|
|
Микробиология, 1кт. микракт1. 5. Структурнофункциональная характеристика жгутиков, микроворсинок и включений. Методы их выявления
 Оптические микроскопы (светооптические).
А)Микроскопыуниверсальногоназначения:
Б)Специальныемикроскопы:
поляризационный микроскоп;
флюоресцентный наноскоп и люминесцентный микроскоп;
флюоресцентный рентгеновский наноскоп;
ближнепольный оптический микроскоп;
дифференциальный интерференционно- контрастный микроскоп.
Электронные микроскопы.
Рентгеновскиемикроскопы:
рентгеновские микроскопы отражательные;
рентгеновские микроскопы проекционные;
рентгеновские микроскопы флюоресцентные с применением планарных преломляющих, фокусирующих Х-лучи линз.
Лазерный рентгеновский микроскоп.
Атомно-силовоймикроскоп.
Микроскопия в зависимости от микроскопов разделяется на несколько видов.
Оптическая микроскопия (светооптическая):
иммерсионная микроскопия применяется для увеличения разрешаю- щей способности метода световой микроскопии; объектив помещается в среду (определенные масла), имеющую высокий коэффициент преломления, препятствует рассеиванию света от объекта исследования;
микроскопия в проходящем поле (светлопольная микроскопия) ис- пользуется для изучения окрашенных объектов в фиксированных препаратах;
темнопольная микроскопия применяется для прижизненного иссле- дования микробов в нативных неокрашенных препаратах; основана на явле- нии дифракции света при боковом освещении частиц (эффект Тинсдаля);
фазово-контрастная микроскопия изучает нативный препарат, дает возможность увидеть прозрачные объекты за счет усиления различия в опти- ческой плотности;
люминесцентная микроскопия основана на явлении фотолюминес- ценции. Люминесценция – свечение веществ, возникающее под воздействием внешнего излучения. Первичная– наблюдается без предварительного окраши- вания за счет наличия собственных люминесцирующих веществ, вторичная – в результате окрашивания люминесцирующими красителями – флюорохро- мами, которые избирательно связываются с определенными структурами клетки. Флюорохромы отличаются от обычных красителей тем, что применя- ются в очень малых концентрациях (до нескольких мкг/мл); кроме того, ими могут быть окрашены не только фиксированные, но и живые клетки. Люми- несцентная микроскопия также используется для регистрации результатов ре- акции иммунофлюоресценции (РИФ);
наноскопия: в ее основе лежит впервые сформулированный новый ме- тод российского ученого Андрея Климова, позволяющий увеличить разреше- ние оптических микроскопов на два порядка. Патент принадлежит разработ- чикам и создателям флюоресцентного наноскопа Штефану Хеллу (Stefan Hell) из Института биофизической химии ((MaxPlanckInstituteforBiophysicalChemistry (Karl Friedrich Bonhoeffer Institute)) – 2006 год. Ученые разработали оптический микроскоп, позволяющий наблюдать объекты размером около 10 нм (откуда и возник термин «наноскопия») и получать высококачественные трехмерные 3D-изображения. Увидеть объекты размером менее 200 нм (мини- мальной длины волны ближнего ультрафиолетового излучения) было воз- можно только при помощи неоптических методов (например, электронной микроскопии). Однако эти методы имели свои ограничения, в частности, в от- личие от оптических, не позволяли работать с целыми и тем более живыми клетками. Ученые применили метод микроскопии, в котором молекулы при помощи специально подобранного очень короткого импульса переводятся из
«темного» состояния в «светлое», при котором они излучают энергию и лю- минесцируют. Излучаемый свет фиксируется и тем самым выдает данные об объектах размером значительно меньше 200 нм. Флуоресцентная наноскопия
– это передовая технология для оптической микроскопии, позволяющая полу- чить изображение живых клеток с увеличением больше чем в десятки раз, что дает возможность напрямую изучать взаимодействия между белками, ДНК и РНК и, следовательно, может сыграть существенную роль в развитии гено- мики и протеомики, в изучении физиологии микроорганизмов.
|
|
|
Скачать 1.27 Mb.