РПЕШР. ФС_Корни_солодки. Государственный стандарт качества лекарственного средства фармакопейная статья

• Название: Государственный стандарт качества лекарственного средства фармакопейная статья
• Анкор: РПЕШР
• Дата: 22.09.2021
• Размер: 0.93 Mb.
• Имя файла: ФС_Корни_солодки.doc
• Тип: Статья; #235400

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Корни солодки ФC 42-

Radices glycyrrhizae Взамен ст. № 573 ГФ Х

Собранные в разное время года неочищенные (naturales) или очищенные (mundatae) от пробки корни и подземные побеги многолетних дикорастущих травянистых растений солодки голой — Glycyrrhiza glabra L. и солодки уральской — Glycyrrhiza uralensis Fisch., сем. бобовые — Fabaceae.
Подлинность

Внешние признаки. Цельное сырье. Куски корней и подземных побегов цилиндрической формы различной длины и толщины. Встречаются куски корней, переходящие в сильно разросшееся корневище более 10 см толщиной.

Поверхность неочищенных корней и побегов продольно-морщинистая, покрытая серовато-коричневой или коричневой пробкой; очищенное сырье снаружи от светло-желтого до коричневато-желтого цвета с незначительными остатками пробки; излом от светло-желтого до желтовато-оранжевого цвета, зернисто-волокнистый.

При рассмотрении под лупой (10×) или стереомикроскопом (15×) на поперечном срезе корней и подземных побегов видны многочисленные широкие сердцевинные лучи и вытянутые группы сосудов, придающие хорошо заметное лучистое строение. Вдоль сердцевинных лучей часто образуются радиальные трещины. У побегов имеется небольшая сердцевина, у корней сердцевины нет.

Запах слабый, вкус водного извлечения сладкий, приторный, слегка раздражающий.

Измельченное сырье. Кусочки сырья различной формы, как правило, волокнистые, размером от 1 до 10 мм (для неочищенного сырья) и от 1 до 6 мм (для очищенного сырья).

Цвет очищенного сырья от светло-желтого до коричневато-желтого с незначительными остатками пробки; неочищенного сырья — желтый, серовато-желтый, коричневато-желтый, с остатками пробки серовато-коричневого или коричневого цвета.

Запах слабый, вкус водного извлечения сладкий, приторный, слегка раздражающий.

Порошок. Кусочки сырья различной формы, как правило, волокнистые, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет очищенного сырья от светло-желтого до коричневато-желтого с незначительными остатками пробки; неочищенного сырья — желтый, серовато-желтый, коричневато-желтый, с остатками пробки серовато-коричневого или коричневого цвета.

Запах слабый, вкус водного извлечения сладкий, приторный, слегка раздражающий.

Микроскопические признаки. Цельное сырье. При рассмотрении под микроскопом поперечного среза у неочищенного корня видна многослойная пробка, под пробкой — первичная кора, состоящая из крупных вытянутых клеток, нередко с призматическими кристаллами оксалата кальция (у очищенных корней вместе с пробкой частично удалена и первичная кора). Первичная кора переходит в хорошо развитую широкую вторичную кору, в которой видны широкие, кнаружи иногда расширяющиеся сердцевинные лучи, чередующиеся с лубом, состоящим из ситовидных трубок, лубяных волокон и паренхимных клеток. Ситовидные трубки, кроме узкого слоя, прилегающего к камбию, сдавлены и представляют собой деформированный (облитерированный) луб, образующий удлиненный конус, обращенный широким основанием к камбию, а вытянутая вершина проходит, изгибаясь между группами лубяных волокон. Лубяные волокна с сильно утолщенными стенками и узкой полостью собраны группами и окружены кристаллоносной обкладкой. Паренхимные клетки коры и сердцевинных лучей содержат зерна крахмала — простые, округлые или яйцевидные, длиной 2–12 мкм, редко до 20 мкм. Древесина состоит из сосудов разного диаметра — от узкого до очень широкого, групп склеренхимных волокон с кристаллоносной обкладкой и паренхимы, содержащей крахмал. При окраске раствором йода сердцевинные лучи и паренхима окрашиваются в синий цвет, деформированный луб не окрашивается и остается сероватым, сосуды становятся желтыми, группы волокон коры и древесины оранжевыми. На продольно‑радиальном срезе в коре и древесине видны длинные, сильно утолщенные склеренхимные волокна с кристаллоносной обкладкой; в древесине узкие сосуды — сетчатые, средние — со щелевидными порами и широкие — с бочковидными короткими члениками и щелевидными окаймленными порами, расположенными косыми рядами.

Измельченное сырье и порошок. При рассмотрении микропрепаратов видны фрагменты тонкостенной паренхимы, состоящие из округлых или округло-многоугольных клеток, часто с группами призматических кристаллов оксалата кальция; группы волокон коры и древесины, обычно с кристаллоносной обкладкой; фрагменты луба с ситовидными трубками; фрагменты или группы сетчатых сосудов различного диаметра со щелевидными окаймленными порами, нередко в сопровождении пучков волокон (членики широких сосудов, как правило, короткие, бочковидные); фрагменты пробки, состоящие из нескольких слоев многоугольных клеток.
Определение основных групп биологически активных веществ

1.УФ  спектр испытуемого раствора (смотри раздел «Количественное определение»), полученный на спектрофотометре в диапазоне длин волн от 190 до 400 нм, должен иметь один максимум поглощения при 258 нм+3 нм (рис. 2).


Рисунок – 2. УФ-спектр глицирризиновой кислоты



d

c

b

b

a


5

4

3

2

1

b

e

a

а

a
Рисунок - 1. Солодки корни

1 ‑ фрагмент поперечного среза неочищенного корня: а ‑ пробка, b ‑ лубяные волокна, c ‑ облитерированный луб, d ‑ сосуды ксилемы, e ‑ паренхима сердцевинных лучей, увел. 40×, 2 ‑ фрагмент многослойной пробки, увел. 200×,

3 ‑ фрагмент продольного среза: а ‑ клетки паренхимы, b ‑ сетчатые сосуды с окаймленными щелевидными порами, увел. 400×, 4 – фрагмент корня: a ‑ ситовидные трубки луба, b ‑ волокна с кристаллоносной обкладкой, увел. 200×, 5 – фрагмент корня: а ‑ паренхимные клетки коры с призматическими кристаллами оксалата кальция, увел. 200×.

2.Тонкослойная хроматография. К 2,0 г измельченного сырья, взвешенного с точностью до + 0,01 г, прибавляют 20 мл 40 % этилового спирта и экстрагируют при нагревании на водяной бане в течение 15 минут. Затем полученное извлечение фильтруют через фильтр (красная полоса).

На линию старта хроматографической пластинки микропипеткой наносят 0,01 мл полученного фильтрата и затем рядом 0,02 мл (20 мкг) 0,1 % раствора СО глицирама и 0,02 мл (20 мкг) 0,1 % раствора ликуразида. Пластинку с нанесенными пробами помещают в вертикальную камеру, которую предварительно насыщают не менее 24 ч смесью растворителей: хлороформ-метанол-вода в соотношении 26:14:3, и хроматографируют восходящим способом.

Когда фронт растворителей пройдет около 8 см, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин и просматривают в видимом свете и в УФ-свете при длине волны 254 нм. На хроматограмме на уровне пятна СО ликуразида должно обнаруживаться пятно желтого цвета с величиной R_f около 0,5 (ликуразид), а также фиолетовое флуоресцирующее пятно с R_f около 0,3 (глицирам). Хроматограмму опрыскивают свежеприготовленным раствором диазобензолсульфокислоты в насыщенном растворе карбоната натрия, помещают в сушильный шкаф и выдерживают при температуре 110 °С в течение 5 мин. На хроматограмме извлечение на уровне пятна СО ликуразида должно проявиться оранжевое пятно с R_f около 0,5, соответствующее пятну ликуразида; допускается наличие других пятен.

Примечания

Подготовка хроматографических пластинок. Пластинки разрезают поперек линий накатки соответственно на 2 части размером 10 х 7,5 см и перед использованием активируют в сушильном шкафу при
100-105 °С в течение 1 ч.

Приготовление раствора диазобензолсульфокислоты. 0,01 г диазобензолсульфокислоты растворяют в 10 мл 10 % раствора натрия карбоната.

Раствор используют свежеприготовленным.

Приготовление раствора СО глицирама. Около 0,025 г (точная навеска) СО глицирама растворяют в мерной колбе вместимостью 25 мл в 10 мл 50 % спирта. Доводят объем раствора до метки 50 % спиртом и перемешивают. Срок годности раствора 1 месяц.

Приготовление раствора СО ликуразида.

Около 0,025 г (точная навеска) СО ликуразида растворяют в мерной колбе вместимостью 25 мл в 10 мл 95 % спирта. Доводят объем раствора до метки 95 % спиртом и перемешивают. Срок годности раствора 1 месяц.
Числовые показатели. Цельное сырье. Неочищенноесырье. Содержание глицирризиновой кислоты не менее 6 %; суммы флавоноидов в пересчете на ликуразид, не менее 1,5%; влажность не более 14 %; золы общей не более 8 %; золы, нерастворимой в хлористоводородной кислоте, не более 2,5 %; корней, дряблых в изломе, желто-коричневых и остатков стеблей, не более 4 %; органической примеси не более 1 %; минеральной примеси не более 1 %.

Очищенное сырье. Содержание глицирризиновой кислоты не менее 6 %; суммы флавоноидов в пересчете на ликуразид, не менее 1,5%; влажность не более 14 %; золы общей не более 6 %; золы, нерастворимой в хлористоводородной кислоте, не более 1 %; корней, плохо очищенных от пробки, не более 15 %; корней, потемневших и темно-коричневых с поверхности, но светло-желтых в изломе, не более 20 %; органической примеси не более 1 %; минеральной примеси не более 1 %.

Примечание. Плохо очищенными считаются корни с остатками более 3 участков темно-коричневой пробки на одном куске или при поперечнике остатков пробки более 10 мм.
Измельченное сырье. Неочищенное сырье. Содержание глицирризиновой кислоты не менее 6 %; суммы флавоноидов в пересчете на ликуразид, не менее 1,5%; влажность не более 14 %; золы общей не более 8 %; золы, нерастворимой в хлористоводородной кислоте, не более 2,5 %; частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 10 мм, не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, не более 5 %; органической примеси не более 1 %; минеральной примеси не более 1 %.

Очищенное сырье. Содержание глицирризиновой кислоты не менее 6 %; суммы флавоноидов в пересчете на ликуразид, не менее 1,5%; влажность не более 14 %; золы общей не более 8 %; золы, нерастворимой в хлористоводородной кислоте, не более 2,5 %; частиц корней, потемневших с поверхности, не более 15 %; частиц, плохо очищенных от пробки, не более 3 %; частиц крупнее 6 мм не более 10 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, не более 2 %; органической примеси не более 1 %; минеральной примеси не более 1 %.

Порошок. Содержание глицирризиновой кислоты не менее 6 %; суммы флавоноидов в пересчете на ликуразид, не менее 1,5%; влажность не более 14 %; золы общей не более 8 %; золы, нерастворимой в хлористоводородной кислоте, не более 2,5 %; частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, не более 10 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, не более 10 %; минеральной примеси не более 1 %.

Количественное определение.

Определение содержания глицирризиновой кислоты. Около 2,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу коническую со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 20 мл 96 % этилового спирта. В колбу вносят 20 мл 3 % ацетонового раствора кислоты трихлоруксусной и нагревают на водяной бане в течение 30 минут. Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр, колбу промывают двумя порциями ацетона по 5 мл и выливают в общий объем. К полученному фильтрату прибавляют по каплям раствор аммиака концентрированный (не встряхивая колбу) до появления обильного осадка (рН от 8,3-9 по универсальному индикатору).

Раствор с осадком переносят на фильтр. Колбу и фильтр промывают 10 мл ацетона. Осадок с фильтром переносят в колбу, в которой проводилось осаждение, и растворяют в 50 мл воды, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл и доводят объем раствора водой до метки (раствор А). 1 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора водой до метки (раствор Б).

Оптическую плотность раствора Б измеряют на спектрофотометре при длине волны 258 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора Б СО глицирама.

Содержание глицирризиновой кислоты в пересчете на глицирам в процентах (Х) рассчитывают по формуле:

D х m_o х 250 x 25 х 5x 100 х 100 D х m_o x 250000

Х = ---------------------------------------- = -------------------------- , где

m x 1 x D_o х 50 х 25 х (100 – W) m x D_o х (100 – W)
D – оптическая плотность испытуемого раствора (Б) при длине волны 258 нм;

D₀ – оптическая плотность раствора СО глицирама (Б) при длине волны 258 нм;

m – масса сырья, г;

m_o – масса СО глицирама, г;

W – потеря в массе при высушивании, %.

Примечание

Приготовление раствора СО глицирама. 0,025 г глицирама растворяют в мерной колбе вместимостью 50 мл в 15 мл 50 % этилового спирта и доводят объем раствора 50 % этиловым спиртом до метки (раствор А). 5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и объем раствора доводят водой до метки (раствор Б). Срок годности раствора 1 месяц.

Приготовление 3 % ацетонового раствора кислоты трихлоруксусной.

3 г кислоты трихлоруксусной растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в 70 мл ацетона и объем доводят ацетоном до метки.
Определение содержания флавоноидов. Около 1,0 г корней солодки (точная навеска) помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл 70 % спирта, взвешивают на тарированных весах с точностью до +0,01 г и извлекают на кипящей водяной бане в течение 1 часа. Затем извлечение охлаждают в течение 30 мин, доводят массу колбы с содержимым до исходной и извлечение фильтруют. 1 мл извлечения вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем 96% этиловым спиртом до метки (раствор сравнения). 1 мл извлечения вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 2 мл 2 % спиртового раствора хлорида алюминия и доводят объем раствора до метки объем 96 % этиловым спиртом (испытуемый раствор). Измеряют оптическую плотность растворов на спектрофотометре при длине волны 420 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения раствор извлечения без добавлений хлорида алюминия. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора Б СО ликуразида на фоне раствора Б данного стандарта.

Содержание флавоноидов в пересчете на ликуразид в процентах (Х) рассчитывают по формуле:

D х m_o х 30 x 25 х 1x 100 х 100

Х = ---------------------------------------- , где

m x 1 x D_o х 50 х 25 х (100 – W)
D – оптическая плотность испытуемого раствора (Б) при длине волны 420 нм;

D_О – оптическая плотность раствора СО ликуразида (Б) при длине волны 420 нм;

m – масса сырья г;

m_o – масса СО ликуразида г;

W – потеря в массе при высушивании, %.

Примечание

Приготовление раствора СО ликуразида. Около 0,025 г (точная навеска) СО ликуразида растворяют в мерной колбе вместимостью 25 мл в 10 мл 95 % спирта. Доводят объем раствора до метки 95 % спиртом и перемешивают (раствор А). В мерную колбу емкостью 50 мл помещают 1 мл раствора А, добавляют 2 мл 2 % раствора алюминия хлорида и перемешивают (раствор Б). Параллельно готовят раствор сравнения без добавления алюминия хлорида. Срок годности раствора 1 месяц.
Тяжелые металлы. Определение проводят согласно ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радиоактивность. Определение проводят согласно ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье».

Остаточные количества пестицидов. Определение проводят согласно ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. Определение проводят согласно ОФС «Микробиологическая чистота».

Упаковка, маркировка и транспортирование. Осуществляется с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья».

Хранение. Хранение ЛРС осуществляется с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».