Микробиология, 1кт. микракт1. 5. Структурнофункциональная характеристика жгутиков, микроворсинок и включений. Методы их выявления
 Скачать 1.27 Mb.
|
Неоптическая микроскопияА. Рентгеновская микроскопия – в качестве опорного освещения ис- пользуются коротковолновые рентгеновские лучи. Применение рентгенов- ской оптики стало возможно благодаря ученому М. А. Кумакову, разработав- шему первое рентгеновское зеркало. Не применяется для работы с нативными препаратами, что ограничивает применение в микробиологических лаборато- риях. При помощи электронной микроскопии изучается внешняя форма объекта, молекулярная организация его поверхности, с помо- щью метода ультратонких срезов исследуется внутреннее строение объекта (рис. 2). Электронная микроскопия в сочетании с биохимическими, цитохимиче- скими методами исследования, иммунофлюоресценцией, а также рентгено- структурным анализом позволяет судить о составе и функции структурных элементов клеток и вирусов. В. Сканирующая зондовая микроскопия (СЗМ). Основана на фиксации взаимодействия зонда с поверхностью изучаемого объекта. Применяется для детального изучения поверхности объекта. Выделяют несколько типов СЗМ: сканирующая туннельная микроскопия (СТМ): при данном виде микроскопии и зонд (проводник), и объект являются фотопрозрачными мате- риалами, проводящими электроток, регистрируется туннельный ток; сканирующая ближнепольная оптическая микроскопия: в ее основе лежит измерение интенсивности света, зонд – оптическое волокно, являюще- еся источником света; В зависимости от свойств изучаемого препарата используют следующие виды микроскопий. А. Нативная (прижизненная) микроскопия: метод «висячей» и «раздав-ленной» капли. Возможна прижизненная (витальная) окраска. Выявляется по- движность микроорганизма. Б. Микроскопия фиксированных мазков-препаратов дает возможность изучения тинкториальных свойств с применением простых и сложных мето- дов окраски. В результате проведения микроскопии исследуемого материала опреде- ляется один из критериев идентификации бактериальной клетки – форма. МОРФОЛОГИЯ БАКТЕРИЙ Бактерии (лат. bacteria – палочка) – это одноклеточные организмы, ли- шенные хлорофилла. Всем бактериям присущи определенная форма и раз- меры, которые выражаются в микрометрах (мкм). Большинство патогенных бактерий имеют среднюю длину 0,2–10 мкм. Формы клеток бактерий не отличаются большим разнообразием. Все мик- робы по форме делятся на следующие группы: шаровидные (сферические), или кокковидные (лат. coccus– шаровид- ный); палочковидные (цилиндрические); извитые (спиралевидные); нитевидные.Кокковидные бактерии обычно имеют форму правильного шара диамет- ром 1,0–1,5 мкм; некоторые – бобовидную, ланцетовидную, эллипсоидную форму. По характеру взаиморасположения образующихся после деления кле- ток кокки подразделяют на следующие группы: микрококки (греч. micros – малый) – делятся в одной плоскости, рас- полагаются одиночно и беспорядочно; сапрофиты; непатогенны для человека; диплококки (от греч. diplos – двойной) – деление происходит в одной плоскости с образованием пар клеток, имеющих либо бобовидную, либо лан- цетовидную (гонококки, пневмококки) форму; стрептококки (греч. streptos– цепочка) – деление клеток происходит в одной плоскости, но размножающиеся клетки сохраняют между собой связь и образуют различной длины цепочки, напоминающие нити бус; стафилококки (греч. staphyle – гроздь винограда) – деление происхо- дит в нескольких плоскостях, а образующиеся клетки располагаются скопле- ниями, напоминающими гроздья винограда; тетракокки (греч. tetra – четыре) – деление клеток происходит в двух взаимно перпендикулярных плоскостях с образованием тетрад, патогенныедлячеловекавидывстречаютсяоченьредко; сарцины (лат. sarcina– связка, тюк) – деление клеток происходит в трех взаимно перпендикулярных плоскостях с образованием пакетов (тюков) из 8, 16, 32 и большего числа особей, часто встречаются в воздухе. Имеются условно-патогенныепредставители (схема 2).  Палочковидные (цилиндрические) формы бактерий. Палочки бывают длинными– более 3 мкм, короткими– 1,5–3,0 мкм и оченькороткими– менее 1,0 мкм – в виде коккобактерий.  Концы палочек могут быть закругленными, заостренными, обрезанными, утолщенными.Палочка может иметь овоидную (яйцевидную) форму. Подиаметруих делят на тонкиеи толстые. Повзаиморасположениюбактерий подразделяют на три группы: монобактерии – палочки располагаются одиночно и беспорядочно; диплобактерии, располагающиеся попарно; стрептобактерии – бактерии, располагающиеся цепочкой. Извитые (спиралевидные) бактерии по количеству и характеру завит- ков, а также по диаметру клеток подразделяют на: вибрионы (от греч. vibrio– извиваюсь, изгибаюсь) – имеют одинизгиб, не превышающий четверти оборота спирали, однако могут иметь и форму пря- мой палочки, без изгиба; спириллы (от греч. spira – изгиб, завиток) – отличаются тем, что обра- зуют 2–3завитка; спирохеты (spirochaetae – извилина) – в зависимости от количества за- витков представлены бореллиями (3–8 завитков), трепонемами (8–12), лепто- спирами (более 12 завитков). Нитевидные формы бактерий. Различают два типа нитевидных бакте- рий: образующие временные или постоянные нити. Временныенити,иногда с ветвлениями, образуют палочковидные бактерии при нарушении условий их роста или регуляции клеточного деления (микобактерии, коринебактерии, а также риккетсии, микоплазмы, многие грамотрицательные и грамположитель- ные бактерии). При восстановлении механизма регуляции деления и нормаль- ных условий роста эти бактерии восстанавливают обычные для них размеры и формы. Постоянные нитевидные формы (например, актиномицеты, от греч. actis – луч, mykes – гриб) образуются из палочковидных клеток, соединяю- щихся в длинные цепочки либо с помощью слизи, либо чехлами, либо мости- ками. Трубковидные чехлы гетерополисахаридной природы называют влага- лищами или футлярами. Слизь может связывать отдельные клетки в длинные нити или пленки. Размер микроорганизмов. Несмотря на то, что термин «микроорга- низмы» подразумевает малые размеры, этот признак варьирует в довольно ши- роких пределах. Размеры большинства прокариот находятся в пределах 0,2–10,0 мкм. Однако среди них есть и «карлики», например микоплазмы (0,05 мкм). При микроскопии возможно измерение размера бактериальной клетки. Оно производится с помощью либо калиброванного окуляра-микро- метра, либо филярного микрометрического окуляра. Окуляр-микрометр, состоящий из стеклянного диска, на котором имеется ряд регулярно расположенных условно обозначенных отметок, устанавлива- ется поверх полевой диафрагмы окуляра после отвинчивания верхней части. Объект-микрометр – это стеклянная пластинка, специально размеченная ли- ниями, отстоящими друг от друга ровно на 10 мкм; при наведении на фокус линии окуляра-микрометра накладываются на линии объекта-микрометра. Если, к примеру, между двумя соседними линиями последнего помещается 10 линий окуляра-микрометра, то каждый просвет между ними равен 1,0 мкм. После калибровки объект-микрометр больше не нужен, но для каждого при- меняемого объекта калибровку следует проводить заново. |