РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ
Агглютинация – склеивание и выпадение в осадок бактерий, эритроцитов и других клеточных элементов. АГ – корпускулярный.
Диагностикум – взвесь убитых бактерий определенного вида. Выделяется необходимый АГ, остальные инактивируются. Для получения Н-АГ – культуру обрабатывают формалином, ЛПС инактивируется. Для получения О-АГ – культуру прогревают, Н-АГ инактивируется, ЛПС остается, т.к. термостабилен.
Диагностические агглютинирующие сыворотки получают путем гипериммунизации животных различными микробами.
а) нативные или неадсорбированные – сыворотка, содержащая АТ ко всем АГ микроба, который использовали для иммунизации.
б) адсорбированные, полученные путем адсорбции агглютининов по методу Кастеллани.
- монорецепторные (моновалентные) – сыворотка, содержащая АТ к одному антигенному рецептору.
- поливалентные – сыворотка, содержащая АТ к нескольким определенным антигенным рецепторам.
Титр агглютинирующей сыворотки – наибольшее ее разведение, при котором реакция положительная.
Диагностический титр реакции – титр реакции, который считают «+».
|
Разновидность реакции агглютинации
(РА)
|
Компоненты реакции
|
Применение
|
Учет результатов
|
Развернутая РА
|
1)АГ – диагностикум или ч/к бактерий.
2)АТ – агглютинирующая сыворотка или сыворотка больного.
3)Электролит (изотонический раствор NaCl).
|
1)Обнаружение АТ в сыворотке больного и определение их титра.
2)Определение вида микроба.
|
«+» реакция - образование на дне пробирки осадка из склеившихся бактерий, жидкость в пробирке светлая, при встряхивании пробирки осадок превращается в хлопья
(О – агглютинация – мелкие хлопья, Н – агглютинация – крупные хлопья).
«-» реакция – в пробирке равномерное помутнение, осадок отсутствует.
|
РА на стекле
|
1)АГ – диагностикум или ч/к бактерий.
2)АТ – агглютинирующая сыворотка или сыворотка больного.
3)Электролит (изотонический раствор NaCl).
|
1)Обнаружение АТ в сыворотке больного, например, при бруцеллезе (реакция Райта), брюшном тифе и паратифов (реакция Видаля), сыпного тифа (реакция Вейгеля), туляремии и др.
2) Определение вида микроба
|
«+» реакция – появление хлопьев в капле.
«-» реакция – капля равномерно мутная.
|
РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)
|
1)АГ – эритроцитарный диагностикум – эритроциты человека или животных с осажденными на них АГ бактерий
2)АТ – эритроцитарный антительный диагностикум – эритроциты человека или животных с осажденными на них АТ
3)Электролит (изотонический раствор NaCl).
|
Определение титра АТ в сыворотке больного.
|
«+» реакция - образование осадка с неровными краями на дне лунки – «зонтик».
«-» реакция -компактный осадок с ровными краями.
|
Реакция Кумбса
|
1)АГ – диагностикум
2)АТ – сывоторка больного
3)Антиглобулиновая сыворотка – сыворотка кролика, иммунизированного глобулинами сыворотки человека
|
Обнаружение неполных АТ к форменным элементам крови или неполных антибактериальных АТ в первые дни заболевания.
|
«+» реакция - образование на дне пробирки осадка.
|
РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ
Преципитация – явление осаждения антигена – преципитиногена из раствора при воздействии на него иммунной сыворотки, содержащей АТ преципитины. АГ – молекулярный.
РП может ставится с полноценными АГ – веществами белковой природы и неполноценными АГ – гаптенами – липоидами, полисахаридами.
|
Разновидность реакции преципитации
(РП)
|
Компоненты реакции
|
Применение
|
Учет результатов
|
Реакция кольпреципитации
|
1)АГ – преципитиноген – растворимый (молекулярный) АГ
2)АТ – преципитирующая сыворотка
|
Для определения видовой и групповой принадлежности белка.
|
«+» реакция - образование на границе сыворотки и АГ мутного кольца.
|
РП в геле
|
1)АГ – преципитиноген – растворимый (молекулярный) АГ
2)АТ – преципитирующая сыворотка
|
Для определения токсигенности бактерий.
|
«+» реакция - образование на месте встречи АГ и АТ беловатых полос преципитации «усов».
|
Скачать 45.5 Kb.