Детектор по светорассеиванию. Детектор по светорассеиванию
 Скачать 104.08 Kb.
|
|
Детектор по светорассеиванию Детектор по измерению светового рассеяния (СРД), основан на различии в давлении паров обычно используемых в ЖХ растворителей и анализируемых веществ. Принципиальная схема детектора приведена на рис. 7.  Рис. 7. Детектор светового рассеяния: 1 — вход элюента; 2 — подводящая трубка; 3 - уплотнение; 4 — сопло; 5 — камера распыления; 6 — нагреватель; 7 — корпус детектора; 8 — камера испарения; 9 — трубка для выхода луча; 10 — камера светорассеяния; 11 — трубка для выхода по. тока; 12 — стеклянное окно; 13 — двойная дкафраг. иа; 14 — стеклянный стержень. Элюент на выходе из колонки 1 распыляется в камере 5 при повышенной температуре. В камере испарения 8 растворитель испаряется, а поток частиц нелетучих анализируемых веществ рассеивает свет лазерного луча в камере светорассеяния, в которой имеется стеклянный стержень 14, расположенный перпендикулярно лучу лазера на расстоянии 2...5 мм от него. Стержень служит в качестве коллектора рассеянного света. Через стержень часть рассеянного света попадает на фотоумножитель. Показания СРД пропорциональны массовой скорости потока вещества, что особенно важно при его использовании с колонками малого диаметра. Фоновый ток СРД при включенном лазере и установленном потоке предварительно нагретого несущего газа (CO2 или N2) около 2*10-10 А; шум 1*10-11А. Вклад СРД в расширение полосы пробы 0,1...0,2 мкл. Нулевая линия стабильна даже привысоком градиенте концентраций, однако показания пропорциональны массовому потоку анализируемого вещества в степени 1,8. Предел детектирования при анализе метиловых эфиров жирных кислот и триглициридов в различных пробах около 150 нг/с. Основным требованием является условие, чтобы анализируемые вещества были жидкими или твердыми при температуре детектора. Начиная с 1992 г. выпускаются перспективные детекторы по измерению светового рассеяния. Принцип их работы основан на различии давлений паров хроматографических растворителей, входящих в состав элюента, и анализируемых веществ. Элюент с пробой на выходе из колонки вводится в распылитель, смешивается с газом (азотом или воздухом) и в виде мелкодисперсного аэрозоля попадает в нагреваемую испарительную трубку (30-160°С), в которой подвижная фаза испаряется, образуя тонкий туман высушенных частиц пробы (суспензию). Поток частиц нелетучих анализируемых веществ рассеивает световой поток в камере рассеяния, в которой имеется стеклянный стержень, расположенный перпендикулярно световому потоку на расстоянии 2-5 мм от него. Стержень служит в качестве коллектора рассеянного света, через него часть рассеянного света попадает на фотоумножитель. В качестве источника света в устройствах данного типа чаще всего используется светодиод или полихроматическая лампа накаливания. Показания детектора прямо пропорциональны массовой скорости потока вещества, что особенно важно при использовании его с колонками малого диаметра. Вклад детектора в экстраколоночное размывание 0.1-0.2 мкл. Нулевая линия стабильна даже при применении высокого градиента концентрации. Предел детектирования по глюкозе менее 20 нг. Основным требованием является условие, чтобы анализируемые вещества не были летучими при рабочей температуре испарительной трубки температуре детектора. Как и рефрактометрический детектор, испарительный детектор светового рассеяния является универсальным детектором. Он позволяет обнаружить в принципе любое вещество, менее летучее, чем подвижная фаза. При этом детектор светорассеяния более чувствителен, чем рефрактометрический, особенно к сахарам, сигнал не зависит от оптических свойств пробы, от типа функциональных групп, от состава подвижной фазы, отсутствует температурная зависимость. Причём, основным его преимуществом перед рефрактометрическим детектором является возможность его использования в режиме градиентного элюирования. 1. Лимонная кислота 2. Винная кислота 3. Глюкоза 4. Фруктоза 5. Янтарная кислота  Хроматограмма, демонстрирующая универсальность детектора светорассеяния. Один детектор светорассеяния заменяет спектрофотометрический и рефрактометрический детекторы. Колонка: Rezex RHM-Monosaccharide 300х7.8 мм 8 мкм, подвижная фаза: 0,1% муравьиная кислота, расход: 0,6 мл/мин, газ: воздух, температура колонки: 75°С. 1. Рамноза 2. Ксилоза 3. Фруктоза 4. Глюкоза 5. Сахароза 6. Мальтоза 7. Мелибиоза 8. Мелизиоза 9. Раффиноза  Градиентное элюирование. Колонка: Luna C18(2) 250х4.6 мм 5 мкм, защитная колонка: Security Guard С18 4х3.0 мм, подвижная фаза: ацетонитрил/вода, температура колонки: 40°С, детекторы: светорассеяния (ELSD), рефрактометрический (RI). В сравнении со спектрофотометрическим детектором детектор светорассеяния позволяет определять вещества не поглощающие в УФ-области (полимеры, аминокислоты, карбогидраты и т.д.), сигнал прямо пропорционален концентрации вещества и не зависит от определяемых оптических свойств вещества. 1. Адипиновая кислота 2. Кофеин 3. Никотиновая кислота 4. Никотинамид 5. Амино-1-бутанол  Анализ веществ, не поглощающих в УФ-области. Колонка: Luna C8(2) 150х4.6 мм 5 мкм, защитная колонка: Security Guard С8 4х3.0 мм, подвижная фаза: ацетонитрил/0,1% фосфатный буфер(85:15), температура колонки: 30°С, расход 1 мл/мин, детекторы: светорассеяния (ELSD), спектрофотометрический (UV), длина волны 220 нм.  Стабильность базовой линии. Подвижная фаза: вода (А) – ацетонитрил (В), градиент: 5–95% В за 15 минут, расход: 1 мл/мин, газ: воздух, давление: 3.0 бар, температура: 30 °С, детекторы: светорассеяния (ELSD), спектрофотометрический (UV). ELSD-LT II состоит из трех основных блоков: • Распылитель (тонкое распыление подвижной фазы с растворенным в ней детектируемым веществом при помощи потока азота или очищенного воздуха). • Испаритель (испарение растворителей, содержащихся в подвижной фазе, путем прохождения через нагреваемую трубку; при этом формируются частицы детектируемого вещества, которые затем поступают непосредственно в детектор). • Детектор (определение концентрации вещества посредством измерения угла отклонения рассеянного света; детектор включает в себя LED лампу и фотоумножитель).  Особенности детектора ELSD-LT II • Обеспечивает чувствительность вплоть до сотен пикограммов определяемого вещества, является от 10 до 100 раз более чувствительным, чем рефрактометрический детектор. • Допускает использование любых смесей летучих растворителей и поддерживает градиентный режим элюирования (в отличие от рефрактометрического детектора), что обеспечивает хорошее разделение компонентов смеси за минимальное время. • Благодаря поддержанию температуры испарителя ниже 80 °С, позволяет определять все нелетучие и полулетучие соединения вблизи температуры их испарения; обеспечивает детектирование термолабильных соединений. • Позволяет работать в широком диапазоне скоростей подвижных фаз. • Особая конструкция распылителя не допускает налипания частиц на поверхности внутри блоков испарителя и детектора, что значительно снижает уровень шума. • Инновационный дизайн ячейки предотвращает уширение полос в ходе анализа.
Испарительный детектор светорассеяния ELSD-LT II подходит для регистрации любых нелетучих и полулетучих веществ. |