презнтация по микробиологии. Презентация. Реакция нейтрализации токсина антитоксической сывороткой. Реакция нейтрализации вирусов. Риф

• Название: Реакция нейтрализации токсина антитоксической сывороткой. Реакция нейтрализации вирусов. Риф
• Анкор: презнтация по микробиологии
• Дата: 27.05.2020
• Размер: 284 Kb.
• Имя файла: Презентация.ppt
• Тип: Документы; #126041

Реакция нейтрализации токсина антитоксической сывороткой. Реакция нейтрализации вирусов. РИФ.

Реакция нейтрализации.

проводится путем введения смеси антиген-антитело животным или в чувствительные тест-объекты (культуру клеток, эмбрионы).
При отсутствии у животных или тест-объектов повреждающего действия микроорганизмов или токсинов говорят о нейтрализующем действии иммунной сыворотки и, следовательно, о специфичности взаимодействия комплекса антиген-антитело.

Реакция нейтрализации вирусов в культуре клеток.

А - цитопатогенный эффект (ЦПЭ) в результате размножения вирусов;
Б - ЦПЭ отсутствует в результате предварительной нейтрализации вирусов антителами.

Реакция нейтрализации токсина (РН) на животных

Для проведения реакции исследуемый материал, в котором предполагается наличие экзотоксина, смешивают с антитоксической сывороткой, выдерживают в термостате и вводят животным (морским свинкам, мышам).
Контрольным животным вводят фильтрат исследуемого материала, не обработанный сывороткой.
В том случае, если произойдет нейтрализация экзотоксина антитоксической сывороткой, животные опытной группы останутся живыми. Контрольные животные погибнут в результате действия экзотоксина.

Реакции с использованием меченых антигенов или антител:

Реакция иммунофлюоресценции
Иммуноферментный анализ
Иммуноблоттинг
Радиоиммунный анализ
Иммуноэлектронная микроскопия

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Метод экспресс-диагностики для выявления антигенов микробов или определения антител при помощи иммунных сывороток, меченных флюорохромными красителями.
2 разновидности РИФ:

Прямой метод РИФ
Непрямой метод РИФ.

Прямая РИФ

Микробные антигены связываются со специфическими флюоресцирующими антителами, в результате чего образуются светящиеся комплексы, наблюдаемые при люминисцентной микроскопии.
Недостаток метода: необходимость иметь большой набор сывороток против каждого антигена.

Непрямая РИФ.

Последовательность метода:
Обработка мазка из взвеси микробов антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки.
Обработка мазка антиглобулиновой (антикроличьей) сывороткой, меченной флюорохромами.
Наблюдение в люминесцентный микроскоп светящегося комплекса {микроб + антимикробные кроличьи антитела + антикроличьи антитела, меченные флюорохромом}.

Радиоиммунный анализ

высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген-антитело с применением антигенов или антител, меченных радионуклидом (125J, 14C, 3Н, 51Сr и др.).
После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем счетчике (бета- или гамма-излучение): интенсивность излучения прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.

Иммунная электронная микроскопия.

- это электронная микроскопия микроорганизмов (чаще вирусов), обработанных специфическими антителами, меченными электронноплотным веществом. Вокруг вирионов, обработанных иммунной сывороткой, образуется "венчик" из меченных антител.


Вирус оспы.
Иммуноэлектронная микроскопия.Негативное контрастирование.