токса. Химикотоксикологический анализ в ветеринарии. Цель, задачи и порядок его проведения. Правила отбора и пересылки проб патологоанатомического материала, корма, воды, химикатов в лабораторию для анализа
Скачать 77 Kb.
|
Содержание: Химико-токсикологический анализ в ветеринарии. Цель, задачи и порядок его проведения. Правила отбора и пересылки проб патологоанатомического материала, корма, воды, химикатов в лабораторию для анализа…………………………………2 Характеристика отравления животных соединениями фтора. Химико-токсикологический анализ при отравлении животных соединениями фтора………6 Ситуационная задача……………………………………………………………………10 Список использованной литературы…………………………………………………….. Химико-токсикологический анализ в ветеринарии. Цель, задачи и порядок его проведения. Правила отбора и пересылки проб патологоанатомического материала, корма, воды, химикатов в лабораторию для анализа. Цель, задачи и особенности химико-токсикологического анализа. Химико-токсикологический анализ в ветеринарии имеет целью своевременно обнаруживать с помощью современных методов исследований ядовитые вещества в объектах окружающей среды, которые оказывают или могут оказать отрицательное влияние на организм животных, рыб и пчел, а также загрязнять продукты питания животного происхождения. Результаты анализа используют для постановки диагноза при заболеваниях и гибели животных, для решения вопроса о пригодности кормов и продуктов питания с остаточными количествами ядовитых веществ и самое главное — для разработки научно обоснованных рекомендаций по профилактике отравлений животных и человека. Ветеринарный химико-токсикологический анализ имеет ряд существенных особенностей, которые отличают его от аналитических методов исследований других профилей: 1) большое разнообразие объектов исследований, имеющих широкий диапазон физических и химических характеристик (корма и кормовые добавки различной консистенции, жидкости и ткани животного организма, многокомпонентные минеральные удобрения и пестициды, вода, насекомые, микроорганизмы и др.); 2) нередко отсутствие ориентировочных данных о характере и происхождении ядовитого вещества, вызвавшего отравление, что значительно осложняет и затягивает оперативное решение вопроса; 3) способность многих ядов подвергаться в организме животных и растений биотрансформации с образованием более токсичных или приближающихся к естественным веществам метаболитов; 4) необходимость изолировать (извлекать) ничтожные количества ядовитых веществ из сравнительно больших объемов тканей животных, где они находятся в сложных и прочных комплексах с белками и другими органическими веществами; 5) необходимость производить сложное разделение и очистку анализируемых проб от многочисленных естественных примесей, затрудняющих определение конкретного ядовитого вещества или его метаболитов; 6) необходимость по результатам исследований и анализа других данных (анамнеза, клинических симптомов заболевания и патологоанатомических признаков) сделать единственно правильное заключение даже при наличии отрицательного результата. Это самый трудный и ответственный момент в работе химика-токсиколога. Правила взятия, упаковки и пересылки проб патма-териала, кормов и воды в лабораторию. Отбор проб для химико-токсикологических исследований, упаковка и пересылка материала проводятся в строгом соответствии с правилами, предусмотренными Ветеринарным законодательством СССР. Они рекомендуют при подозрении на отравление обязательно направлять трупный материал для химического, а в случае необходимости гистологического и бактериологического исследований. Особенности патологоанатомического вскрытия заключаются в тщательном наружном осмотре трупа, естественных отверстий, слизистых оболочек, ротовой, грудной и брюшной полостей, содержимого разных отделов пищеварительного тракта с определением его объема или массы, степени густоты, общего вида, цвета, запаха, реакции (кислой или щелочной). Одновременно отмечают макроскопические изменения глотки и пищевода, внутренних органов, слизистых и серозных оболочек, лимфоузлов, мочевого пузыря, головного мозга. Пробы патматериала отбирают в химически чистую сухую стеклянную посуду с притертыми стеклянными, не бывшими в употреблении корковыми или пластмассовыми пробками. Для химического исследования в отдельных банках направляют (по 0,5 кг): часть желудка со средней пробой содержимого, часть тонкого и толстого кишечника с содержимым (перевязанных с обеих сторон), часть печени с желчным пузырем, одну почку, мочу, скелетную мускулатуру. В некоторых случаях дополнительно посылают часть кожи с подкожной клетчаткой и мышцами, наиболее полнокровную часть легкого, трахею, часть сердца, селезенки, головного мозга и кровь. От мелких животных и птиц посылают целые органы или трупы. Иногда с целью судебной экспертизы проводят эксгумацию (отрытие из земли) трупа. В этом случае для исследования направляют сохранившиеся внутренние органы (до 1 кг), скелетную мускулатуру (до 1 кг), землю под трупом и над трупом (0,5 кг). Кроме проб патматериала, посылают все корма, которые скармливали животному перед смертью, и остатки корма из кормушки (по 1 кг). Для определения ядовитых растений отбирают среднюю пробу травостоя пастбища или луга, для чего в 3— 5 местах на гектар вырезают под корень всю растительность в рамке площадью 1 м2. Растения в свежем или высушенном виде направляют в коробках или плетеных корзинах. Иногда есть необходимость направить пробы минеральных удобрений, ядохимикатов и других веществ, которые могли бы быть источником отравлений. При жизни животных отбирают пробы рвотных масс, мочу, кал, содержимое желудка, полученное с помощью зонда, корма и все подозреваемые вещества. В случае массовой гибели рыб в водоемах отбирают среднюю пробу воды (до 2 л с разной глубины и разных мест), трупы рыб (не менее 5 каждого вида), высушенный донный ил (0,5 кг), иногда фитопланктон. При отравлении пчел отбирают 400—500 г подмора, рамку с пергой и сотовый мед (100 г). Материал, взятый для химического исследования, не следует обмывать и консервировать. Если отправка его задерживается или на пересылку требуется более 3— 5 дней, разрешается только залить его спиртом-ректификатом в соотношении 1:2. При этом пробу спирта (50 мл) посылают вместе с патматериалом в отдельной посуде. Поверх пробки банку обвертывают чистой бумагой, обвязывают тонким шпагатом, концы которого припечатывают сургучной печатью. На каждую банку наклеивают этикетку, где чернилами записывают характер материала, его массу, вид и кличку животного, дату падежа и вскрытия трупа животного, какое отравление подозревается. Материал отправляется в лабораторию немедленно с нарочным. Одновременно оформляют и посылают в запечатанном конверте почтой или с нарочным сопроводительное письмо по утвержденной форме, копию истории болезни и копию акта вскрытия. В сопроводительном письме указывают вид, кличку, пол и возраст животного, сколько банок с материалом направляют и что в каждой банке, а также предположительный диагноз и вид предполагаемого яда. В копии истории болезни животного особое внимание уделяют анамнестическим данным, характеру клинических признаков отравления и примененному лечению. В копии акта вскрытия подробно описывают характерные патологоанатомические изменения без подмены патологоанатомическим диагнозом. Общая схема и порядок химико-токсикологического исследования. Перед началом исследований химик-ток-сиколог обязан детально ознакомиться с сопроводительными документами и убедиться в достоверности присланного материала путем осмотра целостности упаковки, надписей и печатей. Иногда есть необходимость выяснить, исключены ли инфекционные заболевания. После осторожного вскрытия упаковок проводят внешний осмотр проб, результаты которого подробно заносят в рабочий журнал. Обычно присланный материал ориентировочно разделяют на три части (особенно при массовых отравлениях): одну часть опечатывают для хранения не менее 6 мес; две части используют для качественного и количественного определения ядовитых веществ. С целью предотвращения химического превращения их материал необходимо исследовать в день поступления, особенно в случаях прижизненного подтверждения диагноза. Анализ начинают с составления плана исследований, который определяется результатами изучения сопроводительных документов и внешнего осмотра проб. От правильности составленного плана во многом зависит оперативность и точность исследований. При этом необходимо учитывать, что объекты анализа в большинстве случаев неповторимы. Ориентирами в выборе направления исследований могут быть специфический запах (чеснока при отравлении фосфидом цинка, аммиака — карбамидом, миндаля — цианидами, мышиной мочи — болиголовом пятнистым), окраска (сине-зеленая содержимого кишечника при отравлении солями меди; серовато-чериая — соединениями свинца, желтая — пикриновой или азотной кислотами, соединениями хрома), кислая (при отравлении кислотами, солями сильных кислот и тяжелых металлов) или; щелочная (при отравлении едкими щелочами, солями аммония и карбамидом, карбонатами и силикатами) реакция материала, наличие посторонних { включений (кристаллы солей и пестицидов, кусочки свинца, семена и другие части ядовитых растений), которые осторожно отбирают и тщательно изучают при помощи лупы, иногда микроскопа и химических реакций. Каждый присланный объект исследуют отдельно при помощи чувствительных и специфических методов и реакций, которые предварительно со всеми тонкостями освоены токсикологом. Иногда целесообразно провести параллельно контрольное исследование с чистым веществом, наличие которого предполагается в объекте. Но во всех случаях ставят «холостой» опыт с теми же реактивами и последовательностью реакций, но без определяемого вещества. В случае появления каких-либо отклонений необходимо реактивы подвергнуть дополнительной очистке. В зависимости от степени чистоты различают химические реактивы следующих квалификаций: чистый — ч. (с этикеткой или полосой на этикетке красного цвета), чистый для анализа — ч. д. а. (синего цвета), химически чистый — х. ч. (зеленого цвета), особой чистоты — ос. ч. (желтого цвета) и прочие реактивы (светло-коричневого цвета). На посуде с ядовитыми реактивами наклеена дополнительная желтая этикетка с надписью «Яд», с огнеопасными — красная с надписью «Огнеопасно»; взрывоопасными — голубая с надписью «Взрывоопасно», несовместимыми с водой — зеленая с надписью «Беречь от воды». В случае отсутствия каких-либо сведений о предполагаемой причине отравления животных химик-токсиколог должен проводить анализ по предполагаемой примерной схеме: выявление металлических ядов и мышьяка, изолируемых минерализацией; алкалоидов и сапонинов в кормах; цианидов, изолируемых отгонкой с водяным паром; нитратов, нитритов, карбамида и натрия хлорида; соединений фтора; ТМТД и ртутьорганических протравителей зерна; ФОС и ХОС. Иногда при отсутствии специфических методов обнаружения яда проводят биопробу на животных, рыбах или насекомых. Все химические исследования по каждой экспертизе выполняет от начала до конца один химик-токсиколог. В случае качественного обнаружения яда проводят затем количественное определение, желательно несколькими методами. Все выполняемые операции и реакции в хронологической последовательности тщательно заносят в рабочий журнал, а при количественном определении и расчеты. Каждое полное исследование заканчивают составлением экспертизы или акта химико-токсикологического исследования по утвержденным формам, которые являются юридическим документом. В заключение указывают, обнаружены или не обнаружены ядовитые вещества (перечислить) и в каких концентрациях. На основании результатов исследований приводятся рекомендации по профилактике отравления животных. Характеристика отравления животных соединениями фтора. Химико-токсикологический анализ при отравлении животных соединениями фтора. Фторсодержащие вещества необходимы для обеспечения жизнедеятельности животных. Больше всего их находится в зубах, они входят в состав фторапатитов — составной части зубной эмали. Фтор также необходим для функционирования костной ткани; он влияет на активность некоторых ферментов, участвующих в минеральном, углеводном, жировом и белковом обменах. При недостатке фторсодержащих веществ в воде и кормах в первую очередь развивается кариес зубов. Однако более опасно избыточное поступление в организм фторсодержащих соединений, в результате чего наступает острое и хроническое отравление фтором (флюороз). Наиболее часто интоксикации фтором отмечаются в биогеохимических регионах страны, в которых содержание фторсодержащих веществ в воде составляет во много раз больше допустимых уровней (согласно ГОСТу в питьевой воде допускается 0,7— 1,5мг/л). В водоисточниках, особенно артезианских, где имеются залежи фосфоритов, содержание фтора в некоторых местах на Курильских островах достигает 52 мг/л*. в Бурятии — 25, на Урале — 3 мг/л. Есть такие регионы в Мордовии и в других регионах стра ны. Кроме того, фтор в значительных количествах, нередко превышающих 1000 мг/кг, может содержаться в кормовых фосфатах, кормах микробного синтеза, минеральных подкормках, таких, как мел, моно- и трикальцийфосфат. Нередко фтор проникает из почвы в кормовые растения в зоне промышленных предприятий, производящих алюминий, стекло, кирпич, фарфор, керамику, цемент* минеральные удобрения (суперфосфаты), а также в местах сталеплавильных, каменноугольных печей и других производств. Некоторые инсектициды и гербициды также являются фторсодержашими веществами. Димилин (дифлубензурон). Белое кристаллическое вещество, плохо растворимое в воде. Малотоксичный пестицид— Л.Д50 для лабораторных животных при введении внутрь, 4640 мг/кг. Неток сичен для пчел и птиц; СК50 для рыб 100—125 мг/мл. Нестоек в окружающей среде, быстро разлагается в воде. / Применяют в качестве инсектицида для опрыскивания яблонь, капусты, городских насаждений, лиственных и хвойных деревьев, пастбищ для уничтожения листогрызущих и саранчовых вредителей. Трефлан, нитрон (трифлуралин). Кристаллические вещества светло-желтого цвета, плохо растворимые в воде; ЛД50 для крыс 2020 мг/юу для кроликов ПООмг/кг, Малотоксичны для пчел и полезных насекомых; СК50 для рыб 0,012—0,07 мг/л. Применяют очень широко как гербициды для опрыскивания почвы до посева или высадки рассады на посадках сои, подсолнечника, клещевины, льна-долгунца, капусты, томатов, моркови, фасоли, лука, люцерны, бахчевых культур, рапса, люпина белого и цветочных семенных посевов. Трефлан не накапливается в надземной части большинства растений. Остатки гербицида могут обнаруживаться в верхних слоях и кожуре некоторых корнеклубнеплодов. Фюзилад, фузилад (флуазифоп-П-бутил). Светло-желтые жидкости без запаха. В воде растворяются плохо (2 мг/л). Малотоксичны — ЛДзо ДДЯ крыс 3328 мг/кг, для мышей 1490мг/кг. Сильно раздражают конъюнктиву, умеренно — кожу. Малотоксичны для пчел, умеренны для рыб — СК^ 0,57—1,37 мг/л, неопасны для птиц. Не влияют на земляных червей и микрофлору почвы. Быстро разлагаются в почве. Применяют как гербициды для уничтожения сорняков при высоте их 10—15 см на посевах льна-долгунца, свеклы кормовой и сахарной, подсолнечника, рапса, бобовых кормовых культур, клевера, лекарственных и других культур. Галакси Топ. Комбинированный пестицид, содержащий бентазон (производное тиадиазина) и ацифлуорфен (фторсодержащее вещество). Используется в зоне Дальнего Востока как гербицид для опрыскивания сои в фазе 2—6 листьев сорняков. В качестве гербицидов применяют и другие фторсодержащие соединения. Учитывая, что все пестициды, содержащие фтор, малотоксичные вещества, отравления ими маловероятны. Острые Отравления фтором в последнее время встречаются крайне редко, и возможны они только у крупного рогатого скота, овец, иногда свиней и птиц. Более чувствительны к соединениям фтора молодые, беременные и лактирующие животные. Безопасная суточная доза фтора для животных составляет 1 мг/кг массы. Фтор более токсичен в питьевой воде, нежели в кормах, что объясняется лучшей всасываемостью фтора, когда он поступает в форме раствора. Токсикодинамика. Большие количества фторсодержащих соединений местно действуют раздражающе на слизистые оболочки желудочно-кишечного тракта, в связи с чем нарушается их функция. Довольно быстро всосавшийся фтор взаимодействует с ионизированным кальцием крови, что приводит к резко выраженной гипокальциемии. Фтор также блокирует сульфгидрильные группы, в результате этого угнетается активность фермента енолазы, что приводит к нарушению гликолиза. Понижение уровня активности ацетилхолинэстеразы и органической пирофосфатазы приводит кнарушению обмена углеводов и жирных кислот, а следовательно, к дефициту макроэргических соединений. Активность трансаминаз сыворотки крови увеличивается в результате нарушения целостности клеточных мембран печени. При спонтанной и экспериментальной фторинтоксикации уменьшаются количество эритроцитов, лейкоцитов и гемакритный показатель и отмечается угнетение фагоцитарной активности нейтрофилов; снижается бактерицидная активность сыворотки крови, лизоцима, а также значительно угнетается синтез специфических антител, что свидететельствует об иммунодепрессивном действии фтора. При поступлении соединений фтора в организм животных в токсических количествах снижается воспроизводительная функция животных и проявляется гонадотоксический и эмбриотоксический эффект. Репродуктивная функция нарушается в результате понижения активности половой охоты, оплодотворяемости, плодовитости и жизнеспособности потомства; снижаются и инкубационные качества яиц. При длительном поступлении в организм животных фтора с водой и кормами в повышенных количествах нарушается фосфорно-кальциевый обмен, снижаются минерализация зубов и костей, функция щитовидной железы в результате замещения йода фтором в процессе синтеза тироксина, резистентность организма и воспроизводительная способность животных. Клинические признаки. При подостром течении флюороза, когда в организм животных фтор поступает в значительных количествах с водой, наблюдаются угнетение животных, залеживание, хромота, снижение аппетита, тусклость шерстного покрова, истощение. Слизистая оболочка десен воспалена, отечна, болезненна, гиперемирована, иногда кровоточит. Зубы шатаются, эмаль теряет блеск, на зубах появляются бледно-желтые и белые блестящие продольные полоски, реже точки и пятна. У коров резко снижается молочная продуктивность. При хроническом течении флюороза у крупного рогатого скота, и особенно у молодняка, первые признаки болезни (поражение зубов) при поступлении фтора с водой в количестве 8 мг/л и более появляются через 4—8 мес. При этом зубы становятся неровными, волнистыми, шаткими, а десны воспалены. В последующем на зубах возникают бледно-желтые, а иногда молочно-белые блестящие точки и пятна. В дальнейшем на нижней или средней трети коронки пятна становятся желтыми или темно-коричневыми, особенно на губной поверхности эмали коронок. Длина таких коронок заметно уменьшается, зубы шатаются, десны воспалены, молочные резцы деформируются. Наряду с изменениями на зубах появляются экзостозы (нарост на костях) и анкилозы суставов, а при тяжелых формах — слоновость конечностей. Смесь дают животным вместе с концентрированными кормами 1 раз в день. Смесь применяют с профилактической целью в течение всего периода употребления воды с избытком фтора, а с лечебной целью до исчезновения клинических симптомов флюороза. Патологоанатомические изменения. У крупного рогатого скота при эндемическом и экспериментальном флюорозе отмечают снижение упитанности, уменьшение отложения внутреннего жира, наличие на костях конечностей и челюстей экзостазов величиной от горошины до куриного яйца. Зубы неровные, частично разрушены, на коронках желто-коричневые или черного цвета пятна, кости размягчены. Слизистая оболочка сычуга и тонкого кишечника катарально воспалена. Легкие гиперемированы, с очагами отека. Почки незначительно увеличены, печень кровенаполнена, селезенка уменьшена и бледного цвета. У свиней кроме общих патологических изменений вблизи режущего края зубов ярко выражены поперечная крапчатость и гипоплазия эмали, неравномерное стирание зубов; они хрупкие и часто разрушившиеся. У кур из ротовой и носовой полостей выделяется мутная жидкость, сережки и гребешки синюшные, перья тусклые, а вокруг клоаки они загрязнены испражнениями. Ветсанэкспертиза. Больше всего фторсодержащих веществ у молодняка крупного рогатого скота накапливается в костях и состар-ляют в зависимости от возраста и содержания их в воде 1,5 мг/л, у молодняка животных — около 400 мг/кг, у коров старше 10 лет — более 1000, в печени —0,5 и 2,8, в мышечной ткани —0,6 и 0,8 мг/кг соответственно. При содержании фтора в воде около 10 мг/л в костях молодняка накапливается до 1800 мг/кг, у старых животных — более 3000, в печени — 3 и 4 и в мышечной ткани — 0,7—2,7 мг/кг соответственно. Аналогичная закономерность в накоплении фтора отмечается и у других животных. Учитывая, что содержание фтора в мясных и молочных продуктах допускается до 3 мг/кг, мясо и молоко при фторинтоксикации можно использовать в пищу без ограничений. Биологическая полноценность мяса снижается за счет уменьшения содержания в нем триптофана и избытка оксипролина (Ф. И. Мандрик, 1988). Профилактика. Строительство новых животноводческих ферм и комплексов следует проводить только в местах, где вода для водопоя животных отвечает требованиям ГОСТа по фтору. Нельзя вносить в почву фосфорсодержащие удобрения (суперфосфаты) в избыточных количествах, если они имеют высокое содержание фтора. Суммарное содержание фтора в воде (для поения животных, в том числе птиц), кормах и фосфатных кормовых добавках не должно превышать 0,65—1 мг/кг массы животных. При избыточном содержании фтора в воде и кормах необходимо давать животным с кормом смесь веществ, указанных в лечении. Ситуационная задача. На ферме воинской части в Нижегородской области, произошло заболевание 12 свиней. Животные вяло поедали корм, некоторые отказывались от корма; основные клинические показатели в норме. Затем появились признаки ослабления сердечной деятельности, поносы, признаки анемии. У двух убитых для уточнения диагноза свиней обнаружены внутренние кровоизлияния. Из анамнеза установлено, что изменения в поведении животных появились после скармливания свиньям пропаренного картофеля, а приглашенный ветврач отметил, что картофель пропаривался в оцинкованных тазах и довольно часто оставался в них до скармливания на 16-20 часов. Гематологические исследования показали снижение уровня гемоглобина, низкий уровень церулоплазмина и содержание меди в почках и печени. В кормах содержание меди было в норме. |