков, приготовленных из патологического материала или мазков-отпечатков из органов погибших животных. Обнаружение капсул по методу Бурри-Гинса (Гинс-Бурри). 1. Готовят препарат по Бурри: смешивают каплю взвеси микробов с каплей туши и при помощи стекла шлифовальным краем готовят мазок, затем его высушивают и фиксируют. 2. На мазок наносят водный раствор фуксина на 5 минут. 3. Промывают водой, высушивают. 4. Наносят слой колларгола, высушивают и микроскопируют. При этом бактерии окрасятся в красный цвет, а неокрашенные капсулы контрастно выделяются на черно-розовом фоне. Метод Ольта. Используется для выявления капсулы бактерий. Мазок окрашивают 2-3%-ным раствором сафранина. Краситель готовят перед употреблением, растворяя его в горячей воде с последующим фильтрованием. Окрашивают при легком нагревании в течение 1-3 минут и быстро промывают водой. Препарат не высушивают, на нем должна быть вода, накрывают покровным стеклом и рассматривают под иммерсионной системой микроскопа. Световые лучи, проходя через слой воды, усиливают разницу в преломлении лучей от капсулы и тела микробной клетки. В поле зрения микроскопа видно, что тела микробных клеток окрашены в красный цвет, капсулы – в желтый. Метод Михина. Используется также для выявления капсулы бактерий. Фиксированный мазок окрашивают метиленовым голубым Лёффлера в течение 2-3 минут при подогревании. Краситель быстро смывают водой, мазок высушивают. При микроскопировании тела микробных клеток выглядят темно-синими, капсулы – светло-розовыми. Окраска капсул методом Кауфмана. Мазок окрашивают метиленовым синим Леффлера в течение 2-3 мин. Краситель смывают водой и мазок погружают в 0,5%-ный раствор азотнокислого серебра на 3-4 мин, затем окрашивают карболовым раствором фуксина, разведенным 1:20, в течение 5-10 сек, промывают водой, высушивают и микроскопируют. Капсулы выглядят темно-красными, бактерии темно-синие. |