микробиология. даша. Энтеробактериями Семейство Enterobacteriaceae 26 родов Escherichia
 Скачать 2.26 Mb.
|
|
Семейство Enterobacteriaceae 26 родов Escherichia Shigella Klebsiella Yersinia Salmonella Порядок Enterobacterales 8 семейств Семейство Yersiniaceae ШИГА (Сига) Киѐси (1871 – 1957) Салмон Дэниел Элмер (1850 – 1914) Александр Иерсен (1863 – 1943) Эдвин Клебс (1834 – 1913) Эшерих (Escherich) Теодор (1857 – 1911) Escherichia coli Мазок из чистой культуры E. coli Окраска по Граму Факторы патогенности кишечной палочки Адгезины Фимбрии Белки наружной мембраны Бактериальные липосахариды Факторы инвазии Белки наружной мембраны Эндотоксины Экзотоксины 1. Цитотонины • Термолабильный энтеротоксин (субъединицы А, Аи В) • Термостабильный энтеротоксин 2 типов 2. Цитотоксины (шигаподобные) Веротоксины (шигаподобные токсины) токсичность изучена в культуре клеток Vero) веротоксины 1 (VT1, SLT1, Stx1) веротоксины 2 (VT2, SLT2, Stx2) Vero-toxin 1, 2=Shiga-like toxin 1, 2=Shiga-toxin 1,2 •ETEC Энтеротоксигенные кишечные палочки • Имеют факторы адгезии, колонизации, энтеротоксины. • Холероподобная диарея. •EPEC Энтеропатогенные кишечные палочки • Имеют факторы адгезии, колонизации, цитотоксин. • Поражают тонкий кишечник с образованием воспаления и эрозий. •EIEC Энтероинвазивные кишечные палочки • Разрушают энтероциты подвздошной и толстой кишки. • Заболевание по типу дизентерии. •EHEC Энтерогемор- рагические кишечные палочки Фактор адгезии – белок интимин, веротоксины (шигаподобные), энтерогемолизин. Вызывают геморрагический колит, гемолитико- уремический синдром •EAEC Энтероадгезивные кишечные палочки • Быстро прикрепляются к поверхности клеток. • Цитотоксины не образуют. • Фимбриальные и афимбриальные адгезины • Система секреции III типа – перенос эффекторных бактериальных белков из микробной клетки в цитоплазму клетки- мишени. •DAEC Диффузно- адгерентные кишечные палочки Адгезия Удлинение ворсинок Классификация диареегенных Е coli Категория Серогруппы Сероварианты ETEC O6, ООО, ООО, ООО, О, О128ас, ООО, О, ООН, ОН, ОН, ОН, ОН, ОН, ОНИ ДР. EIEC О28ас, ООО, ООО, ООО, ООО, ООО. О28ас:Н-, ОН, ОН, ОН, ОН, ОНИ ДР. EPEC О128ав, ООО, О 112, О. О18ас:Н7, О20ав:Н26, ОН, ОН, О55:Н7,О114:Н10 И ДР. EHEC ООО, О, ООН Не выяснены. DAEC ? ? Классификация сальмонелл Семейство Род Вид. enteritica Подвиды S. choleraesuis S. salamae S. arizonae S. diarizonae S. houtenae S. indica S. bongori S. typhi, S. enteritidis Серотипы (>2500) Факторы патогенности сальмонелл - Устойчивость к действию желудочного сока - Адгезия к эпителию кишечника, пейеровым бляшками солитарным фолликулам колонизация - Инвазия в энтероциты, бокаловидные клетки, макрофаги) - Ускоренное размножение вне ЖКТ кодируется плазмидой вирулентности) - Резистентность к бактерицидному действию сыворотки крови - Эндотоксин - Экзотоксины (энтеротоксины, шигаподобные цитотоксины ) Классификация шигелл Семейство Enterobacteriaceae Род Shigella Подгруппа Ане ферментирует маннит Подгруппа В обычно ферментирует маннит Sh. dysenteriae 1-12 серотипы Sh. flexneri 1-6 серотипы, вариант Х, вариант Y ( подсеротипы: 1a,2b,2a,2b,3a, 3b,3c,4a,4b) Подгруппа С обычно ферментирует маннит Подгруппа D обычно ферментирует маннит, поздно лактозу и сахарозу Sh. boydii 1-18 серотипы Sh. sonnei Мазок из чистой культуры S. flexneri Окраска по Граму Антигены бактериальной клетки A- антиген B- антиген О-антиген Н-антиген Vi- антиген L- антиген Факторы патогенности шигелл Факторы адгезии и колонизации Пили Белки наружной мембраны •ЛПС клеточной стенки Ферменты агрессии Экзотоксины Эндотоксин токсин Шига шигаподобные термолабильные энтеротоксины нейротоксин токсины 1, 2 стимулируют активность цитотоксин аденилатциклазы Защита от факторов иммунитета 1. Защита от фагоцитоза микрокапсула • ЛПС клеточной стенки 2. Подавление иммунной памяти • Липид А эндотоксина Токсины л ак то за гл ю ко за м анн ит м ал ьт о за с ахар о за инд о л H 2 S E кг кг кг кг - + - S.enterinidis кг кг кг - - + S.paratyphi A кг кг кг - - - S.paratyphi B кг кг кг - - + S.typhi к к к - - + S.dysenteriae к - - - - - S.flexneri к к к - + - S.boydii к к к - + - S.sonnei к 3 сут к к к к 3 сут Биохимические свойства Среда Эндо: питательный агар, фуксин основной, лактоза Среда МакКонки Состав: панкреатический гидролизат рыбной муки, пептон мясной, лактоза, натрия хлорид, дрожжевой экстракт, желчь очищенная сухая, нейтральный красный, агар микробиологический. S.aureus E.faecalis E.coli ПРИНЦИП БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ЭНТЕРОБАКТЕРИЯМИ Выделение чистой культуры Посев исследуемого материала на среды Эндо,Плоскирева, Левина, желчный бульон Идентификация выделенной чистой культуры Культуральные свойства Морфология (Грам- палочки) Биохимические свойства (среды Гисса) семейство род вид, серогруппа, серотип Реакция агглютинации с поливалентными и монорецепторными сыворотками ОСОБЕННОСТИ ДИАГНОСТИКИ ЭШЕРИХИОЗОВ О-титр 1:1600 В-титр 1:800 Развернутая реакция агглютинации с неадсорбированной сывороткой считается положительной если идет до заявленного титра или его половины Заключение выделена Е. с В _ Реакция агглютинации на стекле СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ КЛАССИФИКАЦИЯ САЛЬМОНЕЛЛ Кауфмана-Уайта c еро- группа серотип О-антиген Н-антиген 1 фаза 2 фаза А S. paratyphi A 1, 2, 12 a - B S. paratyphi B 1, 4(5), 12 b 1, 2 S. typhimurium 1, 4(5), 12 i 1, 2 S. haifa 1, 4(5), 12 z 1, 2 C S.choleraesuis 6, 7 c 1, 5 D S. typhi 9, Vi, 12 d - S. enteritidis 1, 9, 12 g, m - E S. anatum 3,10 c, h 1, 6 Реакция непрямой гемагглютинации. ВАКЦИНА БРЮШНОТИФОЗНАЯ Ви - ПОЛИСАХАРИДНАЯ ЖИДКАЯ (ВИАНВАК ®) РРаствор капсульного полисахарида, извлеченного из супернатанта культуры Salmonella typhi, очищенного ферментативными и физико - химическими методами консервант — фенол. Бесцветная прозрачная жидкость. НАЗНАЧЕНИЕ Профилактика брюшного тифа у взрослых и детей в возрасте отлет Первоочередной вакцинации подлежат население, проживающее на территориях с высоким уровнем заболеваемости брюшным тифом население, проживающее на территориях при хронических водных эпидемиях брюшного тифа лица, занятые в сфере коммунального благоустройства (работники, обслуживающие канализационные сети, сооружения и оборудование, а также предприятий по санитарной очистке населенных мест - сбор, транспортировка и утилизация бытовых отходов лица, работающие с живыми культурами возбудителей брюшного тифа лица, отъезжающие в гиперэндемичные по брюшному тифу регионы и страны, а также контактным в очагах по эпидпоказаниям. По эпидемическим показаниям прививки проводят при угрозе возникновения эпидемии или вспышки (стихийные бедствия, крупные аварии на водопроводной и канализационной сети, а также в период эпидемии, при этом в угрожаемом районе проводят массовую иммунизацию населения. Способ применения и дозировка Прививки производят однократно. Вакцину вводят подкожно в наружную поверхность верхней трети плеча. Прививочная доза составляет 0, 5 мл (25 мкг. • Ревакцинации проводятся по показаниям через каждые 3 года Вакцина дизентерийная против ШИГЕЛЛ ЗОННЕ липосахаридная жидкая ШИГЕЛЛВАК ® • Вакцина дизентерийная против шигелл Зонне липополисахаридная жидкая - раствор липополисахарида, извлеченного из культуры Shigella sonnei, очищенного ферментативными и физико - химическими методами. Консервант - фенол. Бесцветная прозрачная жидкость ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА • Введение вакцины приводит к быстрому и интенсивному нарастанию в крови вакцинированных антител, обеспечивающих через 2-3 недели невосприимчивость к инфекции в течение 1 года. НАЗНАЧЕНИЕ • Профилактика дизентерии Зонне у взрослых и детей в возрасте от трех лет. Первоочередная вакцинация рекомендуется для : работников инфекционных стационаров и бактериологических лабораторий лиц, занятых в сфере общественного питания и коммунального благоустройства детей, посещающих детские учреждения и отъезжающих в оздоровительные лагеря лиц, отъезжающих в регионы с высоким уровнем заболеваемости дизентерией Зонне. По эпидемическим показаниям прививки проводят при угрозе возникновения эпидемии или вспышки (стихийные бедствия, крупные аварии на водопроводной и канализационной сети, а также в период эпидемии, при этом в угрожаемом районе проводят массовую иммунизацию населения. Профилактические прививки против дизентерии Зонне предпочтительно проводить перед сезонным подъемом этой инфекции. СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ И ДОЗИРОВКА Прививки производят однократно. Вакцину вводят глубоко подкожно или внутримышечно в наружную поверхность верхней трети плеча. Прививочная доза составляет 0, 5 мл (50 мкг) для всех возрастов. •Ревакцинацию проводят при необходимости ежегодно однократно той же дозой препарата. Протокол. Лабораторная диагностика кишечных инфекций, вызываемых энтеробактериями Исследуемый материал Что сделать Результат Мазок-препарат из культуры E.coli, окраска по Граму Изучить морфологию, зарисовать Мазок-препарат из культуры S. enteritidis, окраска по Граму Изучить морфологию, зарисовать Мазок-препарат из культуры S. sonnei, окраска по Граму Изучить морфологию, зарисовать Выполнил (ФИО):____________________ Проверил _____________________ Исследуемый материал Что сделать Результат Рост колоний на среде Эндо (демонстрация) Описать морфологию колоний ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ __________________________ 1 день Салат (№ 1) Испражнения (№2) Произвести посев материала на чашку со средой Плоскирева 2 день Рост колоний на среде Плоскирева 1. Описать морфологию колоний 2. Приготовить мазок-препарат, окрасить методом Грама, микроскопировать, зарисовать 3. Изучить антигенные свойства материала из колоний в РА на стекле с поливалентной сальмонеллезной сывороткой групп А (пробирка № 1) 4. Пересев материала из агглютинирующейся колонии на скошенный агар с целью накопления чистой культуры 1.________________________________ _________________________________ _________________________________ _________________________________ _________________________________ 2. 3. Контроль Опыт Заключение _________________________________ _______________________________ Выполнил (ФИО):____________________ Проверил _____________________ 3 день 4 день Рост культуры на скошенном агаре Рост культуры на средах пестрого ряда Оценить чистоту накопленной культуры описать характер роста, приготовить мазок, окрасить методом Грама) Посев на среды пестрого ряда для определения биохимических свойств 3. Изучить антигенные свойства в РА на стекле с адсорбированными сальмонеллезными монорецепторными сыворотками О (пробирка № 2), О (пробирка № 3), H-m (пробирка № 4), H-i (пробирка № 5) Изучить биохимические свойства 3. ООН Заключение ____________________________________ ____________________________________ ____________________________________ Лактоза Глюкоза Маннит Мальтоза Сахароза индол H 2 S Заключение ____________________________________ ____________________________________ ____________________________________ ____________________________________ Выполнил (ФИО):___________________ Проверил ________________ Серологическая диагностика кишечных инфекций Сыворотка крови больного с подозрением на дизентерию РНГА (демонстрация) Закл-е: __________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________ Разведения сывороток 1:100 1:200 1:400 1:800 1:1600 1:3200 1:6400 Контроль эритроцит арн ого диагностику м а К он тро ль гемагглютинации Сыворотка больного, мл 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 Физ. р-р 0,25 Контрольная положительная сыворотка мл Эритроцитарный диагностикум шигелл Флекснера, мл 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 Эритроцитарный диагностикум шигелл Зонне, мл 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 УЧЕТ РНГА - ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ ТИТР 1:200 Эритроцитарный диагностикум шигелл Флекснера, мл Эритроцитарный диагностикум шигелл Зонне, мл Выполнил (ФИО):____________________ Проверил |