Гистология. экзамен. 1. Методы изготовления препаратов для световой микроскопии. Сущность и методы фиксации. Способы уплотнения (заливки). Метод замораживания. Сущность и методы окраски микропрепаратов и их заключение в бальзам, смолы, желатин

• Название: 1. Методы изготовления препаратов для световой микроскопии. Сущность и методы фиксации. Способы уплотнения (заливки). Метод замораживания. Сущность и методы окраски микропрепаратов и их заключение в бальзам, смолы, желатин
• Дата: 10.07.2019
• Размер: 148.71 Kb.
• Имя файла: Гистология. экзамен.docx
• Тип: Документы; #83886
• страница: 5 из 7

Ядерная оболочка (кариолемма)- имеет пористую двухмембранную структуру,разграничивает ядро от остальных органоидов и цитоплазмы, обеспечивает взаимодействие ядра с цитоплазмой.

Хромосомы-плотные продолговатые или нитевидные образования, которые можно рассмотреть только при делении клетки, содержат ДНК – носитель наследственной информации, которая передается от поколения к поколению.

Ядрышки-имеют сферическую или неправильную форму,участвуют в процессе синтеза РНК, входящей в состав рибосомы.

Ядерный сок (кариоплазма)-полужидкая среда, находящаяся внутри ядра,вещество, в котором содержатся ядрышки и хромосомы.

Хроматин -мелкие зернышки и глыбки материала, который обнаруживается в ядре клеток и окрашивается основными красителями. Хроматин состоит из комплекса ДНК и белка и соответствует хромосомам, которые в интерфазном ядре представлены длинными, тонкими перекрученными нитями и неразличимы как индивидуальные структуры. Выраженность спирализации каждой из хромосом неодинакова по их длине.

По химическому строению хроматин состоит из:

1) дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК);

2) белков;

3) рибонуклеиновой кислоты (РНК).

Эухроматин соответствует сегментам хромосом, которые деспирализованы и открыты для транскрипции. Эти сегменты не окрашиваются и не видны в световой микроскоп.

Гетерохроматин соответствует конденсированным, плотно скрученным сегментам хромосом (что делает их недоступными для транскрипции). Он интенсивно окрашивается основными красителями, и в световом микроскопе имеет вид гранул.

факультативный гетерохроматин бывает гетерохроматичным только временами. Он информативен, содержит гены с которых считывается наследственная информация, когда гетерохроматин переходит в эухроматическое состояние. Образуется при спирализации одной из двух гомологичных хромосом. Типичным примером служит тельце полового хроматина, образуемого одной из двух Х-хромосом соматических клеток женских особей человека и млекопитающих. Функциональная роль факультативного гетерохроматина заключается в компенсации снижении дозы определенного гена (например, появление промежуточного признака при явлении неполного доминирования у гетерозигот Аа, влияет на экспрессивность проявления наследственных признаков в фенотип), определяет тканеспецифичность.

структурный гетерохроматин – отличается высокоспирализованным состоянием, которое сохраняется на протяжении всего мит. цикла. Он занимает постоянные участки в гомологичных хромосомах – это фрагменты околоцентромерных, теломерных участков хромосом, Не содержит структурных генов (нетранскрибируемый); Его роль не ясна, но по видимому он выполняет опорную функцию.

Распределение гетерохроматина

имеются определенные общие закономерности распределения гетерохроматина в ядре: его скопления располагаются под кариолеммой, прерываясь в области пор, что обусловлено его связью с ламиной и вокруг ядрышка (перинуклеолярный гетерохроматин), более мелкие глыбки разбросаны по всему ядру.

Упаковка хроматина в ядре.

1.двойная спираль ДНК - 1,5 нм (толщина биспирали)

2.нуклеосомная нить (ДНК присоединяет белки и скручивается в нуклеогистоновый комплекс) - 8 молекул гистонов: Н2а, Н2в, Н3, Н4 они служат основой – образуя белковые тела - коры, на которые «накручены» фрагменты ДНК длиной примерно в 200 пар нуклеотидов. Гистон Н₁ «сшивает» витки ДНК. Участки ДНК не связанные с белками, расположенные между гистоновыми корами, называются связующимиили линкёрными. Результат скручивания ДНК и присоединение белка преобразуется в нуклеогистоновый комплекс с нуклеосомной структурой – 10 – 13 нм

3.хроматиновая фибрилла 20 – 25 нм, дальнейшее скручивание ДНК и присоединение белков

4.серии петельных доменов (хромонема) 100 – 200 нм. Домен – область с поперечным размером, возвышение

5.конденсированный участок хромосомы – 700 нм (образуют глыбки хроматина)

6.метафазная хромосома - 1400 нм
Компактная упаковка ДНК в ядре обеспечивает:

упорядоченное расположение очень длинных молекул ДНК в небольшом объеме ядра;функциональный контроль активности генов (вследствие влияния характера упаковки на активность отдельных участков генома.

Хромосомы - это интенсивно окрашенное тельце, состоящее из молекулы ДНК, связанной с белками-гистонами. Хромосомы формируются из хроматина в начале деления клеток (в профазе митоза). Когда хромосомы располагаются в плоскости экватора и хорошо видны в световой микроскоп, ДНК в них достигают максимальной спирализации.

Хромосомы состоят из 2 сестринских хроматид (удвоенных молекул ДНК), соединенных друг с другом в области первичной перетяжки - центромеры. Центромера делит хромосому на 2 плеча. В зависимости от расположения центромеры хромосомы подразделяются на:

метацентрические центромера расположена в середине хромосомы и плечи ее равны;

субметацентрические центромера смещена от середины хромосом и одно плече короче другого;

акроцентрические - центромера расположена близко к концу хромосомы и одно плечо значительно короче другого.

В некоторых хромосомах есть вторичные перетяжки, отделяющие от плеча хромосомы участок, называемый спутником, из которого в интерфазном ядре образуется ядрышко.

1. В соматических клетках диплоидный (двойной) набор хромосом – 2п4с.

2. В диплоидном наборе хромосомы парные.

3. Парные хромосомы имеют одинаковое строение и называются – гомологичные.

4. Хромосомы из разных пар – негомологичные.

5. Хромосомы, имеющие одинаковое строение в клетках особей разного пола, называются,

Аутосомами-представлены парами гомологичный хромосом, но индивидуально различных (отцовских и материнских). Их располагают в порядке уменьшения размеров, поэтому самая большая хромосома имеет первый номер. У человека самая маленькая аутосома имеет 22 номер.

У человека в соматических клетках 22 пары - 44 аутосомы, а в половых клетках - 22 аутосомы

6. Хромосомы участвующие в определении пола, называются половыми или

г е т е р о х р о м о с о м а м и (гетеросомы), их обозначают латинскими буквами «Х» и «У». В соматических клетках человека две половые хромосомы, у женского пола две ХХ, у мужского ХУ.

Т.о. в соматических клетках человека 46 хромосом = 44 аутосомы две половые ХХ, или 44 аутосомы + две половые ХУ, а в половых клетках 23 хромосомы = 22 аутосомы + одна половая Х или 22 аутосомы + одна половая У.

7. В половых клетках (гаметах – сперматозоидах и яйцеклетках) содержится половинный - г а п л о и д н ы й –п набор хромосом.

Тельце Барра — скопление гетерохроматина, соответствующее одной Х-хромосоме у особей женского пола, которая в интерфазе плотно скручена и неактивна. В большинстве клеток оно лежит у кариолеммы, а в Гранулоцитах крови имеет вид маленькой добавочной дольки ядра ("барабанной палочки"). Выявление тельца Барра (обычно в эпителиальных клетках слизистой оболочки полости рта) используется как диагностический тест для определения генетического пола (обязателен, в частности, для женщин, участвующих в Олимпийских Играх).
13.Ядрышко как производное хромосом. Понятие о ядрышковом организаторе. Ядерная оболочка. Строение и функции. Синтетические процессы в клетки. Взаимосвязь компонентов клетки в процессах анаболизма и катаболизма. Понятие о секреторном цикле: механизмы поглощения и выделения продуктов клетки.

Ядрышко образовано специализированными участками (петлями) хромосом, которые называются ядрышковыми организаторами. У человека такие участки имеются в пяти хромосомах — 13-й, 14-й, 15-й, 21-й и 22-й, где располагаются многочисленные копии генов, кодирующих рибосомальные РНК (рРНК). Ядрышко исчезает в профазе митоза, когда ядрышковые организаторы "растаскиваются" в ходе конденсации соответствующих хромосом, вновь формируясь в телофазе.

Функции ядрышка заключаются в синтезе рРНК и ее сборке в предшественники рибосомальных субъединиц.
При транскрипции генов ядрышковых организаторов начально формируется очень крупная молекула предшественника рРНК, которая связывается с белками, синтезированными в цитоплазме и импортированными в ядро с образованием РНП. Далее предшественник расщепляется на 3 вида РНК, которые выявляются в рибосомах. Два из них соединяются с добавочными белковыми молекулами, образуя предшественники большой субъединицы рибосомы, третий формирует предшественник малой субъединицы. Предшественники рибосомальных субъединиц далее по отдельности транспортируются через ядерные поры в цитоплазму, где окончательно созревают.

Ядрышко мелкая плотная гранула диаметром 1—3 мкм, интенсивно окрашивающаяся основными красителями. Оно располагается в центре ядра или эксцентрично, содержит высокие концентрации РНП. Размеры и число ядрышек увеличиваются при повышении функциональной активности клетки. Особенно крупные ядрышки характерны для эмбриональных и активно синтезирующих белки клеток, а также клеток быстрорастущих злокачественных опухолей.

Под электронным микроскопом в ядрышке обнаруживают три компонента — фибриллярный, гранулярный и аморфный.

Фибриллярный компонент состоит из множества тонких (диаметром 5—8 нм) нитей и располагается преимущественно во внутренней части ядрышка. Он представлен преимущественно совокупностью первичных транскриптов рРНК.

Гранулярный компонент образован скоплением плотных частиц диаметром 10—20 нм, которые соответствуют наиболее зрелым предшественникам субъединиц рибосом.

Аморфный компонент, окрашивается бледно. Он содержит участки расположения ядрышковых организаторов со специфическими РНК—связывающими белками и крупными петлями ДНК, активно участвующими в транскрипции рибосомальной РНК.

Фибриллярный и гранулярный компоненты ядрышка образуют ядрышковую нить (нуклеолонему) толщиной 60—80 нм, которая в пределах ядрышка формирует широкопетлистую сеть, выделяющуюся большей плотностью на фоне менее плотного матрикса. Ядрышко окружено перинуклеолярным хроматином, небольшое количество хроматина проникает с периферии внутрь ядрышка (интрануклеолярный хроматин).

Ядерная оболочка (кариолемма) состоит из двух мембран — наружной и внутренней, — разделенных полостью шириной 15-40 нм (перинуклеарным пространством) и смыкающихся в области ядерных пор.

Наружная мембрана составляет единое целое с мембранами грЭПС — на ее поверхности имеются рибосомы, а перинуклеарное пространство соответствует полости цистерн грЭПС и может содержать синтезированный материал. Со стороны цитоплазмы наружная мембрана окружена рыхлой сетью промежуточных (виментиновых) филаментов.

Внутренняя мембрана — гладкая, ее интегральные белки связаны с ядерной пластинкой — ламиной — слоем толщиной 80—300 нм, состоящим из переплетенных промежуточных филаментов (ламинов), образующих кариоскелет.

Ламина играет очень важную роль в: поддержании формы ядра; упорядоченной укладке хроматина; структурной органи-зации поровых комплексов; формировании кариолеммы при делении клеток.

Ядерные поры занимают 3—35% поверхности ядерной оболочки. более многочисленны в ядрах интенсивно функционирующих клеток и отсутствуют в ядрах спермиев. Поры содержат два параллельных кольца диаметром 80 нм, которые образованы 8 белковыми гранулами. От этих гранул к центру сходятся фибриллы, формирующие перегородку (диафрагму) толщиной около 5 нм, в середине которой лежит центральная гранула. Совокупность структур, связанных с ядерной порой, называется комплексом ядерной поры. Последний образует водный канал диаметром 9 нм, по которому движутся мелкие водорастворимые молекулы и ионы. Гранулы поровых комплексов структурно связаны с белками ядерной ламины, которая участвует в их организации.
Ядерная оболочка в клетках животных и человека содержит до 2000—4000 поровых комплексов.

Функции комплекса ядерной поры:

-Обеспечение регуляции избирательного транспорта веществ между цитоплазмой и ядром.

-Активный перенос в ядро белков, имеющих особую маркировку в виде последовательности ядерной локализации — Nuclear Localization Sequence (NLS), распознаваемой рецепторами NLS (в комплексе поры).

-Перенос в цитоплазму субъединиц рибосом, которые слишком велики для свободного прохождения пор; их транспорт.

Ядерная оболочка играет роль барьера, отделяющего содержимое ядра от цитоплазмы, ограничивающего свободный доступ в ядро крупных агрегатов биополимеров, регулирующего транспорт макромолекул между ядром и цитоплазмой.

Важная функция: создание внутриядерного порядка — в фиксации хромосомного материала в трехмерном пространстве ядра. В интерфазе часть хроматина структурно связана с внутренней ядерной мембраной.

Факторы, воздействующие на клетку, могут быть химического, физического или биогенного характера. Реактивные свойства клеток - это их способность реагировать на внешние воздействия. При этом изменяется структура и функция клеток. В организме имеются стволовые, начавшие дифференцироваться (молодые), специализированные (зрелые) и старые клетки. Естественно их реакция на внешние воздействия неодинакова.У стволовых клеток в состоянии покоя низкий уровень обменных процессов и они наиболее устойчивы к внешним воздействиям. Ферменты поступают в гладкую эндоплазматическую сеть или гиалоплазму, где участвуют в синтезе углеводов или липидов. Эти вещества направляются в аппарат Гольджи, где включаются в состав гранул. Большая роль в целенаправленном перемещении веществ принадлежит цитоскелету и пего компартментам. Энергия для осуществления синтетических процессов образуется в митохондриях в виде АТФ. В обоих случаях прослеживается тесная функциональная взаимосвязь внутриклеточных структур.

Основными метаболическими процессами являются анаболизм (ассимиляция) и катаболизм (диссимиляция).

Анаболизм, или ассимиляция (от лат. assimilatio — уподобление)- эндотермический процесс уподобления поступающих в клетку веществ веществам самой клетки. Она является «созидательным» метаболизмом.

Важнейшим моментом ассимиляции является синтез белков и нуклеиновых кислот. Частным случаем анаболизма является фотосинтез, который представляет собой биологический процесс, при котором органическое вещество синтезируется из воды, двуокиси углерода и неорганических солей под влиянием лучистой энергии Солнца. Фотосинтез в зеленых растениях является автотрофным типом обмена.

Катаболизм, или диссимиляция (от лат. dissimilis — расподобление), экзотермический процесс распада веществ с освобождением энергии, который происходит в результате переваривания и дыхания. Переваривание- процесс распада крупных молекул на более мелкие молекулы, тогда как дыхание процесс окислительного катаболизма простых сахаров, глицерина, жирных кислот и дезаминированных аминокислот, в результате которого происходит освобождение жизненно необходимой химической энергии. Эта энергия используется для пополнения запасов аденозинтри-фосфата (АТФ), который является непосредственным источником клеточной энергии. Пополнение запасов АТФ обеспечивается реакцией фосфата (Ф) с аденозиндифосфатом (АДФ), а именно:

АДФ + Ф + энергия = АТФ

Когда АТФ разлагается на АДФ и фосфат, энергия клетки освобождается и используется для работы в клетке. АТФ это нуклеотид, состоящий из остатков аденина, рибозы и трифосфата (трифосфатных групп), тогда как аденозиндифосфат (АДФ) имеет лишь две фосфатные группы. Богатство АТФ энергией определяется тем, что его трифосфатный компонент содержит две фосфоангидридные связи. Энергия АТФ превышает энергию АДФ на 7000 ккал/моль. Этой энергией обеспечиваются все биосинтетические реакции в клетке в результате гидролиза АТФ до АДФ и неорганического фосфата. цикл АТФ-АДФ является основным механизмом обмена энергии в живых системах.

Секреторный цикл периодическое изме­нение состояния секреторной клетки, обусловленное образованием, накоплением, выделением секрета и восстановлением ее дальнейшей секреции. В секреторном цикле выделяют несколько фаз: поступление в клетку исходных веществ (ведущее значение в этом имеют диффу­зия, активный транспорт и эндоцитоз), синтез и транспорт исходного секреторного продукта, формирование секреторных гранул, выделе­ние секрета из клетки — экзоцитоз. Из клетки выделяются и не гранулированные продукты секреции.

I фаза поступления веществ из крови и лимфы со стороны базальной поверхности различных неорганических соединений, низкомолекулярных органических веществ (аминокислот, моносахаридов, жирных кислот и др.) и воды.

II фаза секреции. В эндоплазматической сети, в зависимости от состава секрета (гранулярной или агранулярной), синтезируются секреты, которые затем перемещаются в аппарат Гольджи, где постепенно накапливаются, подвергаются химической перестройке, оформляются в виде гранул. Значительная роль в перемещении секреторных продуктов в гландулоцитах принадлежит микротрубочкам и микрофиламентам – элементам цитоскелета.

Синтез секрета протекает непрерывно, однако он может накапливаться и выводится из клетки с разной интенсивностью или диффузно, или в виде гранул.

III фаза выделения секрета. По способу высвобождения секрета (экструзии) железы подразделяются на железы с тремя типами секреции: мерокриновый тип (эккриновый), апокриновый и голокриновый.

При мерокриновом типе секреции экструзия происходит без разрушения мембран, клетки сохраняют свою целостность (в слюнных железах млекопитающих).

При апокриновом типе секреции апикальная часть секреторных клеток может частично разрушаться, т.е. вместе с секреторными продуктами отделяются либо апикальная часть цитоплазмы или верхушки микроворсинок (в клетках молочной железы).