09-Биохимия регуляций (1). Биохимия регуляций Раздел Значение изучаемой темы

• Название: Биохимия регуляций Раздел Значение изучаемой темы
• Дата: 19.08.2020
• Размер: 234 Kb.
• Имя файла: 09-Биохимия регуляций (1).doc
• Тип: Глава; #135799
• страница: 5 из 6

Раздел 3. Лабораторно-практические занятия

Занятие № 1
1. Тема: Введение в биохимию регуляций. Механизм действия гормонов. Пептидные гормоны.

2. Форма учебного процесса: Лабораторно-практическое занятие.

3. Актуальность: Дает теоретическую основу для курса эндокринологии.

4. Цель общая:

4.1.1. Изучить основные принципы биохимии регуляции.

4.1.2. Ознакомиться с отдельными представителями пептидных гормонов.

4.2. Конкретные цели:
Знать:
1. Основные задачи системы регуляции.

2. Механизмы внутриклеточной регуляции.

3. Механизмы действия межклеточных регуляторов.

4. Отдельные представители белково-пептидных гормонов.

Уметь:
1. Проводить качественные реакции на гормоны.

2. Объяснять полученные результаты.

Вопросы для самостоятельной подготовки к занятию

Исходный уровень знаний

1. Механизмы изменения активности ферментов.

2. Строение мембран.

3. Индукция и репрессия белков.

4. Строение циклических нуклеотидов.

5. Понятие о гормональных рецепторах.

По новой теме

1. Основные задачи системы регуляции.

2. Механизмы клеточной ауторегуляции.

3. Межклеточные регуляторы, их классификация.

4. Механизм действия гормонов через внутриклеточные рецепторы.

5. Механизм действия гормонов через посредников.

6. цАМФ. Образование, метаболизм и функции. Медицинское значение.

7. цГМФ. Образование, метаболизм и функции.

8. Источники Са²⁺ в клетке. Механизм действия Са²⁺.

9. Регуляция периферических эндокринных желез через гипоталамус-гипофиз.

10. Соматотропин. Регуляция синтеза, механизм действия.

11. Эффекты соматотропина, возможные патологии.

12. Глюкагон. Строение. Регуляция секреции. Механизм действия. Эффекты.

Учебно-исследовательская работа студентов на занятии

1. Проделать лабораторную работу "Качественные реакции на гормоны".

2. Сделать выводы по результатам проведенных опытов. Оформить протокол.

3. Подготовиться к защите лабораторной работы (ориентировочные вопросы и задачи приведены ниже).
Лабораторная работа
1. Качественные реакции на гормоны.

Оборудование:	1.		Штатив с пробирками.
	2.		Пипетки на 1 мл.
	3.		Глазная пипетка.
Реактивы:		1.		Раствор инсулина.
		2.		Биуретовый реактив.
		3.		Гидролизат тиреоидина.
		4.		Раствор KIO3.
		5.		1% раствор крахмала.
		6.		30% раствор NaOH.
		7.		2% раствор динитробензола.
		8.		Моча.

Ход работы:

1) Подтверждение пептидной природы инсулина.

К 0,5 мл раствора инсулина приливают 0,5 мл биуретового реактива. Через 10 мин развивается сине-фиолетовая окраска, характерная для реакции на белок.

2) Открытие йода в тироксине

К гидролизату добавляют 20 капель раствора KIO₃ и 3 капли 1% раствора крахмала. Появляется синее окрашивание, обусловленное реакцией йода с крахмалом.

3) Качественное определение 17-кетостероидов в моче.

В пробирку наливают 5 капель мочи, 5 капель 30% раствора едкого натра и 5 капель 2% спиртового раствора м-динитробензола. Перемешивают и через 2-3 минуты наблюдают вишнево-красное окрашивание.
Проверка качества усвоения знаний (конечный уровень)
а) вопросы к защите лабораторной работы
1. Почему с помощью биуретовой реакции можно обнаружить инсулин?

2. Какие еще гормоны можно открыть с помощью биуретовой реакции?

3. Почему при обнаружении тироксина используют крахмал?

4. Какой качественной реакцией можно обнаружить 17-кетостероиды?

5. К какой группе гормонов по химической классификации относятся стероидные гормоны?

6. К какой группе гормонов по химической классификации относится тироксин?

7. Почему для количественного определения гормонов требуются методы высокой чувствительности?

8. Почему качественные реакции редко используются для обнаружения гормонов в моче?
б) ситуационные задачи
1. Почему снижение выработки соматостатина приводит к акромегалии?

2. Объясните, почему но-шпу используют для расслабления гладких мышц?

3. Одним из осложнений при акромегалии является сахарный диабет. Почему он возникает?

4. Какое биологическое значение имеет тот факт, что гормоны синтезируются в виде прогормонов и препрогормонов?

5. Больным бронхиальной астмой назначают теофиллин. Зачем?


Занятие № 2
1. Тема: Биохимическая диагностика сахарного диабета и его осложнений.

2. Форма учебного процесса: лабораторное занятие.

3. Актуальность: Сахарный диабет – одна из самых распространенных болезней в мире. В основе этой болезни лежит инсулиновая недостаточность, результатом которой является нарушение обмена веществ и многочисленные осложнения. Знания, полученные на этом занятии, будут использоваться в дальнейшем обучении, а также во врачебной деятельности.

4. Цель общая:

4.1.1. Изучить влияние инсулина на обмен веществ.

4.1.2. Изучить изменение обмена веществ при сахарном диабете.

4.1.3. Научиться интерпретировать результаты биохимических анализов.

4.2. Конкретные цели:
Знать:

1. Регуляцию обмена веществ инсулином.

2. Этиологию и патогенез сахарного диабета.

3. Осложнения при сахарном диабете и их биохимические причины.
Уметь:
1. Определять глюкозу в крови и моче, холестерин, ЛПНП, серогликоиды в сыворотке крови, кетоновые тела в моче.

2. На основании полученных результатов делать обобщающий вывод.

Вопросы для самостоятельной подготовки к занятию

Исходный уровень знаний:

1. Обмен углеводов, липидов и белков.

2. Глюкоза крови: источники, пути использования, регуляция гормонами.
По новой теме:
1. Строение инсулина, место синтеза, образование активной формы, мишени инсулина, механизм действия.

2. Влияние инсулина на углеводный обмен.

3. Влияние инсулина на липидный обмен.

4. Влияние инсулина на белковый обмен.

5. Патогенез инсулинзависимого и инсулиннезависимого сахарного диабета.

6. Нарушение обмена веществ при сахарном диабете.

7. Биохимическая диагностика сахарного диабета и его осложнений.
Учебно-исследовательская работа студентов на занятии
1. Студенты организуются в группы. Каждая группа получает задание, конечной целью которого является установить наличие или отсутствие сахарного диабета. Для этого группа получает биологический материал (кровь, мочу), в котором определяют глюкозу, холестерин, серогликоиды, кетоновые тела и ЛПНП.

2. По результатам проведенных исследований студенты делают заключение, оформляют протоколы.

3. Готовятся к защите лабораторной работы.

4. Решают ситуационные задачи.

Лабораторная работа

В полученной задаче выполнить:

1. Определение глюкозы в крови и в моче.

2. Определение серогликоидов в сыворотке крови.

3. Определение общего холестерина в сыворотке крови.

4. Определение -липопротеидов в сыворотке крови.

5. Определение кетоновых тел в моче.

На основании полученных результатов сделать вывод о наличии или отсутствии сахарного диабета.
Проверка качества усвоения знаний (конечный уровень)
а) вопросы для защиты лабораторной работы
1. Принцип метода колориметрии.

2. Принцип метода центрифугирования.

3. Что такое стандартный раствор?

4. Чем различаются контрольная и опытная пробы?

5. Как строится сахарная кривая? Что она дает для диагностики?

6. Что такое сахарная нагрузка?

7. Какой вид имеют сахарные кривые в норме и патологии?

8. Почему у больных сахарным диабетом периодически измеряют содержание холестерина в сыворотке крови?

9. Почему у больных сахарным диабетом периодически измеряют содержание серогликоидов в сыворотке крови?

10. Почему у больных сахарным диабетом периодически измеряют содержание кетоновых тел в моче?

11. Чем опасна длительная гипергликемия?

12. Почему у больных сахарным диабетом повышается содержание мочевины в сыворотке крови?

13. Почему повышение кетоновых тел в крови опасно для жизни?

14. Почему у больных сахарным диабетом часто возникает катаракта?

15. Почему у больных сахарным диабетом рН крови сдвигается в кислую сторону?

б) ситуационные задачи
1. В клинику поступил больной с запахом ацетона изо рта. Какую патологию можно предположить?

2. Два больных диабетом в бессознательном состоянии доставлены в клинику. После инъекции глюкозы один их них пришел в сознание, состояние другого осталось без изменений. Назовите причины, которые привели к потере сознания у этих больных.

3. Почему инсулин назначают больным сахарным диабетом в виде инъекций, а не в виде таблеток?

4. На приеме у врача больные сахарным диабетом. Один пациент пожилого возраста страдает ожирением, у другого – молодого, вес тела существенно ниже нормы. Объясните, чем отличается направленность липидного обмена у этих больных?

5. У пациента в крови и моче резко повышено содержание ацетоацетата и β-гидроксибутирата. Что может быть причиной этого повышения? Какие дополнительные биохимические исследования необходимо назначить для уточнения диагноза?

6. У пациента опухоль поджелудочной железы. При этом повышен синтез инсулина и наблюдаются симптомы: дрожь, слабость и утомляемость, потливость, постоянное чувство голода. Как влияет избыток инсулина на обмен веществ? Почему развиваются вышеназванные симптомы? Почему это может привести к нарушению мозговой деятельности?
Занятие № 3
1. Тема: Липидные гормоны. Гормоны, производные аминокислот.

2. Форма учебного процесса: лабораторно-практическое занятие.

3. Актуальность: Изменение секреции данных гормонов приводит к серьезным нарушениям в организме, в частности кретинизму, микседеме, гипертиреозу, болезни Иценко-Кушинга и другим. Знание данной темы необходимо при обучении на клинических кафедрах и будущей врачебной деятельности.

4. Цель общая:

4.1.1. Изучить строение и функции липидных гормонов, а также гормонов, производных аминокислот.

4.1.1. Научиться определять содержание адреналина в моче.

4.1.3. Научиться объяснять полученные результаты и решать задачи.
4.2. Конкретные цели:
Знать:
1. Йодтиронины: строение, механизм действия, эффекты, патологии.

2. Катехоламины: синтез, депонирование и мобилизация, механизм действия, эффекты.

3. Глюкокортикостероиды: строение, механизм действия, эффекты, патологии.

4. Эйкозаноиды: строение, механизм действия, эффекты.

Уметь:
1. Определять адреналин в моче.

2. Решать ситуационные задачи.

Вопросы для самостоятельной подготовки к занятию
Исходный уровень знаний
1. Энергетический обмен.

2. Обмен углеводов, жиров и белков.

3. Введение в биохимию регуляции.

4. Механизм действия гормонов.
По новой теме
1. Классификация, строение и места образования стероидных гормонов.

2. Глюкокортикостероиды, регуляция синтеза, эффекты, возможные патологии.

3. Гормоны, производные полиненасыщенных жирных кислот. Биосинтез и механизм действия. Эффекты.

4. Йодтиронины, синтез и его регуляция.

5. Основные эффекты йодтиронинов, возможные патологии.

6. Синтез, депонирование и метаболизм катехоламинов.

7. Роль катехоламинов в норме и при патологиях.

8. Основные эффекты катехоламинов.
Учебно-исследовательская работа студентов на занятии
1. Разбор теоретического материала может быть проведен (по выбору преподавателя):

- в форме конференции;

- в форме работы группами;

- в форме фронтального опроса.

2. Проделать лабораторную работу "Определение содержания адреналина в моче".

3. Сделать выводы по результатам лабораторной работы, оформить протокол.


Лабораторная работа
Количественное определение адреналина в моче.

Оборудование:	1.		Штатив с пробирками.
	2.		Пипетки на 1 мл и 2 мл.
	3.		Мерная пробирка на 10 мл.
	4.		КФК.
	5.		Кюветы на 1 см.
Реактивы:		1.		Стандартный раствор адреналина (0,004 мкг/мл).
		2.		10% раствор карбоната натрия.
		3.		Реактив Фолина.
		4.		Дистиллированная вода.
		5.		Моча.

Принцип метода. Метод основан на колориметрическом измерении окраски, образующейся в результате реакции адреналина с фосфорновольфрамовым реактивом (реактив Фолина).
Ход работы. В две пробирки с меткой на 5 мл наливают: в одну - 0,5 мл стандартного раствора адреналина (концентрации – 0, 004 мкг/мл), в другую – 0,5 мл мочи. Затем в обе пробирки добавляют по 2 мл 10% свежеприготовленного раствора карбоната натрия и по 0,25 мл реактива Фолина. Встряхивают и оставляют на 10 мин. Потом объем в пробирках доводят до 5 мл раствором карбоната натрия и колориметрируют обе пробы при красном светофильтре в кювете толщиной 1 см против воды.
Расчет количества адреналина, выделяемого с мочой за сутки, проводят по формуле: (Е_ОП/Е_СТ) х С_СТ х 2 х 1000 = мкг/сутки, где

Е_ОП – оптическая плотность опытной пробы,

Е_СТ – стандартной пробы,

С_СТ – концентрация стандарта,

2 – коэффициент пересчета на 1 мл,

1000 – суточный диурез в мл.

За сутки у здоровых людей с мочой выделяется в среднем до 15 мкг адреналина.

Диагностическое значение определения адреналина в моче

Экскреция адреналина с мочой увеличивается при феохромацитоме (гормонально активная опухоль мозгового вещества надпочечников), при маниакально-депрессивном психозе в депрессивной фазе. Курение, физическая нагрузка, эмоциональный стресс вызывают повышение экскреции катехоламинов с мочой. Высокая экскреция катехоламинов наблюдается также при гепатитах и циррозе печени.


Ситуационные задачи:
1. Почему гипертиреоз, как правило, не сопровождается такими заболеваниями как атеросклероз и гипертония?

2. Исходя из знаний гормональной регуляции тонуса гладких мышц сосудов

перечислите гормоны или их синтетические аналоги, которые можно использовать: а) для лечения гипертонической болезни; б) при шоковых состояниях.

3. Почему при приступах бронхиальной астмы нельзя часто использовать препараты, стимулирующие β-адренорецепторы? Что необходимо назначить, если прием этих средств не предупреждает развития астматического статуса?

4. Что мешает использовать для лечения атеросклероза тироксин или трийодтиронин?

5. При обследовании ребенка отмечено значительное отставание умственного развития и роста. Ребенок малоактивен. В крови повышено содержание холестерина. Основной обмен снижен. С нарушением каких гормонов можно связать вышеназванные изменения?

6. Изменится ли интенсивность синтеза АКТГ и кортикостероидов у больного, которому с лечебной целью вводят глюкокортикостероиды?